首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   620篇
  免费   80篇
  国内免费   268篇
  2024年   7篇
  2023年   8篇
  2022年   18篇
  2021年   36篇
  2020年   27篇
  2019年   40篇
  2018年   17篇
  2017年   25篇
  2016年   20篇
  2015年   32篇
  2014年   37篇
  2013年   51篇
  2012年   66篇
  2011年   77篇
  2010年   66篇
  2009年   59篇
  2008年   62篇
  2007年   56篇
  2006年   52篇
  2005年   54篇
  2004年   31篇
  2003年   33篇
  2002年   21篇
  2001年   18篇
  2000年   16篇
  1999年   7篇
  1998年   5篇
  1997年   1篇
  1995年   2篇
  1994年   3篇
  1993年   4篇
  1992年   2篇
  1991年   2篇
  1990年   2篇
  1989年   2篇
  1987年   2篇
  1984年   1篇
  1983年   2篇
  1982年   1篇
  1981年   1篇
  1977年   1篇
  1950年   1篇
排序方式: 共有968条查询结果,搜索用时 15 毫秒
871.
SARS病毒快速检测膜研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
建立一种快速检测严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)的方法。从SARS冠状病毒刺突蛋白基因中扩增出羧基端片段,克隆并表达。用经Ni-NTA树脂纯化的表达蛋白作为抗原包被硝酸纤维素膜,捕获感染SARS病人血清中的抗体。抗原抗体通过渗滤在膜上反应,5min肉眼即可观察到结果。通过比较不同试剂用量条件下的结果确定检测抗原的最佳浓度。通过本产品检测已经过ELISA验证的50份血清样品证明两种检测结果无显著性差异(P>0.05)。与ELISA相比,该检测方法特异性、灵敏性几乎相当,但具有简单、快速、成本低廉等ELISA所无法比拟的优点,适合于初步诊断和流行病学调查。  相似文献   
872.
将Cre-LoxP系统应用于Bacillus anthracis中并成功敲除eag基因.以B.anthracis基因组为模板扩增得到上下游同源臂,联合两端带有LoxP位点的壮观霉素抗性基因片段构建好同源重组载体,转化B.anthracis AP422,通过一系列筛选得到带有抗性标记的重组菌.然后,通过转入Cre重组酶表达质粒,去除抗性标记,得到eag基因缺失的重组菌,并在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行了系统的鉴定.最终建立了Cre-LoxP系统在B.anthracis中的应用方法,并成功敲除eag基因.  相似文献   
873.
地衣芽孢杆菌ws-6产纤维素酶条件优化   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:通过优化该菌产酶条件,以期在饲料中的进一步应用建立基础。方法:纤维素酶活性用还原糖法测定,产酶条件采用单因素筛选与正交优化方法相结合。结果:培养基初始pH6.5、培养温度37℃、接种量2%2、50 mL三角瓶装液量30 mL、葡萄糖1.5%、羧甲基纤维素钠0.5%、酵母膏1.5%、KH2PO40.05%、NaCl 0.5%,培养48h后酶活性达到最高3.45U/mL;金属离子K+、Mn2+、Mg2+、Zn2+、Co2+、Na+对产酶有激活作用,Cu2+则抑制酶活性。结论:酶活性比出发菌提高约1.4倍,对饲料制作中提高纤维降解具有一定的实用价值。  相似文献   
874.
激光消融技术在生物骨硬组织领域具有广泛的应用前景.选用脉冲CO2激光对离体牛胫骨组织进行消融,以电钻作为参照组,体视显微镜和扫描电子显微镜观察骨组织弹坑的形态学变化,光学相干层析成像(OCT)技术测量弹坑消融深度.比较结果表明:脉冲CO2激光辐照骨硬组织后产生的消融凹陷在几何形状和形态学方面与电钻的磨削效果相类似.此外,喷水速率为31 mL/min时可减少热损伤,并提高消融效率.  相似文献   
875.
从769条含SSR位点的高粱EST序列中设计了103对EST-SSR引物.用设计出的103对EST-SSR引物,对高粱品种TX623A和苏丹草品种S722进行了PCR扩增和多态性检测.结果表明:80对引物同时在两品种中扩出了条带,占引物总数的77.7%,20对引物在两品种中表现出多态性,占引物总数的19.4%,占能在两品种中扩出带引物的25.0%.研究结果表明根据高粱EST建立高粱与苏丹草EST-SSR标记是有效、可行的.  相似文献   
876.
丙型肝炎病毒(HCV)是造成慢性肝炎,肝硬化及肝癌的重要原因之一,目前全球约有1.7亿人感染HCV。然而缺乏有效的HCV感染模型,严重阻碍了对HCV致病机制的认识。最近几年以JFH1株和Huh-7细胞系为基础,通过对不同病毒株基因组的重组和细胞系的优化,进一步提高其感染能力,在HCV感染系统的建立上取得了突破性进展。我们简要综述近几年在HCV感染细胞模型方面取得的进展。  相似文献   
877.
为了快速、准确的对白桦多个样品进行基因表达分析,本研究应用荧光定量PCR技术,对白桦持家基因微管蛋白基因(Tu)和泛素基因(UbQ)在不同处理的细胞及不同树龄或不同生长季节白桦植株各部位表达的稳定性进行检测。结果表明,对于茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)处理的白桦细胞和不同生长季节白桦植株的基因定量表达分析,可同时使用Tu和UbQ平衡化qRT-PCR数据;而针对不同树龄白桦茎皮中基因表达研究时,单独使用UbQ基因作为内参对照即可获得精确的表达数据。  相似文献   
878.
目的 探讨Smad3基因对剔除小鼠血清酶活性的影响。方法 采用荷兰半自动生化分析仪对 35日龄、70日龄、6月龄的三种不同基因型的小鼠的ALP、AST、ALT、CK、LDH L进行测定。结果 纯合型小鼠各项指标较野生型高 ,且表现出ALP随着年龄的增长而降低 ;AST、ALT、CK、LDH L随着年龄的增长而增高。结论 Smad3基因的剔除对小鼠的血清酶活性有一定的影响 ,为该小鼠的进一步研究提供基础。  相似文献   
879.
通过测定甘肃民勤绿洲外围不同演化阶段灌丛沙堆表面抗剪强度,选取稳定阶段灌丛沙堆,定位观测结皮和植被去除前后灌丛沙堆表面侵蚀速率,研究了白刺灌丛沙堆表面抗蚀性及其影响因素,结果表明:稳定阶段灌丛沙堆土壤抗剪强度最大,在0.31~0.79 kg·cm-2,雏形阶段最小,在0.06~0.15 kg·cm-2,稳定阶段灌丛沙堆的土壤抗剪强度显著高于其它演化阶段(P<0.01);除退化阶段外,其它演化阶段不同坡位土壤抗剪强度差异均不显著(P>0.05).去除结皮和植被后,稳定阶段灌丛沙堆表面抗剪强度迅速下降,去除前后差异显著(P<0.01),去除后不同坡位差异不显著(P>0.05).保留结皮和植被,灌丛沙堆不同部位均出现堆积;去除结皮但保留植被,灌丛沙堆堆积量开始减小;去掉植被保留结皮,灌丛沙堆表面堆积量迅速减小;去除结皮和植被后,灌丛沙堆表面出现严重风蚀.  相似文献   
880.
构建基于校园网的《农业微生物学》教学论坛   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文分析了基于校园网的教学论坛辅助课堂教学的重要性和可行性,以《农业微生物学》教学论坛为例,介绍了该论坛的设计、技术实现、建设内容、特色和有待加强之处,展望了基于校园网的教学论坛的前景。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号