Serum Opens Tight Junctions and Reduces ZO-1 Protein in Retinal Epithelial Cells

Abstract: We have shown previously that serum inhibits tight junction formation in a retinal epithelial cell culture model for the blood-brain barrier. We have now examined in detail the effects of serum on the tight junctions. Our data show that serum induces a breakdown in tight junction function as indicated by decreased transepithelial electrical resistance and increased permeability. Rat serum had effects similar to those of bovine serum, indicating that the activity is species-independent. The effect is concentration-dependent, reversible, and specific for the apical surface, suggesting the involvement of a specific receptor-ligand interaction. Differences in the time course, response magnitude, and structural manifestations between the serum-induced breakdown and that induced by switching the cultures to a low-calcium medium suggest fundamental differences in their mechanisms. The calcium switch results in an immediate and complete junctional breakdown with cell retraction and perinuclear translocation of both actin and the tight junction protein zonula occludens-1. The serum-induced breakdown occurs slowly, is incomplete, and is manifested structurally by decreases in zonula occludens-1 protein, whereas actin organization is unchanged. Thus, serum induces a specific breakdown in retinal epithelial cell tight junctions that may be mediated by effects on the expression of zonula occludens-1.     

番茄果实中焦磷酸:D-果糖-6-磷酸 1-磷酸转移酶的两种酶型的分离纯化及其特性

用快速蛋白液相层析仪(FPLC)Mono Q柱(HR5/5)分离纯化成熟绿番茄果实中PFP的两种分子酶型及其特性。一种酶型为Q_1,是含两个β-亚基(60kD)的二聚体,比活为5μmol min~(-1) mg~(-1);另一种为Q_2,由四个α-亚基(66kD)和四个β-亚基(60kD)组成八聚体,比活为70.5μmol/min~(-1)·mg~(-1)。Q_1的分子量是120kD,Q_2的分子量介于500kD和530kD之间。用纯化的Q_2制备的抗血清专一地与Q_2起沉淀反应。PFP酶液贮存后,其Q_1/Q_2蛋白量比值增加明显,表明部分Q_2转化为Q_1。Q_1具有催化活力表明PFP的活性中心位于β-亚基。α-亚基可能借增强PFP酶对F2,6P_2的亲和力以提高酶的比活而起调节功能,但是Q_1的活力依赖于F2,6P_2的激活,表明β-亚基处也可能存在F_2,_6P_2的调节位点。Q_2含紧密结合的F2,6P_2分子,并表现出对F2,6P2_的不敏感性,基于此种现象,有必要重新认识PFP对F2,6P_2敏感性的内在实质。     

Pi和PGA对玉米叶片PFK-2/FBPase-2的作用

Fructose-6-phosphate 2-kinase and fructose 2,6-bisphosphatase have been partially purified from maize leaves by PEG fractionadon and by chromatography on TSK-DEAE ion exchanger and Blue-Sepharose 4B. Fructose-6-phosphate 2-kinase was activated by phosphate and inhibited by 3-pnosphoglycerate. Furctose 2,6-bisphosphatase was inhibited by inorganic phosphate and fructose-6-phosphate.The observed pattern of reguladon suggests that systhesis and degradation of Fru-2,6-P_2 respond to changes in the concentration of effectors. An increase in the level of glycerate-3-phosphate or dihydroxyacetonephosphate will result in a decrease in the level of Fru-2,6-P_2. Conversely a rise in Fru-6-P concentration will lead to an increase in the Fru-2, 6-P_2 concentration.     

五种索科线虫RAPD亲缘关系分析

采用RAPD技术构建了索科线虫4属5种的指纹图谱。从47个引物中筛选出12个稳定性好、多态性高的引物,共扩增出161条谱带,其中150条谱带具遗传多态性,占93·17%。所获片段长度大小为200~3200bp,单个引物扩增的条带数在11~16之间,平均为13·42条。采用RAPDistance软件及MEGA程序,计算Nei氏相似系数和遗传距离,建立UPGMA和NJ聚类图,两个聚类图拓扑结构相同,将5种索科线虫分为两大分支:同属于蚊幼寄生罗索属线虫的食蚊罗索线虫(Romanomermisculicivorax)与武昌罗索线虫(R.wuchangensis)亲缘关系最近,先聚在一起,再与同翅目(Homoptera)寄生长沙多索线虫(Agamermischang-shaensis)聚为一支;鳞翅目(Lepidoptera)寄生中华卵索线虫(Ovomermissinensis)和同翅目寄生两索属线虫(Amphimermissp·)亲缘关系较近,两者聚为一支。5种索线虫属内种间的遗传距离较小,食蚊罗索线虫与武昌罗索线虫之间遗传距离仅为0·1789;而属间遗传距离较大,在0·4471~0·5488之间。上述结果表明:RAPD技术可以应用于索科线虫亲缘关系的分析,能够反映出不同线虫间的遗传差距,从而成功地进行属、种的分类及进化问题研究。     

梳唇石斛成熟胚的离体培养和植株再生

1植物名称梳唇石斛(Dendrobium strongylanthum Rchb.f.). 2材料类别成熟种子. 3培养条件以MS和1/2MS为基本培养基.(1)种子萌发培养基:MS NAA 0.2 mg·L-1(单位下同) 6-BA 0.4 马铃薯汁200g·L-1;(2)原球茎诱导增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5;(3)原球茎分化培养基:1/2MS 6-BA 0.5 NAA 0.5 椰子汁200g·L-1 ;(4)壮苗及生根培养基:1/2MS NAA 0.5 香蕉泥100g·L-1 .上述培养基均附加20 g·L-1 蔗糖、8 g·L-1琼脂,pH 5.5～5.8.培养温度为(24±2)℃,光照时间12 h·d-1,光照度1 000～2000 lx.     

四川地区宫颈癌HPV59型感染及其E6基因突变

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,特定型别的人 乳头瘤病毒(HPV)感染是引发宫颈癌的主要因 素。根据HPV致癌性的不同可分为高危型,低 危型。Munoz N[2]等对来自9个国家的1918例宫 颈癌组织进行各型HPV筛查,最终确认HPV-16、 18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、 68、73及82型为高危型。李洁等[3]用核酸印迹技 术对1986至1994年间来自我国14个省市自治区 的1008宫颈癌组织进行HPV型别检测,发现 HPV-16、18、31、35、51、58等型的存在,并发现各 地区主要流行型别随地理位置有所差异。     

马尾松毛虫2、3代分化和干旱对种群时间动态的影响

通过对安徽冬至县金寺山林场27年中马尾松毛虫Dendrolimus punctatus Walker发生面积的时间序列和2、3代分化率及干旱记录进行相关分析,进一步探讨2、3代分化和干旱对马尾松毛虫种群时间序列动态的影响。马尾松毛虫2、3代分化率有一定的周期性,而且波动的幅度很大,大致可以分成低、中、高三个等级,三个等级的分化率范围分别为1%～10%,11%～40%和41%～100%。大致每隔5～6年出现一次高分化率,高分化率的前后往往是低分化率,高分化率之间一般是中等的分化率和低分化率交替出现。通过分析马尾松毛虫2、3代分化对种群时间序列动态的影响,说明2、3代分化主要影响当代的数量,与以后各代数量无明显相关。2、3代分化前的种群数量与2、3代分化也无明显的相关。中等以上的分化率常引起松毛虫的发生。影响2、3代分化的主要气候因子是7月份的气温,7月份的气温越高,卵孵化的高峰期越早,更多幼虫于分化的临界光周期以前孵化,分化率就高。干旱与2、3代分化有微弱的相关,对松毛虫时间动态的影响具有延迟作用,影响最明显的是第二年的第1代,这说明干旱不仅影响当代松毛虫的动态,更重要的是通过影响寄主,从而影响到以后世代的松毛虫动态。     

人口动力学中非线性发展方程解的爆破现象

讨论描述人口发展规律的一类非线性发展方程具有第三类非线性边界条件的混合问题．在已知函数满足某些假设条件下,证明了其解在有限时间内爆破．     

粘着斑激酶在TNF-α作用下影响SMMC-7721细胞PKB的表达水平

 探讨在肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用下 ,粘着斑激酶 (focal adhesion kinase,FAK)对蛋白激酶 B(PKB)蛋白水平的影响 .利用构建、转染 FAK反义质粒来特异性降低 SMMC- 772 1细胞的FAK含量 ,及用 Western杂交的方法来检测 PKB的蛋白含量 .文献报道 TNF- α能够激活磷脂酰肌醇 3-激酶 (PI3K)而使 PKB发生磷酸化 .但是至于 TNF-α对 PKB蛋白水平的影响目前并无报道 .研究发现 ,当用 wortmannin特异性抑制 PI3K活性后可以显著降低 PKB的蛋白含量 .提示PI3K对维持 PKB的基础蛋白水平是必需的 .但是 TNF- α本身对 PKB的蛋白水平无明显影响 .而当用不同浓度的 TNF- α和 wortmannin处理 SMMC- 772 1细胞时 ,发现 PKB的蛋白含量随着TNF-α浓度的增加而降低 .提示 TNF-α可能除了通过 PI3K外 ,还可能通过另一条途径来下调PKB的表达 .而当用 FAK反义质粒转染 SMMC- 772 1细胞后 (FAK下降了 60 % ) ,发现在当用不同浓度的 TNF- α处理的情况下 ,FAK反义质粒转染株 AS- 772 1细胞的 PKB含量降低为对照的70 % ;而在用 TNF-α和 wortmannin处理的情况下 ,下降为对照的 40 %～ 60 % .TNF-α能够通过PI3K及另一未知途径来影响 PKB的蛋白水平 .而 FAK在 TNF- α作用下能够不通过 PI3K来影响PKB的蛋白水平 .     

甲胺磷和17β－雌二醇对萼花臂尾轮虫实验种群动态的影响

对暴露于不同浓度的甲胺磷(0.01、0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0和10 000.0 μg·L-1)和17β-雌二醇(0.001、0.01、0.1、1.0、10.0、100.0、和1 000.0 μg·L-1)溶液中的萼花臂尾轮虫的种群动态进行了研究.结果表明:甲胺磷和17β-雌二醇对轮虫种群动态的影响存在差异.甲胺磷和17β-雌二醇对实验期间轮虫的平均种群增长率均有显著影响,但对轮虫种群中的混交雌体受精率的平均值无显著影响;甲胺磷对实验期间轮虫种群中的携卵雌体数/非携卵雌体数和混交雌体百分率的平均值均有显著影响,而17β-雌二醇则无显著影响;甲胺磷对实验期间轮虫的休眠卵总产量无显著影响,而17β-雌二醇的影响较显著.与对照相比,10.0～10 000.0 μg·L-1的甲胺磷和100.0 μg·L-1的17β-雌二醇均使轮虫的平均种群增长率显著提高;0.1～10 000.0和10.0 μg·L-1的甲胺磷分别显著地降低了实验期间轮虫种群中的携卵雌体数/非携卵雌体数和混交雌体百分率的平均值;1 000.0 μg·L-1的17β-雌二醇显著降低了轮虫的休眠卵总产量.在实验浓度范围内,轮虫平均种群增长率(Y,d-1)与甲胺磷浓度(X,μg·L-1)之间的关系为Y=-2×10-8X2 0.0002X 0.3474.种群增长率可用于监测和评价甲胺磷对轮虫种群动态的影响.