重组CHO细胞C_(28)株S基因序列的测定及分析

目的测定重组CHO细胞C28株S基因序列,研究其遗传稳定性,并与已全基因序列测定的乙型肝炎病毒的S基因序列进行比较分析,预测和揭示现有疫苗株对当前疾病流行株的防病效果。方法从C28株中选取第22代、24代2、5代2、7代、28代2、9代3、0代、31代3、2代3、3代和34代细胞,根据GenBank中C基因型adr亚型乙型肝炎病毒的全基因序列设计引物。采用酚-氯仿法抽提CHO细胞基因组DNA,用PCR法扩增各代次细胞的S基因,回收700 bp左右的目的片段,克隆至pMD18-T载体上进行序列测定。利用生物学软件MEGA4.1和BioEdit进行S基因序列同源性分析,绘制系统进化树,分析与其他HBV病毒株S基因的同源性。应用实验动物测定C28株生产的重组乙型肝炎疫苗的效价。结果 C28株十一个代次之间S基因序列核苷酸和氨基酸同源性均为100%;C28株十一个代次S基因与其他病毒株S基因比较,与C基因型乙型肝炎病毒同源性最高,与其他基因型乙型肝炎病毒的核苷酸同源性达91.4%～95.1%,氨基酸同源性达84.5%～93.3%。免疫NIH小鼠结果显示5批重组乙型肝炎疫苗的效价均符合标准。结论 C28株S基因在传代及保存过程中具有较高的稳定性,对当前疾病流行株有较好的防病效果。     

壳寡糖对不结球白菜子叶离体培养再生体系的影响

以不结球白菜（Brassica campestris L．ssp．chinensis Makino）子叶为外植体,考察壳寡糖对不结球白菜子叶离体培养再生体系的影响。在添加外源激素6．BA和NAA的条件下,比较了不同浓度（0．5、1．0、2．0和10．0mg·L^-1）壳寡糖对不结球白菜子叶形成愈伤组织、再生芽和再生不定根的影响。实验结果表明,低浓度的壳寡糖能促进子叶形成愈伤组织、再生芽。壳寡糖促进子叶形成愈伤组织和再生芽的最适浓度为0．5mg·L^-1,与其他浓度壳寡糖处理组相比,该浓度壳寡糖促进了子叶愈伤组织的形成,使出愈率达到92％。此外,该浓度壳寡糖能提高子叶的芽再生频率,使再生率达到80％,同时再生芽长度、叶绿素含量及外植体总鲜重达到最大,均显著高于对照组。然而,壳寡糖对再生芽生根有抑制作用,形成的不定根数目、平均根长和最长根长度均小于对照组。     

利用肠膜明串珠菌诱变株生产潘糖的研究

利用肠膜明串珠菌葡萄糖基转移酶 ,以蔗糖和麦芽糖作底物 ,将蔗糖的葡萄糖基转到麦芽糖上 ,生产低聚寡糖———潘糖。利用硫酸二乙酯作为诱变剂 ,对肠膜明串珠菌进行诱变 ,以提高其葡萄糖基转移酶的产酶活力。经诱变后 ,其产酶活力提高 4 8倍。     

多巴脱羧酶对异色瓢虫生殖力的调控机制

[目的]为了探究多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase,DDC)对异色瓢虫Harmonia axyridis生殖力的影响及其调控机制.[方法]利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),将异色瓢虫4龄幼虫的DDC基因(HaDDC)抑制表达,成虫羽化后第8天开始统计20 d内累计产卵量及产...     

Cd污染地草坪草中Cd分布特征及化学形态的研究

对种植在沈阳西郊Cd污染地上草坪草中Cd的分布及化学形态进行了分析研究。结果表明,Cd主要分布于草的根系中,而且在不同草种中的分布特征存在较大差异。有些草对土壤中的Cd无明显的富集作用,具有抗Cd能力;而有些草对Cd有较强的富集能力,通过研究不同溶剂对不同草种的浸提效能,探明了草中Cd以酸溶态为最多,约占总量的63.3%;水溶态和有机态Cd均很少,在迁移转化过程中酸溶态Cd具有较大活性,水溶态Cd随时间和温度的变化而呈一定的规律性,有机态Cd随介质极性的增强而活性加大。     

负压创面治疗肝源性糖尿病并发糖尿病足的研究

目的:讨论创面负压治疗促进肝硬化合并糖尿病并发糖尿病足的临床疗效。方法:将30例慢性肝硬化合并糖尿病并发糖尿病足患者随机分为创面负压治疗组和敷料包扎组,观察两组创面细菌负荷及创面微循环血流量变化。结果:清创即刻,负压创面治疗组和敷料包扎组细菌负荷与创面微循环血流量无显著差异(P>0.01);创后3天、6天和9天时,负压创面组创面细菌负荷低于敷料包扎组(P<0.01),创面微循环血流量高于敷料包扎组(P<0.01)。负压创面组创面愈合时间少于敷料包扎组(P<0.01)。结论:负压创面治疗有助于慢性肝硬化并发糖尿病合并糖尿病足的创面愈合。     

海南岛霸王岭热带季雨林树木的死亡率

树木死亡是调节群落组成和结构的一种方式, 在森林生态系统动态中发挥着重要作用。该文在对海南岛霸王岭热带季雨林群落大量调查和树种功能群划分研究的基础上, 探索了热带季雨林群落及其不同功能群树木的死亡率及其随径级和环境条件的变化规律。结果表明: 海南岛霸王岭热带季雨林群落内树木死亡率的变化范围为3.42%-18.71%, 平均值为7.60%。按照功能群比较, 乔木死亡率显著高于灌木, 落叶树种死亡率高于常绿树种, 但具刺树种死亡率显著低于无刺树种。按照树木径级划分, 5-30 cm径级范围的死亡率均超过10%, 最高值出现在5-10 cm径级范围, 在相同径级范围内比较时, 落叶树种在 胸径(DBH ) < 5 cm时的死亡率显著高于常绿树种, 而在其他径级范围内, 二者之间无显著差异, 具刺和无刺树种的死亡率在所有径级范围内均无显著差异。乔木死亡率与群落距河流距离具有显著的相关性, 距离河流越远死亡率越高; 落叶树种和无刺树种则与坡位存在显著的相关性, 坡上部的死亡率显著高于坡中部。热带季雨林内树木的死亡率与其所处的群落生境有关, 较干旱的生境是导致树木死亡率较高的重要原因。     

冬虫夏草固态培养菌丝中纤溶酶的纯化和酶学性质

【背景】血栓性疾病发病率逐年递增,发病人群呈现低龄化趋势,严重地影响着人们的身心健康。因此研发高效、安全、特异性强的溶栓药物具有重要的意义,是血栓性疾病预防与治疗研究领域的热点。【目的】对冬虫夏草菌丝固态培养过程中产生的纤溶酶进行分离纯化,并对纯化的纤溶酶进行酶学性质分析。【方法】通过硫酸铵盐析、阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶过滤色谱分离纯化虫草纤溶酶。采用Bradford法测定样品中总蛋白质浓度,纤维蛋白平板法测定纤溶酶活性,Native-PAGE检测纯度,SDS-PAGE测定相对分子量。【结果】在固态培养中冬虫夏草菌丝可以产生至少两种纤溶酶,分别命名为OSP-1和OSP-2。纯化后OSP-1比活力达到4186.25U/mg,纯化倍数为41.69倍。OSP-1由两个亚基构成,相对分子量分别为27.60k D和23.83k D,是一种丝氨蛋白酶。酶学性质分析表明,该酶最适作用温度为40°C,最适pH为4.0。Cu2+可促进OSP-1酶活,而Zn2+会抑制酶活。除了具有较高的纤溶酶活性,OSP-1还可发挥激活纤维蛋白酶原的作用。在水解纤维蛋白原的过程中,该酶可依次降解γ、Aα、Bβ链。【结论】研究发现的OSP-1具有开发成新型溶栓药物的潜力。     

污染土壤中苯并(a)芘的微生物降解途径研究进展

苯并(a)芘(BaP)是一种具有强致癌、致畸和致突变的多环芳烃(PAHs)。为了修复BaP污染的土壤,探索其降解途径是很重要的。为此,综述了国内外有关污染土壤中苯并(a)芘的微生物降解情况,对不同真菌、细菌降解苯并(a)芘的能力、代谢途径、共代谢底物以及环境影响因素进行了介绍和比较,提出了苯并(a)芘中间代谢产物的累积及其环境毒性方面的研究是修复苯并(a)芘污染土壤的重要方向。     

鄂尔多斯高原不同降雨量地区中间锦鸡儿(Caragana davazamcii Sancz)种群的ISSR遗传分析

采用简单重复间序列（ISSR）方法,对鄂尔多斯高原从东向西降雨量逐渐减少选5个地区的中间锦鸡儿种群进行分子生态学研究的结果表明,随着这一地区多年平均降雨量由东向西的逐渐减少,中间锦鸡儿种群遗传多样性有所增加,大部分变异发生在种群内（79.95％）,属异交类型,中间锦鸡儿群体间遗传距离缓慢增加,遗传一致度降低。这种随着水分递减呈现生态梯度变异的现象,说明水分变化特别是长期形成的水分条件对中间锦鸡儿的遗传多样性可能有一定的影响。