红火蚁病原真菌分离鉴定及致病性研究

红火蚁Solenopsis invicta是世界上最具破坏力和威胁性的入侵检疫害虫之一,对农林业生产安全、公共设施以及人体健康都造成了巨大影响。为筛选对红火蚁有致病性的病原真菌,本研究通过组织分离法对自然罹病的红火蚁进行致病菌分离,结合病原形态学及分子生物学的方法对病原真菌进行鉴定并采用喷雾法测定了病原真菌对红火蚁的致病力。结果表明：从罹病红火蚁上分离出3株病原真菌HHYSFJ01、HHYSFJ02和HHYSFJ05,分别为红绶曲霉Aspergillus nomius、淡紫拟青霉Purpureocillium lilacinum和球孢白僵菌Beauveria bassiana。致病性测定,这3株病原菌对红火蚁均具有较强的致病性,且3株病原菌致病性间差异显著。经1.0×10^8孢子/mL孢子悬浮液喷雾处理红火蚁10 d后,球孢白僵菌菌株HHYSFJ05的致病性最强,红火蚁工蚁的校正死亡率为84.71%,LT50为4.67 d;红绶曲霉菌株HHYSFJ01和淡紫拟青霉菌株HHYSFJ02次之,红火蚁工蚁的校正死亡率分别为78.82%和73.29%,LT50分别为4.99 d和5.20 d。     

鲤微卫星引物对麦穗鱼的适用性初步研究

麦穗鱼（Pseudorasbora　parva　Temminck　et　Schlegel）是淡水中广泛分布的小型鱼类,属鲤科（Cyprinidae）、鲍亚科（Gobioninae）、麦穗鱼属（Pseudorasbora　Bleeker）。常见于中国东部地区各大水系,朝鲜、日本也有分布。开展小型鱼类种群遗传多样性研究,能为合理开发利用小型鱼类资源,发展鱼食性鱼类增养殖,优化湖泊渔业结构提供重要的基础资料。     

MALDI-TOF质谱技术对克罗诺杆菌的鉴定与分型

以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术用于克罗诺杆菌的鉴定与分型。通过对获得的克罗诺杆菌属典型菌株、阴沟肠杆菌和产气肠杆菌近似菌株以及克罗诺杆菌分离株的蛋白质质量图谱进行对比分析,找出克罗诺杆菌特征性离子峰,将其作为鉴定克罗诺杆菌的生物标识物;对全细菌蛋白质质量图谱进行聚类分析,将克罗诺杆菌属进一步划分为不同类型,结果显示,4株克罗诺杆菌参考菌株质量图谱约在5740(m/z)离子质荷比处出现1个相近离子峰,28株克罗诺杆菌分离株中27株(占96.4%)表现出相同结果;32株克罗诺杆菌被分为6种类型(以50%距离水平为分类界限)。MALDI-TOFMS作为一种新的技术,不仅能够用于克罗诺杆菌的鉴定,而且根据获得的细菌蛋白质质量图谱可将克罗诺杆菌划分为不同类型。     

Alteration of Whole Leaf Protein of a Temperature sensitive Chlorophyll Deficient Rice Mutant During the Bleaching Process

l103s was a rice ( Oryza sativa L. ) mutant whose leaves would mm into chimerical chlorophylldeficient when treated with varied temperature (high - low - high). The alteration of whole leaf protein was studied with two-dimensional electrophoresis during the bleaching process. No changes of large subunit and small subunit of Rubisco had been detected in the bleached tissues of 1103s, but a 51 kD (PI =-4.5) special polypeptide-P1 disappeared in the white area during the bleaching process. P1 polypeptide was also detected in those tissues which remained green on the chlorophyll deficient leaves, although its amount apparenfiy decreased. In the tissue of low-temperature treated 1103s and l103s × 8902s, the normal expression of P1 polypeptide had been detected. The data suggest that P1 is an important chlorophyll-synthesis related down stream functional protein. In 1103s, it is regulated by some yet-tmknown temperature-sensitive mechanisms.     

Ultrastructural Observation on Chloroplast of the Thermo sensitive Green yellow Banded Leaf Mutant in Rice (Oryza sativa ssp.indica)

The green-yellow bands interrupted discolorated transverse bands on the leaves of the thermo-sensitive rice line l103s (Oryza sativa ssp. indica ) was induced by cold shock and the change of leaf color coincided with the change of chlorophyll contents. Uhrastmctural observation revealed that the chloroplast slructure in the yellow part degenerated, i.e., the number of stocks in granum abnormally decreased, thylakoid system was disintegrated and replaced by few single thylakoid, and then the whole structure of some chloroplast became vesicle-hke structure with high electronic density. Nonetheless, in the green zone of the green-yellow banded leaf, there were slight decrease in the number granum thylakoids, disordered grana arrangement in the chloroplast, and aggregation of osmiophile globule. However, it was found that these structural alternations were reversable in the process of recovery of the yellow part of the leaves into green, and the chloroplast structure renewed normally. It might be concluded that the character of green-yellow bands induced by cold shock was consequent upon a reverse process of degeneration and regeneration.     

IGFBP-3基因多态性及其与中国美利奴羊部分羊毛性状的关联性分析

采用PCR-SSCP方法对中国美利奴羊和哈萨克羊中IGFBP-3基因的多态性进行了检测, 并对不同基因型与中国美利奴羊部分羊毛性状间的关联性进行了分析。结果在位于内含子1区的一段178 bp的扩增产物经SSCP分析后出现了3种基因型, 基因型AA、AB和BB及等位基因A、B在中国美利奴羊中的频率分别为0.70、0.24、0.06和0.82、0.18; 在哈萨克羊中的频率分别为0.87、0.13、0.00和0.93、0.07。序列分析发现: 在该序列的122位碱基表现多态性 (g.122 G>T)。所研究的两个群体在该位点上均处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.01)。不同基因型对部分羊毛性状有一定的影响: 不同基因型个体在剪毛后体重和净毛率上没有明显差异。AA、AB及BB基因型个体的羊毛伸直长度逐渐变短, 其中AA与AB基因型之间差异极显著(P<0.01)。AA型个体的剪毛量和羊毛密度要明显低于AB型(P<0.01)和BB型个体(P<0.05); 羊毛纤维直径则明显高于AB型(P<0.01)和BB型(P<0.05)个体。     

神经胶质瘤U251细胞氧化损伤中自噬和凋亡过程的时间顺序

目的：探讨过氧化氢（H2O2）诱导神经胶质瘤U251细胞损伤中自噬和凋亡发生的时间顺序。方法：实验分为4组：正常对照组、1mmol／L H2O2作用（6h、12h、24h）组。应用MTF法检测H202对神经胶质瘤U251细胞生存率的影响;MDC染色检测自噬空泡的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率变化。Western blot检测Beclin1和胞浆cyt c蛋白的表达。结果：与对照组相比,1mmol／L H2O2作用下,U251细胞存活率明显降低,并呈时间依赖性。与对照组相比,1mmol／L H2O2作用后,6h时U251细胞自噬空泡明显增加,自噬相关蛋白Beclin1表达明显增加,12h、24h细胞自噬水平逐渐增强;而6h时未见细胞凋亡率明显变化及cyt c由线粒体向胞浆的释放,12h、24h时细胞凋亡率明显增加,胞浆中cyt c蛋白表达明显增强（P〈0．05）。结论：氧化损伤能够诱导神经胶质瘤U251细胞发生自噬和凋亡,并且自噬发生于凋亡之前。     

植物精油对大菱鲆弧菌的体外和体内抗菌活性

【目的】研究天然植物精油对大菱鲆弧菌的体外和体内抗菌活性。【方法】采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法对14种植物精油或其组分的体外抑菌活性进行检测;通过细菌形态透射电镜观察、胞内乳酸脱氢酶及核酸释放研究山苍子精油对大菱鲆弧菌的膜损伤作用;采用大菱鲆人工攻毒感染实验研究山苍子精油的体内抗菌作用。【结果】14种植物精油或其组分对大菱鲆弧菌具有不同程度的抑制效果,其中肉桂醛的抗菌活性最强,最低抑菌浓度为0.25μL/m L;百里香酚、丁香酚、柠檬醛和山苍子的抗菌活性次之,最低抑菌浓度为0.5μL/m L;山苍子精油可破坏大菱鲆弧菌的细胞膜,并导致胞内蛋白酶和核酸外泄;经200μL/L山苍子精油浸浴后,大菱鲆攻毒后死亡率由对照组50%降至0。【结论】富含芳香醛、芳香酚和柠檬醛的植物精油对大菱鲆弧菌具有良好抗菌活性,有望替代抗生素用于大菱鲆弧菌病的防治。     

一枝黄花属植物的花及花粉形态

利用体视解剖镜和扫描电子显微镜,对一枝黄花属植物一枝黄花、加拿大一枝黄花和黄莺的花及花粉形态进行观察,比较其差异性。结果表明,一枝黄花同其他两种植物花的形态结构差异明显,而黄莺和加拿大一枝黄花均为头状花序只有数量和大小上的差别;在花粉形态结构观察中,三者萌发孔的形状类型有差别,一枝黄花和加拿大一枝黄花均为下凹沟底,呈宽而浅的木楔形,而黄莺为下凹沟底深切的裂缝沟。3种一枝黄花属植物花及花粉形态存在显著的解剖学种间差异性,可通过花的解剖结构的观察和比较对3种一枝黄花属植物进行区分。