中国野生笃斯越橘花青素的初步分离和分析

采用反相高效液相色谱法和电喷雾质谱法对我国野生笃斯越橘中花青素组分进行了分离和分析．制备野生越橘花青素的粗提物,经大孔树脂柱层析得到花青素样品,其得率为0.72%．用香草醛法测得其总黄烷醇含量为95%．采用Alltima C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以2 %甲酸水溶液(A)和2 %甲酸/甲醇溶液(B)作为流动相,分2个梯度对花青素组分进行洗脱,将其主要洗脱峰在电喷雾正离子模式下进行分析,根据质谱的准分子离子［M+H］(m/z)检测其聚合度．结果表明,我国野生越橘花青素的提取物被展开成8个主要的洗脱峰,以峰面积计算,主要洗脱峰总含量达85%．经质谱分析,判断为2个单体,3个二聚体,1个三聚体,2个四聚体．结果表明,我国野生笃斯越橘中含有较丰富的花青素,低聚体是其中的主要成分．本文首次报道了我国大兴安岭野生笃斯越橘花青素的组成情况,对于开展其后续的结构、功能、质量检测以及生产开发研究都具有一定的参考价值．     

Inhibition of Hepatitis B Virus cccDNA by siRNA in Transgenic Mice

The elimination of viral covalently closed circular DNA (cccDNA) from the nucleus of infected hepatocytes is an obstacle to achieving sustained viral clearance during antiviral therapy of chronic hepatitis B virus (HBV) infection. The aim of our study was to determine whether treatment with siRNA is able to suppress viral cccDNA amplification using a HBV-transgenic mice model. The experimental results revealed that siRNAs can serve as efficient alternative anti-HBV agents, because they showed better inhibitory effect on viral replication and antigen expression in transgenic mice. More importantly, the siRNA markedly inhibited HBV cccDNA amplification.     

高效抗氧化大型真菌的筛选

为获得高效抗氧化菌株,采用直接提取方式从20个大型真菌菌株菌丝体培养液中提取抗氧化活性物质,采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法、DPPH法测定各菌株菌丝体培养粗提液对超氧阴离子自由基(O2)、羟基自由基.(OH)及1,1-二苯代苦味酰基自由基(DPPH-)的清除作用。结果表明:各菌株菌丝体培养粗提液对(O2)、.OH及DPPH-均有一定的清除作用,其中菌株NG菌丝体培养粗提液对OH-的清除效果最好,清除率为75.56%;菌株02菌丝体培养粗提液对(O2-)的清除效果最好,清除率为37.51%;菌株EG菌丝体培养粗提液对DPPH-清除效果最好,清除率为66.91%。     

β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达

目的:实现β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达。方法:克隆猪肠道野生酵母菌JSY4的25S rDNA片段;并与YIP5经EcoRⅠ与BamHⅠ双酶切连接,构建载体YIP5-rDNA。BamHⅠ与SalⅠ双酶切YIP5-rDNA,EcoRⅠ与SalⅠ双酶切pGEM-ManⅠ得到ManⅠ基因,BglⅡ与EcoRⅠ双酶切pPIC9K得到AOX1启动子,将三个片段连接,构建高拷贝整合诱导型表达载体YIP5-rDNA-AOX1-ManⅠ。提取DNA用SalⅠ单酶切线性化与pAX15按3∶1的比例共转化JSY4,在含300μg/mlG418的YEPD平板上筛选工程菌转化子,PCR方法鉴定。用2%甲醇诱导共转化工程菌以实现表达。结果:成功表达出β-甘露聚糖酶,其比活力为0.90IU/ml。而且传代10次后仍能检测到ManⅠ基因的表达产物β-甘露聚糖酶。结论:实现了β-甘露聚糖酶基因随共转化工程菌染色体稳定遗传及表达的目的。     

多分DNA病毒分子生物学研究进展

本文从基因组特点、生理功能、起源进化及应用前景等方面综述了近年来有关多分DNA病毒分子生物学的研究进展。     

我国1999—2003年间ALV—J野毒株gp85基因变异趋势

通过接种鸡胚成纤维细胞（CEF）、间接免疫荧光试验（IFA）和聚合酶链式反应（PCR）,连续五年从全国各地的送检病料中分离到14株J亚群白血病病毒（ALV-J）。为了动态观察ALV-J囊膜表面结构蛋白（GP85）的变异情况,对这14株野毒株的囊膜糖蛋白基因（env）进行了克隆和测序,将它们与HPRS-103株的GP85的氨基酸序列进行了比较,结果表明：ALV-J的囊膜表面结构蛋白发生了很大的变异,而且这些变异主要集中在高变区hr1、hr2和vr3;这些野毒株GP85的氨基酸序列的同源性在86．6％～100％之间（从同一鸡场中分离到的两株ALV-J即BJ00302与BJ0303的同源性为100％,其它毒株之间的同源性均小于100％）;有义突变与沉默突变的比例显示这3个高变区极有可能是免疫选择压作用的位点。     

辽西半干旱地区深松中耕对作物产量的影响及其作用机理研究

对辽宁西部半干旱地区深松中耕对作物产量影响及作用机理的研究表明,深松打破了犁底层,减小了土壤容重及穿透阻力,增加了表层及亚表层土壤的孔隙度．深松土壤水分人渗可达８０ｃｍ,大豆根系深度增加３．６～４．０ｃｍ,大豆产量和水分利用效率分别增加２７．７～３４．５％和１６．１％,在干旱年份玉米增产７．９％．     

不同科属来源的六株Frankia代表菌株碳源利用谱的研究

对来自赤杨属、木麻黄属、异木麻黄属、沙棘属和杨梅属的六株Frankia代表菌株进行了二十四种碳源利用谱的比较研究(包括简单有机酸、单糖、双糖、三糖和糖醇在内)。结果表明,各菌株在碳源利用种类和程度上有明显差异;简单有机酸盐特别是丙酸钠是所有菌株的良好碳源;菌株Cc01、A11I1和Hr16还能很好地利用丙酮酸钠;除了菌株Hr16能很好地利用纤维二糖,菌株A11I1利用葡萄糖外;糖醇类很少被利用。如果以丙酮酸钠、丙酸钠和乙酸为“诊断性”碳源,则可以将供试菌株分为三个类群,即赤杨——杨梅类群、沙棘类群和木麻黄类群;这与交叉接种和血清学方法得出的结论相吻合。