NPR1多肽抗体的制备和应用

根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。     

Mechanism of folate deficiency-induced apoptosis in mouse embryonic stem cells: Cell cycle arrest/apoptosis in G1/G0 mediated by microRNA-302a and tumor suppressor gene Lats2

Deficiencies in maternal diet, such as inadequate intake of folate, can inhibit normal development and lead to developmental defects. MicroRNAs (miRNAs) may play a role in mediating the effects of folate deficiency in the growing mammalian embryo, although conclusive evidences to support that possibility are not yet available. The goal of the present study was to investigate whether and how folate deprivation alters the properties of mouse embryonic stem cells (mESCs) in culture. For this purpose, mESCs were cultured in folate-deficient or complete culture medium. The results show that folate-deficient mESCs have a significantly higher rate of apoptosis, accumulate in G0/G1 and fail to proliferate. Expression profiling revealed several miRs and many mRNAs are differently expressed in folate-deficient cells. RT-PCR data confirmed differential expressions of 12 miRNAs in folate-deficient cells. Furthermore, bioinformatics analyses and in vitro studies suggested that miR-302a plays a critical role in mediating the effects of folate on cell proliferation and cell cycle-specific apoptosis by targeting Lats2 gene. Together, these results suggest that the effects of folate deficiency on mammalian development may be mediated by miRNAs that regulate proliferation and/or cell cycle progression in ESCs.     

香蕉MaASR1基因的抗干旱作用

ASR(ABA, stress, ripening induced protein)是一类响应植物干旱胁迫的关键转录因子, 在许多植物中已有报道, 然而尚未见香蕉(Musa acuminata)中ASR与抗旱作用的相关研究。该实验从香蕉果实cDNA文库中筛选出1个ASR基因, 即MaASR1(登录号为AY628102)。干旱胁迫下, 该基因在叶片中的表达量高于根部。将MaASR1转入拟南芥(Arabidopsis thaliana), Southern检测确定了两株独立表达的转基因株系(命名为L14和L38)。表型观察发现, 此两转基因株系的叶片变小且变厚; Northern和Western检测结果表明, MaASR1在L14和L38中表达。控水处理后, L14和L38的存活率及脯氨酸含量均高于野生型。经干旱胁迫和外源ABA处理后, 对MaASR1转基因株系中ABA/胁迫响应基因的表达分析, 发现MaASR1可增强转基因株系对ABA信号的敏感度, 但不能增强植株依赖于ABA途径的抗旱性。     

A (13)C NMR study on the interactions of calcium chloride/potassium chloride with pyranosides in D(2)O

The (13)C NMR spectra of methyl beta-d-glucopyranoside, methyl beta-d-galactopyranoside, methyl beta-d-xylopyranoside, and methyl beta-l-arabinopyranoside were recorded in CaCl(2)/KCl+D(2)O mixtures and in D(2)O. The chemical shifts of C-1, C-3, and C-5 in the methyl beta-d-glucopyranoside and methyl beta-d-galactopyranoside decrease rapidly as molalities of CaCl(2)/KCl increase, while those of C-1, C-2, and C-3 in the methyl beta-d-xylopyranoside and methyl beta-l-arabinopyranoside decrease rapidly as molalities of CaCl(2)/KCl increase. Cations (Ca(2+)/K(+)) can weakly complex with O in OMe of the pyranosides studied. Results are discussed in terms of the stereochemistry of the pyranoside molecules and the structural properties of the ions.     

香蕉类甜蛋白基因MaTLP1的克隆与表达分析

在香蕉EST文库中,通过RACE技术克隆到1个香蕉类甜蛋白基因的全长序列。该序列最大开放阅读框942 bp,编码313个氨基酸。Blast分析发现,它与其他类甜蛋白相似度为56.10%,含有类甜蛋白（TLPs）特有的保守结构域,命名为MaTLP1。系统进化树表明,MaTLP1基因编码蛋白与海枣的亲缘关系较近,与香蕉的进化模式相似。组织特异性分析表明,MaTLP1在根、球茎、假茎中的表达量高,叶中较弱,花和果实中微量表达。实时荧光定量PCR分析显示,在抗病香蕉品种中,接种尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)枯萎病菌后MaTLP1基因上调表达,在感病香蕉品种接菌2 d后MaTLP1基因受到抑制,虽然在接菌4 d 后上调表达,但是相对于抗病品种上调较小。研究表明,MaTLP1基因可能在香蕉抗枯萎病的过程中起作用。     

中朝边境地区林区鼠类几种重要蜱媒病原体感染的血清学调查

为了解东北林区啮齿动物蜱媒传染病感染状况,采用间接免疫荧光法对吉林省集安、辽宁省宽甸林区捕获的野鼠进行7种蜱媒病原体Ig G抗体检测,检测鼠血清75份,斑点热立克次体、粒细胞无形体、查菲埃立克体、伯氏疏螺旋体、蜱媒脑炎病毒、新布尼亚病毒、土拉弗菌抗体阳性率分别为13.33%、8.00%、14.67%、4.00%、1.33%、6.67%、1.33%,统计学处理差异非常显著(χ2=19.83,P=0.003)。不同鼠种对7种蜱媒病原体抗体检出阳性率各不相同,但差异无统计学意义。75份野鼠标本中,复合感染率为8%。调查地区野鼠中7种蜱媒病原体感染比较普遍,以斑点热立克次体和查菲埃立克体阳性率为高。     

乳杆菌在模拟肉制品条件下结合苯并芘的效果

【背景】乳杆菌对众多致癌物具有吸附作用,但关于乳杆菌结合吸附苯并芘特性的研究并不多。【目的】探讨戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus) ML32和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)121对加工肉制品中苯并芘的吸附能力与吸附机制。【方法】基于HPLC检测菌体对不同模拟加工处理方式肉品中的苯并芘的吸附率。【结果】植物乳杆菌121和戊糖乳杆菌ML32对模拟油炸、烟熏或烧烤方式处理肉中苯并芘的吸附率均在30%以上。菌株121对直接烟熏肉中的苯并芘吸附率为41.21%,直接油炸肉中吸附率为38.71%,直接烧烤肉中吸附率为37.51%;菌株ML32对间接烟熏肉中的苯并芘吸附率为40.02%,间接烧烤肉中吸附率为38.01%。植物乳杆菌121适合于去除高温长时间加工肉中的苯并芘,戊糖乳杆菌ML32则相反。另外,乳杆菌细胞壁中的肽聚糖或许在吸附过程中发挥了主要作用。【结论】两株乳杆菌121和ML32具有吸附某些加工肉制品中苯并芘的效果,或许可以作为一种方法用于消除某些肉制品中因苯并芘过量带来的风险。     

过氧亚硝酸阴离子通过鸟苷酸环化酶途径抑制钠电流影响海马神经元兴奋性

过氧亚硝酸阴离子（ONOO-）是一种性质活泼的自由基,可引起强的氧化性损伤,介导了一氧化氮（NO）的大部分毒性作用．应用全细胞膜片钳技术,探讨ONOO-对脑片海马神经元电压门控钠通道电流（INa）和神经元兴奋性的影响．结果表明,ONOO-供体SIN-1（10,500,2000μmol／L）可浓度依赖性抑制INa电流峰值．SIN-1与ONOO-清除剂尿酸共处理,并不影响INa．500μmol／L的SIN-1可使INa的I-V曲线上移,并可抑制其失活后恢复过程,但对INa的激活和失活过程无影响．SIN-1还可抑制动作电位发放频率和幅值．脑片预处理腺苷酸环化酶（adenylate cyclase,AC）抑制剂MDL-12,330A（25μmol／L）和NEM（50μmol／L）对SIN-1的作用无影响．然而,预处理鸟苷酸环化酶（CG）抑制剂ODQ可抑制SIN-1对INa的作用．以上结果提示,ONOO-通过cGMP-INa-AP信号级联系统作用于海马神经元,与PKA和蛋白巯基亚硝化途径无关,这可能是ONOO-神经毒性的机制之一．     

环境条件对双叉犀金龟成虫存活及繁殖的影响

双叉犀金龟Allomyrina dichotoma是一种重要的森林资源昆虫,本文研究了环境温度（20℃、23℃、26℃、29℃、32℃）及菌糠含水量（35%、45%、55%、65%）对双叉犀金龟成虫寿命及子代数量的影响。结果表明,双叉犀金龟雌雄虫寿命均随温度的升高呈显著缩短,20℃~26℃下雌虫寿命在55~62 d之间,显著长于29℃~32℃处理;20℃~23℃下的雄虫寿命在33~48 d之间,显著长于26℃~32℃处理;环境温度及菌糠含水量均对双叉犀金龟成虫子代数量有显著影响,26℃时,4个菌糠含水量处理的平均子代数量为31.42 头/雌,显著高于其它温度处理,菌糠含水量55%~65%时,5个温度处理的平均子代数量为18.83~19.12 头/雌,显著高于其它菌糠含水量处理,其中以温度26℃、菌糠含水量55%处理的双叉犀金龟子代数量最高,达45.42 头/雌。各温度下双叉犀金龟繁殖子代数量均随时间的延长呈先上升后下降的趋势,各温度下产卵繁殖的高峰时间存在明显差异。在26℃时,双叉犀金龟各时间段子代数量均高于其它温度,在35~45 d时,达到产卵高峰期（12.33 头/雌）,综合各指标,建议利用菌糠饲养双叉犀金龟时,其成虫最佳环境条件为26℃,菌糠含水量55%。