脂肪细胞因子 CTRP4转基因鼠的构建与鉴定

目的：建立人CTRP4基因的转基因小鼠,为脂肪细胞因子CTRP4的体内功能研究奠定基础。方法首先构建人CTRP4的转基因小鼠线性化表达载体,再利用显微注射的方法将载体注射入小鼠受精卵,从而构建人CTRP4的首建鼠（ Founder ）并与野生型小鼠交配繁殖得到F1代阳性小鼠,再通过近亲繁殖与测交的方法,得到CTRP4转基因纯合子小鼠,并通过PCR和western blot 的方法对纯合子小鼠进行鉴定。结果得到人CTRP4转基因小鼠纯合子小鼠两个品系,western blot鉴定该转基因小鼠心脏,肝脏,脑,肾脏等多种组织中均呈现CTRP4高表达。结论成功构建了人CTRP4转基因小鼠纯合子小鼠。     

康氏木霉纤维素酶系中C_x酶多分子型的分离纯化及某些性质

从康氐木霉(Trichoderma k(?)ningii)白色变异株As 3.4001的粗酶制剂中,获得了纤维素酶系中的一组C_x酶(C_(x1) C_(x2) C_(x3) C_(x4))。分离步骤包括Sephadex G-75凝胶过滤,DEAESephadex A-50离子交换层析,ConA-Sepharose亲合层析,SE-Sephadex C-50离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳。C_(x1)与C_(x2)的分子量不同而所带电荷相同,它们的分子量各自为44,500和34,000。C_(x2)—C_(x4)的分子量相同而所带电荷不同。纯化的C_(x1)—C_(x4)经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单带。比较它们对羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的糖化力及液化力表明在作用方式的随机性上C_(x2)>C_(x3)>C_(x1)>C_(x4)。     

Increment of hFIX expression with endogenous intron 1 in Vitro

This paper probes into the feasibility of increasing expression level of hFIX gene with endogenous intron 1 sequence.hFIX minigene was obtained with middle sequence truncated intron 1 inserted into the relative site of hFIX cDNA,and plasmid vector pKG5i‘IX,retroviral vector G1NaCi‘IX were constructed.These vectors were transduced into target cells of PA317,C2C12,primary rabbit skin fibroblasts (RSF) and primary human skin fibroblasts (HSF).The expression level of mixed colonies are PA317/pKG5i‘IX,151 ng/10^6 cells/24h;PA317/G1NaCi‘IX,308 ng/10^6 cells/24 h;C2C12/G1NaCi‘IX,186 ng/10^6 cells/24 h;RSF/G1NaCi‘IX,1929 ng/10^6 cells/24 h;HSF/G1NaCi‘IX,1646 ng/10^6 cells/24 h.These results indicated that hFIX minigene with intron l is able to increase the expression level to about 3 times of that of hFIX cDNA.Meanwhile,in order to study the application of hFIX minigene in the retroviral-mediated gene transfer system and refrain from intron splicing during viral production,a retroviral vector G1NaCi‘IXR with reversely inserted hFIX minigene expression cassette was constructed.The expression level of reverse constructor in PA317 cells was 390 ng/10^6 cells/24 h with 79% of bioactivity.PCR detection of HT/G1NaCi‘IXR cells infected with PA317/G1NaCi‘IXR supernatant confirmed the existence of intron 1 sequence.These results suggested that expression vector with forward-inserted intronl-carrying hFIX expression cassette can be used in directed gene transfer,but when using the retroviral-mediated gene transfer system,reversely-inserted intronl-carrying hFIX expression cassette should be considered.     

垂体瘤转化基因1(PTTG1)的表达变化对人前列腺癌细胞LNCaP生长增殖的影响

垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)具有促进肿瘤生长和转移的作用.通过上调或下调基因表达的策略,观察PTTG1基因对人前列腺癌细胞株LNCaP细胞生长增殖的影响.利用PCR技术分离出PTTG1全长cDNA,分别正向和反向插入真核表达载体pIRES2-EGFP,重组载体分别命名为正义PTTG1-S/pIRES2-EGFP(即pI-P-S)和反义PTTG1-AS/pIRES2-EGFP(即pI-P-AS),将这两种重组载体稳定转染LNCaP细胞,通过流式细胞仪和MTT法分别检测了细胞周期和细胞增殖的情况.转染正义PTTG1后处于S期和G2期的细胞明显增加,细胞生长增殖能力增强;相反,转染反义PTTG1后处于S期和G2期细胞明显减少,细胞生长增殖能力减弱(P<0.05).结果表明,PTTG1能明显改变人前列腺癌细胞株LNCaP的细胞周期和细胞生长增殖能力,它的异常表达可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程.     

西双版纳苦丁茶挥发油的化学成分

苦丁茶为中国南部及西南部的民间传统药用植物,经两千多年的应用和医学临床试验证明,苦丁茶具有清热解毒、抑菌消炎、抗衰老、降血脂、改善血液粘稠度和微循环、清除人体自由基及增强人体免疫能力等功效,被誉为保健茶、美容茶、降压茶和益寿茶[1,2]。苦丁茶来源较复杂,共有5科1     

高血压患者用药的依从性

高血压是人类健康面临的一个重要挑战,对患者及其家庭和社会造成了巨大的疾病负担。药物治疗是控制高血压的重要手段,合理应用抗高血压药能使90%的患者血压处于正常范围,但实际高血压的控制率仍很低,且发病率逐年上升,究其根本原因,是由于患者用药依从性不良。本文综述了高血压患者用药依从性的概念、现状及评估方法,并对其影响因素进行了详细的阐述,指出应积极干预及加强健康教育,以最大限度提高患者的用药依从性,降低高血压带来的靶器官损害,并进一步对寻求更准确、客观的用药依从性评估方法做出展望。     

黄土高原不同植被覆盖对流域水文的影响

以山西省吉县蔡家川流域为对象,研究了植被覆盖类型对流域水文的影响.结果表明:不同植被覆盖的流域年径流系数分别为:林地流域1.6%～2.3%,以农、牧为主的流域3.1%～3.9%;各流域基流系数差异显著,人工林流域为零,次生林为主的流域1.0%～1.5%,以农、牧为主的流域2.5%～2.8%;在雨季人工林流域的径流总量是次生林流域的3.37倍、农地流域的1.9倍,而农地流域的基流量是次生林流域的2.2倍;短历时高强度降雨条件下,人工林流域、次生林流域地表径流量分别是农地流域的10.8倍和2.2倍;在历时较长的暴雨条件下,人工林流域单位面积上的洪峰流量是农地流域的3.4倍,次生林流域的6.9倍;在长历时、大雨量条件下,农地流域的径流量是次生林流域的1.8倍.水平梯田的水源涵养功能与次生林植被相当,次生林植被的水源涵养功能远好于人工植被,在水资源短缺的黄土高原应提倡植被的自然恢复.     

锦鸡儿植物对盐碱地土壤理化性质和细菌群落的影响

锦鸡儿属的多种植物在干旱/半干旱区域水土保持等方面具有显著的作用效果,该研究以柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿为材料,选择宁夏银北西大滩核心试验站的盐渍化荒地为研究对象,分析了3种锦鸡儿建植1年对盐碱地土壤理化性质及土壤细菌群落的影响,以了解该类植物在盐碱地改良中的作用及生态效应。结果显示:(1)种植锦鸡儿1年能够显著降低盐碱地土壤全盐含量和pH,提高土壤全氮和全磷含量。(2)种植锦鸡儿不影响其非根际土壤细菌群落的α多样性,但小叶锦鸡儿非根际土壤细菌群落的香浓指数最低。(3)不同种锦鸡儿对盐碱地细菌群落结构的影响有所不同,小叶锦鸡儿根际/非根际细菌群落的结构分别与对照土壤以及柠条、中间锦鸡儿根际土壤存在明显差异;在属水平,包括假黄色单胞菌属、新鞘氨醇菌属及根瘤菌属在内的12个优势细菌属的相对丰度在小叶锦鸡儿非根际土壤中显著增加。(4)db-RDA分析表明,盐碱地土壤全盐、全氮及全磷含量分别解释了锦鸡儿非根际细菌群落结构变异信息的23.5%、25.4%和22.2%,3种因子累计共解释48.5%的细菌群落变异(P0.05),但这些因子对锦鸡儿根际细菌群落的变化无显著影响。研究表明,短期种植锦鸡儿属植物对盐碱地土壤理化性质具有一定改良效果,且不影响非根际土壤细菌群落的α多样性,但不同种锦鸡儿对土壤细菌群落结构的影响存在差异。     

白音华矿区土壤重金属含量的空间异质性

为探讨开矿对白音华矿区土壤重金属空间分布的影响,本研究以内蒙古西乌珠穆沁旗白音华煤矿区周边土壤为对象,分析了距离矿区8 km内的重金属Cu、Cr、Pb和Mn含量的空间异质性.结果表明:土壤重金属Cu、Cr、Pb和Mn的平均含量分别为12.7、32.6、29.9和201.3 mg ? kg-1,其变异系数分别为26.8％...