用小鼠血液淋巴细胞构建核移植重构胚的研究

本实验用小鼠血液淋巴细胞为核供体进行了核移植研究。用淋巴细胞分离液(比重1.088)分离出小鼠血液中的淋巴细胞,直接用作核移植供体细胞,采用胞质内注射法成功构建的重构胚经常规培养2h后,SrCl_2激活处理6h,然后添加mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞饲养层共培养。把发育至早期囊胚阶段的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,添加ES细胞培养液继续培养。对孵化出的内细胞团进行消化,然后接种培养。结果显示,小鼠血液淋巴细胞可以支持体细胞核移植重构胚的发育,核移植重构胚2-细胞率41.03%(128/312),桑葚胚和囊胚发育率分别为9.29%(29/312),1.92%(6/312)。重构囊胚在小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上分离出2个内细胞团,分离率为0.64%(2/312)。实验证实利用小鼠血液淋巴细胞进行体细胞核移植是可行的,可用于深入研究。     

锈菌夏孢子DNA的微量快速提取方法

采用4种方法对毛白杨锈病单个夏孢子堆DNA提取和ITS—PCR扩增表明,钢珠法、玻片法均是锈菌基因组DNA微量快速提取的合适方法,以钢珠法最优,整个过程仅需30min,并且可以获得与CTAB法、氯化苄法相同的PCR扩增结果。钢珠法是在提取液中加入2-3颗钢珠,靠钢珠在涡旋中的相互碰撞将夏孢子破壁,以同时加入NaOH(终浓度3．3％)和Chelex-100(终浓度1．6％)效果最好,ITS-PCR扩增能稳定得到700bp片段。玻片法也能得到相同的结果。分析比较了4种方法的优缺点。     

Spike timing-dependent LTP/LTD mediates visual experience-dependent plasticity in a developing retinotectal system

Sensory experience plays an instructive role in the development of the nervous system. Here we showed that visual experience can induce persistent modification of developing retinotectal circuits via spike timing-dependent plasticity (STDP). Pairing light stimuli with spiking of the tectal cell induced persistent enhancement or reduction of light-evoked responses, with a dependence on the relative timing between light stimulus and postsynaptic spiking similar to that for STDP. Using precisely timed sequential three-bar stimulation to mimic a moving bar, we showed that spike timing-dependent LTP/LTD can account for the asymmetric modification of the tectal cell receptive field induced by moving bar. Furthermore, selective inhibition of signaling mediated by brain-derived neurotrophic factor and nitric oxide, which are respectively required for light-induced LTP and LTD, interfered with moving bar-induced temporally specific changes in the tectal cell responses. Together, these findings suggest that STDP can mediate sensory experience-dependent circuit refinement in the developing nervous system.     

臭氧水浸种对黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响

臭氧水处理10、30和50 min后的黄瓜种子,种子萌发及幼苗生长均受到促进,种子的发芽率和活力指数、萌发种子的过氧化氢酶(CAT)和淀粉酶的活性以及呼吸速率、幼苗的壮苗指数和根系活力均有提高;处理70和90min的黄瓜种子萌发和生长则受到抑制,种子电解质外渗,过氧化氢酶和淀粉酶活性下降.     

菠菜叶片中硝态氮还原与叶柄中硝态氮累积的关系

测定了不同生长期在不同施氮水平下3个菠菜品种各器官的硝态氮含量、叶片的硝酸还原酶活性、叶片细胞硝态氮的贮存库和代谢库大小.结果表明:叶柄中硝态氮含量远高于其它器官,其含量与叶片内源/外源硝酸还原酶活性的比值呈负相关;叶片细胞中硝态氮代谢库的大小与叶柄中硝态氮含量之间没有确定的关系.     

一种早期胚胎体外培养新方法的建立

建立一种不依赖于液体石蜡的早期胚胎体外培养方法——套皿法,并比较了4种不同处理方法体外培养胚胎的效果。结果显示,采用套皿法进行胚胎培养,盖液体石蜡和不盖液体石蜡皿中的胚胎在各阶段的发育率差异不显著。与套皿法相比,用单皿微滴覆盖法(Brinster法)培养的胚胎在各阶段的发育率显著降低。不覆盖液体石蜡单皿中的胚胎则阻断于二细胞阶段。实验设计的套皿法是一种有效的早期胚胎体外培养方法,为早期胚胎体外培养提供了一种新方法。     

GENESIS诱导小麦雄性不育性与花药组织呼吸关系的初步研究

对小麦小孢子发育的各个时期,经GENESIS处理的和未处理的植株花药的总呼吸活性(Vt)、细胞色素途径呼吸活性(ρ′Vcyt)和交替途径实际呼吸活性(ρValt)进行了比较研究,结果表明,在各时期,处理植株花药的Vt呼吸均低于未处理植株,尤以单核期最为明显;在小孢子减数分裂期、四分体期和单核期,处理小麦植株花药的ρ′Vcyt均明显降低,而在小孢子减数分裂期和四分体期ρValt出现明显升高。结论认为,由呼吸过程中电子传递途径运行的改变而造成处理植株花药呼吸代谢的紊乱,可能是GENESIS诱导小麦雄性不育发生的重要原因。     

平菇种内原生质体分离与融合杂交育种技术的研究

将16个平菇资源品种的菌丝体,在25℃、pH5．8-6．0环境下,分别用1．5％溶菌酶加0．6mol／L KCl稳渗剂溶解其细胞壁2h,原生质体数得量最高。将获得的原生质体两两配对成39个组合,在30℃、pH9、0．6mol／L KCl稳渗剂、不加融合促进剂CaCl2和PEG6000的融合条件下,得到种内杂交融合子5株。其中4株融合子再生出菌丝体和子实体;同皿接种实验显示,新菌株与其双亲具明显的拮抗线。经栽培试验与生产示范,新育的“优生1号”品系表现适应性强,优质、丰产、抗杂、耐热。     

动物乳腺生物反应器研究进展

利用转基因家畜的乳腺生产人类重组蛋白,可以高效获得安全、足量的药用蛋白。本在简要介绍乳腺生物反应器的基本原理及优越性的基础上,对其目的基因、表达载体和转基因技术在国内外的研究现状加以综述,着重探讨了体细胞核移植方法生产乳腺生物反应器的优越性及面临的技术问题。     

植物源过敏蛋白

植物过敏原是最普遍的一类过敏原,也是与人类关系最密切的一类过敏原。本文简单介绍了植物中蛋白质类过敏原的种类、特性及低敏植物性食品开发等研究新进展。