Use of the <Emphasis Type="Italic">pyrG</Emphasis> gene as a food-grade selection marker in <Emphasis Type="Italic">Monascus</Emphasis>

Ma-pyrG was cloned from Monascus aurantiacus AS3.4384 using degenerate PCR with primers designed with an algorithm called CODEHOP, and its complete sequence was obtained by a PCR-based strategy for screening a Monascus fosmid library. Ma-pyrG encodes orotidine-5′-phosphate decarboxylase (OMPdecase), a 283-aminoacid protein with 81% sequence identity to that from Aspergillus flavus NRRL 3357. A pyrG mutant strain from M. aurantiacus AS3.4384, named UM28, was isolated by resistance to 5-fluoroorotic acid after UV mutagenesis. Sequence analysis of this mutated gene revealed that it contained a point mutation at nucleotide position +220. Plasmid pGFP-pyrG, bearing the green fluorescent protein gene (GFP) as a model gene and Ma-pyrG as a selection marker, were constructed. pGFP-pyrG were successfully transformed into UM28 by using the PEG method.     

电视宫腔镜配合阴道超声检查诊治80例绝经后子宫出血的效果分析

目的:评价宫腔镜配合阴道超声检查对绝经后妇女异常子宫出血的临床价值.方法:回顾性分析80例绝经后妇女异常子宫出血行宫腔镜配合阴道超声检查及相关病理检查的临床资料.结果:阴道超声检查非正常41例,阳性率为51.25%,官腔镜检查非正常58例,阳性率为72.50%,两者比较具有统计学意义(P＜0.01);病理检查非正常54例,符合率为93.10%.结论:阴道超声检查可作为异常子宫出血的常规无创普查手段,宫腔镜检查可对异常患者进一步检查,两者配合检查可提高诊断准确率.     

新疆其木干剖面中新世-上新世沉积物粘土矿物特征及其古气候指示意义

为重建新疆其木干地区中新世-上新世古气候,采用X射线衍射、扫描电子显微分析方法,对该区中新世-上新世沉积物中粘土矿物的相对含量、组合类型及显微形貌等进行了研究。结果显示:中新世早期-早中新世中期,沉积物中粘土矿物以伊利石和绿泥石为主,含少量的蒙脱石,表明以干旱气候为特征;晚中新世中期-早中新世晚期,伊利石的相对含量逐渐降低,且含有少量的蒙脱石和高岭石,指示相对温湿的气候条件;中新世晚期的粘土矿物组分与中新世早期相似,以伊利石和绿泥石为主,指示古气候以干旱为主导;晚中新世晚期至上新世伊利石相对含量降低,而蒙脱石和高岭石的相对含量升高,但由于粘土矿物中伊利石、绿泥石的含量仍然较高,指示古气候仍然以干旱为主导,但相对于中新世而言,这段时期为相对湿润期。以上结果表明,新疆其木干地区中新世-上新世古气候以干旱为主,并且气候经历了干旱-相对湿润-干旱-相对湿润的演化过程,但总体而言,本区中新世比上新世要更为干旱。     

粘类小麦细胞质雄性不育系育性基因的地区分布

以具4种细胞质、2种核类型的粘类小麦雄性不育系为测验种,对309份来自国内外不同地区普通小麦品种对应粘类小麦不育系的育性恢复和保持关系进行调查,研究粘类小麦雄性不育系育性基因的地理分布.结果表明:(1)普通小麦品种中广泛存在着粘类雄性不育系的恢复基因,所配组合中,高恢复度以上的组合占到45.24%;(2)所配组合F1小穗结实率范围在0~91.35%之间,其中0和60%~80%的分布范围较多;(3)具有恢复能力的品种在供试6个地区均有分布,但比例不同,中国南方、新疆内陆、青藏高原等春麦地区高,可育品种的分布比例均超过50%;具有育性保持作用的品种在中国黄淮海暖温带冬麦气候生态区和加拿大地区分布较多,在新疆麦区分布最少;(4)恢复度80%以上的品种在6个地区均有分布,但在各地区供试材料中的比例都不高.     

印度块菌子囊果内部解剖结构的扫描电镜观察

利用扫描电镜对成熟印度块菌子囊果的内部结构进行了观察,以系统揭示其子囊果内部组织特征,为块菌属的分类以及块菌属真菌子囊果的生理研究奠定基础。观察结果进一步证明,成熟印度块菌子囊果横切面上的白色迷宫状脉络是由不育的侧丝构成,而暗脉则是被侧丝缠绕并包裹着的可育的菌丝组织,即产孢组织,这些白色脉络和暗脉就构成了印度块菌子囊果横切面上迷宫状的纹脉;产孢组织中,可观察到正在发育的大大小小的子囊被缠绕在一起的大量产囊丝与侧丝包裹着,形成密密麻麻微小的类似蜂巢状结构;子囊孢子游离于子囊中,成熟子囊孢子表面有刺状纹饰,刺的顶端有小弯钩。单个子囊内含的子囊孢子大小与其内含的子囊孢子数目有关,子囊内所含的子囊孢子越多,子囊孢子就越小。     

灾难及突发事件住院信息管理系统的开发与实现

本文从系统设计目标、功能设计、结构设计等几个方面论述了灾难及突发事件住院信息管理系统的开发与实现。该系统由六大模块构成,实现了从预约管理、住院信息管理、床位管理、伤情评分、感染监测、查询统计到打印输出的灾害及突发时间住院伤病员信息全过程管理。应用本系统可规范灾害及突发事件医疗救援保障流程,大大提高了住院伤病员信息管理水平和工作效率。     

PIK3CA 基因突变的MassARRAY 分子量阵列分析

目的:利用MassARRAY分子量阵列分析系统检测胃癌组织PIK3CA基因突变。方法:从胃癌石蜡包埋组织中提取基因组,PCR反应扩增目的基因片段,MassARRAY分子量阵列分析系统检测PIK3CA基因突变;焦磷酸测序验证检测结果。结果:中国西部地区144例胃癌组织样本中PIK3CA_E542K(1624G>A)突变携带率为77.6%,PIK3CA_E545K(1633G>A)突变携带率为84%。MassARRAY分子量阵列分析系统检测结果与焦磷酸测序结果达到100%吻合。结论:建立了MassARRAY分子量阵列分析系统检测基因突变的方法,初步建立了中国西北地区汉族人群胃癌组织PIK3CA基因PIK3CA_E542K(1624G>A)和PIK3CA_E545K(1633G>A)位点突变频数。     

灾难及突发事件住院信息管理系统研究现状及趋势

信息工作是决策的依据和先导,如何准确、及时、高效地收集、整理、分析灾难及突发事件信息、伤病员基本信息、救治信息等,已成为医院管理信息学的研究热点问题,也是医院在灾难和突发事件大量伤员信息管理中面临的难点问题。本文就灾难及突发事件住院信息管理系统研究现状及趋势进行综述。     

Expression and characterization of the carboxyl esterase Rv3487c from Mycobacterium tuberculosis

Rv3487c (lipF), a member of the lipase family of Mycobacterium tuberculosis, is related to virulence of this pathogen. Real-time RT-PCR analysis indicated that Rv3487c was induced at low pH in M. tuberculosis cultured in vitro. The gene of Rv3487c was cloned and expressed as fusion protein in Escherichia coli. After removal of the N-terminal domain of the fusion partner by enterokinase treatment, the effect of pH, temperature, and detergents on the purified enzyme activity and stability was characterized. Rv3487c could efficiently hydrolyze short chain esters. The catalytic triad of Rv3487c consists of residues Ser90, Glu189, and His219 as demonstrated by amino acid sequence alignment, three-dimensional modeling, and site-directed mutagenesis.     

一种抗菌肽和aFGF融合蛋白的构建和表达

利用PCR技术扩增出带有凝血酶Xa因子切割位点的天蚕素蜂毒素杂合肽和aFGF的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET-3c中,构建出表达质粒pET-aF-CM,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）中,氨苄青霉素抗性筛选重组转化子。IPTG诱导4h后,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的17%。将包涵体溶解后透析复性,并利用肝素亲和层析纯化,得到电泳纯的融合蛋白。Western blot分析表明,该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。MTT法检测显示,融合蛋白具有促3T3Bal/b细胞分裂活性,其比活为1.471×106IU/mg。利用凝血酶Xa因子裂解融合蛋白,可以获得抗菌肽和含凝血酶Xa因子裂解序列的aFGF蛋白。分子筛回收含杂合抗菌肽,抑菌活性检测表明其对大肠杆菌K12D31具有明显抑菌活性。微量稀释法检测结果表明,回收的抗菌肽对大肠杆菌DH5α、大肠杆菌K12D31、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和绿脓杆菌的MIC分别达6.25μg/ml、10μg/ml、2.5μg/ml、1.25μg/ml、0.625μg/ml和5μg/ml。