组织和发育特异性基因的远距离转录调控

远距离转录调控是指增强子、沉默子和隔离子等顺式作用元件参与的组织和发育特异性基因的表达调控。其调控元件可位于距转录基因很远的DNA区域,甚至分布于邻近基因内含子中。随着人类基因组计划和各种模式生物测序工作的完成,为大规模快速查找远距离调控元件提供了新的手段。由于基因组结构的复杂性,很难建立统一的基因表达调控模型,目前认为启动子与增强子的相互作用是组织和发育特异性基因成功表达的关键。另外,远距离转录调控机制一旦破坏还将导致疾病的发生。     

Heterologous expression, purification, and properties of a potato protein inhibitor of serine proteinases

The gene PKPI-B10 [AF536175] encoding in potato (Solanum tuberosum L., cv. Istrinskii) a Kunitz-type protein inhibitor of proteinases (PKPI) has been cloned into the pET23a vector and then expressed in Escherichia coli. The recombinant protein PKPI-B10 obtained as inclusion bodies was denatured, separated from admixtures by ion-exchange fast protein liquid chromatography (FPLC) on MonoQ under denaturing conditions, and renatured. The native protein was additionally purified by ion-exchange FPLC on DEAE-Toyopearl. The PKPI-B10 protein effectively inhibits the activity of trypsin, significantly weaker suppresses the activity of chymotrypsin, and has no effect on other serine proteinases: human leukocyte elastase, subtilisin Carlsberg, and proteinase K, and also the plant cysteine proteinase papain.     

Autotoxic potential of cucurbit crops

Soil sickness is often observed in cucurbit crops such as Citrullus lanatus, Cucumis melo and Cucumis sativus, but not in cucurbit crops such as Cucurbita moschata, Lagenaria leucantha and Luffa cylindrica. Results showed that root aqueous extracts of Citrullus lanatus, Cucumis melo and Cucumis sativus were autotoxic, but those of Cucurbita moschata, Momordica charantia and Luffa cylindrica were less autotoxic to the radicle elongation of respective species. Plant growth of Citrullus lanatus, Cucumis melo and Cucumis sativus were greatly inhibited by autotoxic substances released from powered root tissue at a rate of 1 g per seedling. Root exudates of Citrullus lanatus, Cucumis melo and Cucumis sativus were autotoxic to radicle elongation and seedling growth of respective species. However, root exudates of Citrullus lanatus did not inhibit radicle elongation of Cucurbita ficifolia, which is commonly used as rootstock for the grafting of Citrullus lanatus, Cucumis melo and Cucumis sativus to decrease soil-borne diseases in commercial production. It seems possible to overcome autotoxicity in cucurbit crops by grafting on Cucurbita ficifolia. This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

胆囊收缩素和胰岛素在发育中小鼠胰腺内的表达

目的观察昆明小鼠发育过程中胰腺内胆囊收缩素免疫反应阳性（CCK—IR）细胞和胰岛素免疫反应阳性（Ins—IR）细胞的发生、分布和形态。方法用免疫组织化学和免疫荧光双标法观察小鼠胚胎11d至出生后45d胰腺内的CCK—IR细胞和Ins—IR细胞。结果小鼠胚胎第11d,早期分化的胰腺中即出现CCK—IR细胞和Ins—IR细胞。自胚胎期至生后发育成熟,小鼠胰腺中均可见到Ins—IR细胞。CCK—IR细胞的形态不规则,与Ins—IR细胞相邻分布。在胚胎期免疫反应较强,生后胰腺内依然可见到发弱荧光的CCK—IR细胞。胰岛内还可见CCK—Ins—IR细胞。CCK—IR细胞和Ins—IR细胞主要分布于胰岛内,外分泌部的腺泡和导管处也偶可见到。结论发育中小鼠胰腺内的CCK—IR细胞具有旁分泌细胞的形态特征;免疫荧光双标法可见CCK与胰岛素共存于同一细胞内的现象。     

俄罗斯大果沙棘无性繁殖技术的研究

无性繁殖技术是培育优良品系的极好手段,通过对俄罗斯大果沙棘进行多因子多水平正交试验,总结出沙棘嫩枝扦插育苗的最佳实施方案。     

水-有机溶剂介质中固定化不动杆菌细胞催化拆分(RS)-环戊烯酮乙酸酯的研究

不动杆菌CGMCC 0789的海藻酸凝胶包埋固定化细胞可高对映选择性地水解拆分环戊烯酮(简称HMPC)乙酸酯.异丙醇对固定化细胞的活力和对映选择性有显著提高.反应体系中异丙醇浓度为10%(体积分数,全文同)时,固定化细胞的活力最高,为6.22 mmol/(L·min·g)细胞干重,是未添加异丙醇的对照组的150%.此时E值为94±6,是对照组的1.7倍.以光学纯环戊烯酮乙酸酯为底物,对部分纯化的不动杆菌酯酶进行了动力学考察.通过动力学参数推算,10%异丙醇存在时,酯酶的对映选择性(E值)为36.5,是空白的2.3倍.10%异丙醇存在下,固定化细胞仍具有良好的操作稳定性.连续反应10批,固定化细胞的活力保持良好.     

磷脂酶A2亚型及其与男性生殖相关性研究

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是参与细胞代谢活动、信号转导等过程的重要酶类之一,广泛分布于哺乳动物机体内。随着对磷脂酶A2研究的深入,目前已有30余种磷脂酶A2亚型被逐一鉴定,磷脂酶A2亚型与男性生殖相关性研究也有了新的发现。该文通过对磷脂酶A2的最新亚型分类及其特征、磷脂酶A2在男性生殖系统中的分布、磷脂酶A2参与精子顶体反应及其信号转导通路以及与男性生殖相关的磷脂酶A2亚型等内容进行分析,研究磷脂酶A2在男性生殖系统中发挥的作用及其机制,为男性不育的诊断和治疗提供理论依据和思路策略。     

聚乙二醇在化疗药物成药性研究中的应用——以阿霉素为例

多数抗肿瘤药物的水溶性差、系统毒性和多药耐药性已成为其临床应用所面临的主要问题,而利用聚乙二醇材料构建前药或合适的 递药系统来克服这些问题,备受广大药学研究者的关注。以具有良好抗肿瘤活性和分子荧光特性的阿霉素为例,综述聚乙二醇在化疗药物 前药和递药系统的构建及制备等成药性研究中的应用,为高效低毒抗肿瘤药品的进一步研究与开发提供参考。     

鲫鱼血清和皮肤粘液IgM的分离纯化及部分性质的鉴定

采用盐析法结合葡聚糖凝胶柱 ,分离纯化鲫鱼血清IgM ;然后制备兔抗鲫鱼血清IgM多克隆抗体 ,将其偶联到Sepharose 4B上制成亲和柱 ,用于分离纯化皮肤粘液IgM。结果表明 :33%～ 4 5 %硫酸铵溶液沉淀处理可以去除鲫鱼血清中除IgM外的很多杂蛋白 ,再经葡聚糖凝胶柱纯化 ,IgM纯度可达 80 %以上 ,其重链和轻链的分子量分别为 79和 2 5kDa ;以兔抗鲫鱼血清IgM多克隆抗体亲和柱分离皮肤粘液IgM ,分离效果良好 ,IgM重链的分子量为 88kDa ;Westernblot显示兔抗鲫鱼血清IgM多克隆抗体识别的是血清和皮肤粘液IgM的重链部分。用ELISA测定鲫鱼血清中IgM含量在一年中的变化 ,结果表明IgM在春夏季的含量高于秋冬季     

节节麦-黑麦双二倍体种子贮藏蛋白的变异分析

利用SDS-PAGE和A-PAGE方法对获得的遗传稳定性逐年提高节节麦-黑麦双二倍体的麦谷蛋白和麦醇溶蛋白进行了分析.结果显示:在高分子量谷蛋白区域,双二倍体共检测到3条带,其中第1和第3条带与亲本节节麦的5t和10t亚基大小一致,中间的第2条带是两亲本都未出现的新麦谷蛋白条带,而黑麦的2r和6.5r亚基在双二倍体材料中未检测到;在低分子量谷蛋白区域,黑麦和节节麦分别有4条和2条带在双二倍体材料中未检测到.在醇溶蛋白的γ和β区,黑麦共有5条带在双二倍体材料中未检测到,在ω区,节节麦有1条带未检测到.研究表明,在双二倍体中两亲本控制贮藏蛋白的基因组之间发生了较大的改变,与亲本节节麦相比较,亲本黑麦控制的贮藏蛋白发生的改变更大;两亲本控制贮藏蛋白基因的遗传方式在双二倍体材料中表现为非加性效应.