First somatic mutation of E2F1 in a critical DNA binding residue discovered in well-differentiated papillary mesothelioma of the peritoneum

Background

Well differentiated papillary mesothelioma of the peritoneum (WDPMP) is a rare variant of epithelial mesothelioma of low malignancy potential, usually found in women with no history of asbestos exposure. In this study, we perform the first exome sequencing of WDPMP.

Results

WDPMP exome sequencing reveals the first somatic mutation of E2F1, R166H, to be identified in human cancer. The location is in the evolutionarily conserved DNA binding domain and computationally predicted to be mutated in the critical contact point between E2F1 and its DNA target. We show that the R166H mutation abrogates E2F1's DNA binding ability and is associated with reduced activation of E2F1 downstream target genes. Mutant E2F1 proteins are also observed in higher quantities when compared with wild-type E2F1 protein levels and the mutant protein's resistance to degradation was found to be the cause of its accumulation within mutant over-expressing cells. Cells over-expressing wild-type E2F1 show decreased proliferation compared to mutant over-expressing cells, but cell proliferation rates of mutant over-expressing cells were comparable to cells over-expressing the empty vector.

Conclusions

The R166H mutation in E2F1 is shown to have a deleterious effect on its DNA binding ability as well as increasing its stability and subsequent accumulation in R166H mutant cells. Based on the results, two compatible theories can be formed: R166H mutation appears to allow for protein over-expression while minimizing the apoptotic consequence and the R166H mutation may behave similarly to SV40 large T antigen, inhibiting tumor suppressive functions of retinoblastoma protein 1.     

蛇床子素对L-和N-型钙通道的影响

目的：比较蛇床子素对不同钙通道亚型的作用差异。方法：首先在tsA201细胞上瞬时转染Cavl．2,Cav1.3,Cav2．2e[37a],和Cav2．2e[37b]通道,然后采用全细胞膜片钳技术,记录tsA201细胞上的钙电流,并观察蛇床子素对各种钙通道亚型的影响。结果：蛇床子素可以浓度依赖性抑制Cav1．2和Cav1.3电流,抑制的半有效浓度分别为162．1μmol·L-1和56．2μmol·L-1．此外,蛇床子素对Cav2．2通道也有一定的抑制作用,在300μmol·L-1。的浓度下,抑制38％的Cav2．2e[37a]电流和61％的Cav2．2e[37b]电流,蛇床子素对钙电流的抑制是快速可逆的。蛇床子素在各个测试电位水平均能抑制上述四种钙通道电流,但不改变电流的激活阂值和最大峰值电流的激活电压。结论：蛇床子素以浓度依赖的方式抑制多种钙通道亚型并表现出不同的亲和力。     

80岁以上老年人冠状动脉旁路移植术合并瓣膜置换手术的临床分析

目的：总结老年患者行冠状动脉旁路移植术（CABG）合并瓣膜置换（VR）手术的特点及经验。方法：上海交通大学附属第一人民医院心血管外科2001年11月至2010年3月对60例年龄大于80的患者施行冠状动脉搭桥＋瓣膜置换手术,男33例,女27例。年龄80-87岁,平均年龄（83.77±2.45）岁。均为冠心病合并瓣膜病变患者。其中36例患者行冠状动脉旁路移植＋二尖瓣置换手术,15例患者行冠状动脉旁路移植＋主动脉瓣置换手术,9例患者行冠状动脉旁路移植＋双瓣置换手术,同时8例患者行三尖瓣成形手术,3例患者行射频消融手术,1例升主动开成形术。置换生物瓣膜者51例,置换机械瓣膜者9例。CABG平均搭桥（2.13±0.75）根,搭桥材料为左乳内动脉与大隐静脉。结果：全组早期死亡9例（15%）,1例死于术后出血,1例死于多器官功能衰竭,7例死于术后心衰。早期生存51例（85%）,出现术后并发症10例,其中2例发生胸腔积液,1例心包填塞,3例肺部感染,1例心房扑动后发生室颤,3例二次开胸止血。给予相应对症治疗后痊愈出院。门诊随访49例,随访时间1～60个月,心功能I级2例、Ⅱ级29例、Ⅲ级18例、Ⅳ级0例（NYHA分级）。结论：对老年患者行冠脉搭桥＋瓣膜置换手术,只要掌握手术适应证,充分作好术前准备、术中及术后处理,手术治疗可以取得良好效果。     

一条大鼠睾丸新基因的生物信息学分析及真核表达

目的：探讨大鼠睾丸组织一条新基因的生物信息学特征和真核表达。方法：构建pEGFP-N1载体的融合质粒进行真核表达,利用生物信息学手段分析基因和蛋白功能。结果：生物信息学分析表明RSA14-44的编码区序列与人类及鼠源RAS同源基因家族核酸序列达到85%以上的同源性;RSA14-44蛋白没有典型的跨膜结构域,也没有典型的N末端信号肽;与人类RhoA蛋白序列达到了89%的同源且具有Rho家族成员的GAAX盒和p-loop结构的基序特征;RSA14-44蛋白大部分氨基酸序列与Rho家族7个已知结构域高度同源;RSA14-44基因真核表达定位于细胞质。结论：RSA14-44基因真核表达定位于CHO-K1细胞质,;编码蛋白质与Rho家族同源性高,为进一步研究其生物学功能提供参考。     

酵母产γ-氨基丁酸发酵条件的研究

目的：研究酵母产γ-氨基丁酸的发酵条件,提高其产γ-氨基丁酸的能力。方法：以高产γ-氨基丁酸的酵母突变株为材料,通过单因素实验研究培养温度、摇床转速、接种量、种龄和培养时间等条件对菌株发酵生产γ-氨基丁酸的影响。结果：最适发酵条件为：培养温度30℃,摇床转速220 rpm,接种量4%,种龄为2d的种子菌,培养时间4d。在此发酵条件下,变异菌发酵液中γ-氨基丁酸含量高达2.588 g.L-1,较优化前提高了53%。结论：发酵条件的优化,提高了菌株产γ-氨基丁酸的能力。     

功能矫形前伸青春期大鼠下颌后浅层嚼肌细胞凋亡的研究

目的：研究功能矫形前伸大鼠下颌后浅层嚼肌细胞凋亡的变化规律,探讨功能矫形的肌肉改建机理。方法：选用50只5周龄Sprague-Dawley（SD）雄性大白鼠,随机分为实验组和对照组各25只。实验组大鼠戴自制上颌功能矫治嚣,引导下颌前伸,并打开咬合。利用RT-PCR方法检测两组大鼠浅层嚼肌Bcl-2和Bax基因表达情况,利用TUNEL方法检测浅层嚼肌细胞凋亡情况。结果：①Bcl-2和Bax基因表达随大鼠戴用矫治器时间的延长而升高,至第3周开始下降但仍高于对照组,但Bax的表达高于Bcl-2。Bax/Bcl-2比值随大鼠戴用矫治器时间的延长而升高,至第4周开始下降。②TUNEL实验结果显示浅层嚼肌细胞在戴用矫治器1天后,开始出现凋亡,随着时间延长而增加,至第3周达到顶峰,第4周开始下降。结论：①Bax/Bcl-2比值升高促进浅层嚼肌细胞凋亡。②功能矫形可引起浅层嚼肌细胞凋亡,导致肌肉的结构和功能发生适应性改建。     

125I粒子植入治疗中晚期食管鳞癌围手术期护理

目的:探讨125I粒子植入治疗中晚期食管鳞癌围手术期的护理的临床效应。方法:2000.01-2005.12间IIb-III期233例胸段食管鳞癌患者随机分为根治加125I粒子植入组(n=112)和单纯性根治术组(n=121)。术前进行放疗知识的专业宣教,根据CT影像资料,根据术前TPS计划模拟肿块所布源的最外层粒子总数作为最终植入数,一般为10～22粒,约为计算量的2/5,术中直视下125I粒子(北京原子高科公司提供)组织间植入。术后防护宣教;用γ射线探测仪检查患者周围的射线强度;通过X摄片观察粒子位移和质量评估;观察术后并发症及生存率。结果:所有患者术后粒子验证无移位、脱落,技术评估满意;未见出血量增加和吻合口瘘。结论:术中125I粒子植入治疗中晚期食管鳞癌,患者依从性好;放射污染小;操作简单、安全;有效降低局部复发率而不增加手术并发症。     

高分辨MSCT薄层重组在常规胸部体检中的应用

目的：探讨多排螺旋CT（MSCT）高分辨薄层重组对体检中肺部疾病的诊断价值,以及MSCT薄层重组与常规CT扫描图像质量及诊断准确率对照。方法：搜集做64排常规CT扫描同时行薄层重组的2473例体检病例中筛选的97例患者进行回顾性分析。结果：97例患者在常规CT扫描中有80例可以显示病变,而在MSCT薄层重组中97例均有阳性发现;其中双肺弥漫性病变79例（两肺间质纤维化78例,肺内多发转移瘤1例）,肺结核3例,肺内孤立结节12例,早期中央型肺癌1例,先天性支气管闭锁1例以及纵隔肿瘤1例;MSCT薄层重组图像可清晰显示肺内小叶间隔线增厚、弥漫分布的囊性病变、肺内结节的细微征象。结论：MSCT薄层重组在胸部体检中的诊断阳性率、细节分辨率、图像质量及确诊率均优于常规CT,可作为肺内病变尤其是早期肺癌筛查方法之首选。