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目的:获得Scytovirin(SVN)蛋白及其多克隆抗体.方法:按照NCBI上公布的SVN基因序列设计合成引物,合成SVN基因,构建pET32c-SVN原核表达重组质粒,经限制性酶切分析、DNA序列测定插入片段正确;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达;用离子交换层析法及金属亲合层析法纯化蛋白,采用Tris-Tricine系统分析;以经过纯化的蛋白为抗原免疫白兔,制备SVN多克隆抗体.结果:对表达产物进行了分离纯化,SVN纯度达到91%;用纯化的样品制备了多克隆抗体,抗血清效价为1∶102 400.结论:SVN在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并制备了其多克隆抗体,为进一步深入研究SVN提供了材料. 相似文献
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嗅球成鞘细胞的分离培养与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨一种获取高纯度嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的方法.方法:从新生SD大鼠(3d)嗅球中迅速分离嗅神经层和嗅颗粒层,采用酶消化法分离细胞,差速贴壁法纯化细胞,接种于多聚赖氨酸包被的培养板内培养2d,采用NGFRp75和S100蛋白双标免疫组化、以Hoechst33342复染鉴定OECs的纯度.结果:OECs的纯度为(95.64±2.76)%.结论:本法是一种相对简便易行且经济、稳定、有效的OECs分离方法. 相似文献
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以冬凌草的分枝数、单墩叶重及叶中冬凌草甲素的含量作为冬凌草药材产量和质量的评价指标,确定了河南淇县野生冬凌草和湖北广水、武汉野转家种冬凌草的最佳采收期,并分析了气象因素对冬凌草药材质量和产量的影响。结果表明:气象因素对引种地与原产地冬凌草的质量没有明显影响,药材叶中冬凌草甲素含量均在6月份左右达到峰值且十分接近;但气象因素对冬凌草产量则有影响,气候不同导致引种地野转家种药材的分枝数比原产地野生药材多2~4倍。综合质量和产量的考察结果,冬凌草的最佳采收期应定在其开花前,引种地武汉宜定在6月份,引种地广水宜定在6~7月份,原产地河南淇县宜定在6~8月份。 相似文献
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HRGP在小麦抗寒锻炼过程中的变化及其与抗寒性的关系 总被引:8,自引:0,他引:8
强抗寒小麦品种(R-025、中品94-19、品83-1、品83-2、品83-3、米罗诺夫808)经抗寒锻炼后,其幼苗体内的游离脯氨酸、细胞壁结合的羟脯氨酸和糖蛋白含量发生了明显的变化.游离脯氨酸含量比未经抗寒锻炼处理时增加5~32倍,细胞壁结合的羟脯氨酸含量比对照增加1.77~2.17倍,糖蛋白含量比对照增加4.68~9.72倍,而不抗寒小麦品种(中国春、冬103)增加量较小.脯氨酸积累进程各个品种间差异比较大,品83-1、品83-2积累较快,抗寒锻炼第21d时达到最高峰,而R-025在第56d达到最高峰.脯氨酸含量与小麦品种抗寒性相关不显著(相关系数为0.3462),而羟脯氨酸含量、糖蛋白含量与小麦品种抗寒性相关显著,相关系数分别为0.6491和0.7039.从小麦细胞壁纯化得到了2种伸展蛋白Extensm1和Ex-tensin2,其含量都和小麦品种抗寒性呈正相关.Extensin1是分子量为28kD、羟脯氨酸为主要成份(32mo1%)的富含羟脯氨酸糖蛋白. 相似文献
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