鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白质的分离和鉴定

鼻咽癌中p53基因突变罕见,但绝大部分鼻咽癌中存在p53蛋白过表达/聚集且功能失活.然而,到目前为止p53蛋白失活的机制仍然不清楚.为揭示鼻咽癌中p53蛋白功能失活的机制,采用免疫共沉淀技术分别富集鼻咽癌细胞系HNE1和HNE2的p53结合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取p53结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）分析,得到相应的肽序列标签（peptide sequence tags, PST）,通过搜索数据库在鼻咽癌细胞系中鉴定了9个p53结合蛋白.分别是热休克蛋白70（HSP70）家族成员GRP-78和GRP-75、HSP90家族成员GRP-94、核纤层蛋白A/C （Lamin A/C）、α-actinin 4、Ezrin/Cytovillin、DNA复制准许因子/MCM3蛋白(DNA replication licensing factor/minichromosome maintenance 3 protein, MCM3)、CD98/4F2 heavy chain和蛋白激酶C（PKC）.并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对HNE₁细胞蛋白条带3鉴定的p53相互作用蛋白之一HSP78进行了验证.首次在鼻咽癌细胞中鉴定了9个p53结合蛋白,为阐明鼻咽癌中p53蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索.     

金佛山自然保护区种子植物区系初步研究

根据新近调查资料及对历史文献资料的查阅,整理出重庆市金佛山地区种子植物区系资料。到目前为止,金佛山共分布有种子植物183科1256属4 764种,其中野生植物达160科(其中裸子植物7科,被子植物153科)1111属4093种。野生植物中单种科17个,少型科(2～5种)33个,多种科(6～50种)87个,大科(51～100种)14个,特大科(101种以上)9个,分别占金佛山野生种子植物总科数的10．625％、20．625％、54．375％、8．75％和5．625％;种子植物科的区系成分以热带成分最多,达72科,占金佛山种子植物总科数的45．00％,其次为温带和世界分布型,分别为41科和33科,分别占25．625％和20．625％,特有成分仅17科(统计分析数据以14科计),其中东亚特有科13科,中国特有科4科。属的区系成分按世界分布、热带分布、温带分布、东亚分布和中国特有分布五种成分分别为73属、483属、332属、174属和49属,分别占金佛山种子植物总属数的6．57％、43．48％、29．88％、15．66％和4．41％。金佛山种子植物科的区系成分具备了全国种子植物区系15个分布类型及31变型的10型及10变型,属的区系成分具备14型及24变型。本文还就金佛山与邻近的神农架和壶瓶山等进行了比较分析,总体结论为金佛山在种子植物分布区类型及物种分布数量上都较为丰富,证明了金佛山地区为我国亚热带植物的自然分化和分布中心之一的观点。     

广东杨东山十二度水省级自然保护区啮齿类、翼手类物种多样性初步研究

对广东杨东山十二度水省级自然保护区的啮齿类、翼手类物种多样性进行了初步调查,采集动物标本61号,为9种,观察或采访记录到3种,该保护区共有两个目的哺乳动物12种,其中我国特有种1种——贵州菊头蝠(为2000年发现的广东省翼手类新记录)。鼠类中进入国家保护的有益的或者有重要经济、有科学研究价值的陆生野生动物名录的动物有5种,约占该保护区啮齿类种类的70％。初步调查显示,该保护区翼手类、啮齿类动物种类较为丰富,是食物链中的重要环节,在该保护区自然生态系统中占有极重要的地位,深入开展对它们的研究十分必要。     

一种采集水稻二化螟卵(块)的高效简便新方法

比较了二化螟Chilosuppressalis卵块的塑料袋收集法和稻株法。结果表明 ,塑料袋法和稻株法收集的卵粒总数及卵孵化率都没有显著的差异 ,均为 2 79粒卵 雌蛾和 95 %。塑料袋法收集的卵块数较稻株法的多 ,但小卵块比例较高 ( <1 0 0粒卵 卵块 )。还讨论了采用塑料袋法收集二化螟及其它昆虫卵的优点。     

木兰突细蛾生物学特性及其防治

木兰突细蛾Gibbovalvaurbana(Meyrick)为木兰科植物叶部的重要害虫之一。在广州年发生 8代 ,世代重叠 ,以蛹越冬。翌年 2月下旬、3月上旬成虫羽化、交配、产卵。幼虫孵化后潜入叶表皮取食叶肉组织造成叶枯黄凋落。用 5 0 %久效磷乳油、5 0 %甲胺磷乳油、40 %氧化乐果乳油常规喷雾有良好防治效果。幼虫期、蛹期主要天敌有姬小蜂科 2种。蛹期还有一种病菌感染。     

新扬州鸡DNA指纹J带与生产性能的相关性研究

以EAV(禽内原性反转录病毒片段)为探针,EcoRI为限制性内切酶,对新扬州鸡DNA指纹图谱进行了的研究。结果表明：DNA指纹J带在新扬州鸡上存在,并对新扬州鸡早期增重具有减效效应,可作为新扬州鸡早期增重的遗传标记进行标记辅助选择。     

广东古兜山自然保护区蕨类植物多样性对植被不同演替阶段的生态响应

蕨类植物是最早登陆的维管植物,至今仍然是生态系统初级生产力的重要组成部分。它们一方面可以通过改造生态环境影响森林群落发生和发展的过程,另一方面由于它们对生态因子变化的敏感性,其组成的多样性及其对环境的适应组合也随着森林群落发生和发展而不断变化。为了解蕨类植物在群落演替的各个阶段的种类组成、物种多样性格局演变规律及其适应方式的选择,本文选择广东古兜山自然保护区中的草丛、灌丛、次生常绿阔叶林和地带性南亚热带季风常绿阔叶林(以下相对简称“原生林”)等4个处于不同演替阶段的植被类型中的蕨类植物群落进行研究。每一植被类型中选取4个5m×5m代表性小样方进行取样调查,对其主要数量特征、群落的α多样性、β多样性、不同群落间的相似性系数和蕨类植物的种类性质进行了分析。结果表明:随着群落演替的进展,草丛、灌丛、次生林和原生林各阶段植被中:(1)群落之间的β多样性指数逐渐增大,而相似性指数依次降低;(2)蕨类植物的物种丰富度依次增大,而群落的多样性指数、生态优势度和均匀度并不伴随着群落的丰富度呈明显的规律性变化;(3)具革质叶的蕨类、阳生蕨类和进行无性繁殖的蕨类植物在各阶段所占的比例和重要值比重逐渐减少,而具草质叶的蕨类、阴生蕨类和进行有性繁殖的蕨类植物则     

抗DAZAP2抗体的制备及在多发性骨髓瘤研究中的应用

为了进一步从蛋白水平上检测DAZAP2(deleted in azoospermia associated protein 2)在多发性骨髓瘤患者中的表达及研究DAZAP2的功能,以正常人的骨髓单个核细胞的总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZAP2完整编码序列,构建原核表达重组质粒pQE30-DAZAP2,转化大肠杆菌JM109后,加IPTG诱导表达4h时,表达蛋白显著增加,Ni-NTA层析柱纯化蛋白。以该纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DAZAP2抗体,ELISA检测抗体的效价在1：6400以上,Western blot检测抗体的特异性较好．用该抗体检测出DAZAP2雀6例正常人及4例多发性骨髓瘤患者中有表达,其他7例患者中没有表达,与RT-PCR结果一致,该抗体具有一定的临床应用前景,并能进一步用于功能研究．     

犬瘟热病毒临床流行野毒株F蛋白信号肽区分析

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白基因(F)序列, 设计引物扩增F蛋白部分信号肽区, 片段长369 bp。对2005年~2007年收集的犬瘟热阳性的水貂、狐、貉实质脏器、血液、尿液等样品进行扩增, 获得了13个CDV F蛋白部分信号肽区基因片段。序列分析发现, CDV野毒F蛋白该区段核苷酸与氨基酸序列与目前我国使用疫苗株CDV3及其他国内外疫苗株比较存在较大差异, 与CDV3对应区段的核苷酸同源性在80.7%~83.2%之间, 而推导的对应氨基酸序列同源性只有64.8%~71.3%。部分信号肽区的氨基酸疏水性分析, 推测其调控功能也发生变化, 本研究为CDV遗传变异和分子流行病学提供理论数据。     

鼎湖山生物圈保护区层间植物物种多样性的研究

本文研究了鼎湖山生物圈保护区的层间植物（含藤本植物和附生、寄生维管植物）的特点及其在8个自然植被类型的分布格局。结果表明,低海拔的河岸林和沟谷雨林中的层间植物不仅物种数和个体数多,而且多样性指数高。反映了层间植物与环境湿度呈正相关。季风常绿阔叶林中的藤本植物的种类和个体数最少,而且多样性指数最低,这与其郁闭度较大导致林下光照强度弱有关。就演替系列而言,附生植物物种多样性的顺序为：季风常绿阔叶林＞针阔混交林＞针叶林＞稀树灌丛。但藤本植物多样性指数的顺序排列为：稀树灌丛＞针叶林＞针阔混交林＞季风常绿阔叶林。在没有人类干扰的条件下,随着群落演替的进行,藤本植物的物种多样性逐渐减少。因此在某些地区,可以将藤本植物物种多样性的高低作为衡量森林演替阶段的一个指标。