大蹼铃蟾皮肤分泌液中抗菌活性肽的分离纯化及其性质

通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５,Ｇ－５０和Ｇ－２５洗脱等步骤,从云南产大蹼铃蟾（Ｂｏｍｂｉｎａｍａｘｉｎａ）皮肤分泌中分离得到了一种有广泛抗菌活性的多肽,被命名为ＭＳＰ－Ⅶ,用快原子轰击质谱（ｆ．ａ．ｂ．ｍ．ｓ）分析其Ｍ＋／Ｚ＝２６４８。即此活性肽的分子量为２６４７Ｄ。用自动氨基酸分析仪分析,含有２６个氨基酸,抗菌实验结果表明,此多肽对格兰氏阴性和格兰氏阳性细胞以及真菌都有较强的抗菌活性,溶血实验表     

三个三倍体鲫鱼品系及野鲫mtDNA的比较研究

用16种限制性内切酶研究了银鲫(3N=156～162)、彭泽鲫(3N=162)和缩骨鲫(3N=150)3个三倍体鲫鱼品系及野鲫(2N=100)的线粒体DNA。有6种酶在种系间和种系内产生限制性片段长度多态性(RFLPs),银鲫共存在4种单倍型,彭泽鲫2种,野鲫3种,缩骨鲫1种。彭泽鲫和银鲫拥有相同的常见单倍型,缩骨鲫的单倍型属于野鲫的常见型。根据限制性位点的变异数据,计算了单倍型间的相似性、核苷酸多样性、品系内核苷酸多样性和品系间的遗传距离,确定彭泽鲫属于银鲫的一个地方品系,缩骨鲫属于野鲫的一个地方品系。根据核苷酸的差异,推算出银鲫和野鲫两个亚种的分化大约在11万年前完成。     

Change of cholinergic transmission and memory deficiency induced by injection of b-amyloid protein into NBM of rats

The change of cholinergic transmission of b-amyloid protein (b-AP) treated rats was studied by intracerebral microdialysis sampling combined with HPLC analysis. b-AP1-40 was injected into nucleus basalis magnocellularis (NBM). Passive avoidance response test (step-down test) and delayed alternation task were used for memory testing. The impairment of memory after injection of b-AP1-40 into NBM exhibited mainly the deficiency of short-term working memory. One week after injection of b-AP1-40 the release of acetylcholine (ACh) from frontal cortex of freely-moving rats decreased significantly, and the response of cholinergic nerve ending to the action of high [K+] solution was rather weak. In control animals the percentage of increase of ACh- release during behavioral performance was 57%, while in b-AP1-40 - treated rats it was 34%. The temporary in-crease of the ACh-release of the rat put into a new place was also significantly diminished in b-AP1-40 -treated rats. The results show that the injection of b-AP1-40 into NBM impairs the cholinergic transmission in frontal cortex, and the impairment of cholinergic transmission may be the main cause of the deficit of working memory.     

A MEMBRANE SEPARATOR/BIOREACTOR COUPLED WITH ABSORBANCE MEASUREMENT FOR DETECTION OF Escherichia coli O157:H7

A membrane separator/bioreactor system was developed for rapid detection of Escherichia coli O157:H7. The system consisted of a membrane separator/bioreactor (0.45 μm of the pore size) to separate the-complexes of E. coli O157:H7 and alkaline phosphatase-conjugated anti-E. coli O157:H7 antibodies from the sample and to produce p-nitrophenol through the enzymatic reaction (p-nitrophenyl phosphate hydrolysis), and an optical detector for measuring the p-nitrophenol absorbance at 400 nm. The membrane material and the flow rate of the substrate for the enzymatic hydrolysis had great effects on the absorbance of p-nitrophenol. The optimum conditions for the enzymatic reaction were determined as 1.0 M Tris buffer, pH 8.0, and 0.1 M MgCl₂ for this system. The detection range was 10⁴± 10⁷ CFU/mL with a relative standard deviation of 4.3 ± 14.2%, and whole procedure could be completed in 50 min without any enrichment and culture. Other bacteria such as Salmonella typhimurium, Campylobacter jejuni and Listeria monocytogenes had no significant interference with the detection of E. coli O157:H7.     

蛋白质与类药分子的柔性对接

本文利用“禁忌搜索”算法和Ｇｅｈｌｈａａｒ简化能量势函数实现蛋白质与类药分子之间的柔性对接。对包含１００个复合物的检验集进行了计算检验,得到了满意的结果,８９％预测复合物结构的误差小于０．２５ｎｍ。与利用遗传算法进行柔性对接的ＧＯＬＤ程序相比,本方法的成功率高,局限性小,计算时间也短。     

降钙素基因相关肽基因直接注射大鼠

所设计的基因表达一个含降钙素基因相关肽(CGRP,37个氨基酸)、及其N端信号肽和C端酰胺化位点的多肽.该基因克隆到哺乳动物表达载体pBPV上并构成pBPV-CGRP.将此质粒DNA直接注射自发高血压大鼠并导致其血压在注射样品后3～22 d内明显下降,下降幅度超过了12％,在第16天甚至达到了24.42％.基因直接注射比CGRP本身的降压作用维持时间更久.     

中国和印度猕猴(Macaca mulatta)两个种群颅骨的比较

中国云南中南部和印度的猕猴(Macaca mulatta)两个种群的颅骨形态以及等位基因的比较研究结果表明:两者的面宽、颅的形态大小和等位基因频率均存在较大差异。这些差异也分别存在于印度种群(M.m.mulatta)与西藏亚种(M.m.vestita),川西亚种(M.m.lasiotis),泰国种群和越南种群之间。在20个血蛋白等位基因中,仅约8个是各亚种或种群共有的,代表共同的离征或祖征。因此,云南中南部标本既不是印度指名亚种,也不是泰国的siamica亚种,其亚种名应重新厘定。大陆型分布的猕猴区域性种群之间的遗传异质性大于同质性。上述差异可能是随机遗传漂变的产物。     

矮紫金牛的开花生物学与繁育系统研究

矮紫金牛(Ardisia humilis)是优良的野生观赏植物。为探究该植物开花生物学与繁育系统特征,促进其杂交选育与园林应用,该研究以同质园引种的矮紫金牛为对象,对其开花物候、访花昆虫种类及访花行为进行观测,采用花粉离体萌发法和联苯胺-过氧化氢法,对花粉活力与柱头可授性进行检测,结合配子显微观测法和控制性授粉实验,对其繁育系统进行分析。结果表明：(1)花期为5月中下旬至6月中上旬,盛花期在5月底,单花、单株和群体水平的花期分别为1、17～20、25 d。(2)开两性花,雌蕊先熟,与雄蕊成熟期部分重叠,柱头可授性滞至雄蕊凋谢后1 d。(3)杂交指数(OCI)值为4,花粉/胚珠比(P/O)值为5.61×10³,显示其繁育系统以异交为主,部分自交亲和,需要传粉者。(4)自然授粉的结实率最高(平均52.96%),其次是自花授粉(52.29%)和人工异株授粉(50.33%),三者差异不显著(P> 0.05),但均显著高于人工同株授粉的结实率(28.67%)(P<0.05),显示矮紫金牛不仅异交亲和性强,还具有很强的自动自花授粉能力。(5)主要传粉昆虫包括隧蜂科...     

桔黄赛多孢霉外泌弹性蛋白酶的生化特性

外泌弹性蛋白酶是桔黄赛多孢霉(Scedosporium aurantiacum)主要毒性蛋白酶之一,本文在前期研究的基础上,对这种蛋白酶的序列、结构和酶学特性进行了研究。首先通过柱层析技术将S. aurantiacum培养上清液中的蛋白进行了分离,然后通过酶谱电泳纯化得到了弹性蛋白酶条带。从凝胶中提取了弹性蛋白酶,通过质谱技术对其序列进行了检测,并对其反应特性、活力和反应动力学参数进行了研究。结果显示,S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对弹性蛋白和牛跟腱胶原蛋白(bovine achilles tendon collagen, BATC)具有较好的水解性能,对鱼皮胶原蛋白(fish skin collagen, FSC)的水解效率高于对鱼鳞明胶的水解效率,对酪蛋白的水解性最差。作用于弹性蛋白时,其催化效率小于猪胰腺弹性蛋白酶。Zn²⁺对酶活力有提升作用,而Ca²⁺、Mg²⁺、Na⁺、(2S)-2-[(4S)-2-氨基-1,4,5,6-四羟基4-嘧啶基]-N-[[[(1S)-1-羰基-3-甲基丁基]氨基]羰基]甘氨酰- N1-[(1S)-1-甲基-2-氧乙基]-l-谷氨酸甲酰胺(elastatinal)和苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride, PMSF)均对酶活有抑制作用。该蛋白酶和青霉(Paecilomyces lilacinus)外泌丝氨酸蛋白酶(PDB Entry: c3f7oB_)的序列最相似,且有多段保守序列的氨基酸个数多于7个,可以作为PCR反应引物设计的模板。酶学特性实验表明,S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对肺组织中的弹性蛋白具有降解作用,其蛋白表达和毒性机制需要进一步的研究。     

中国南亚热带和北温带地区禾本科C3与C4草本植物花果期差异研究

为揭示不同地区禾本科C₃与C₄植物花果期受气候因子的影响,以广东省和内蒙古自治区分别代表南亚热带和北温带地区,从植物志中分别获得两地395和265种禾本科草本植物的3个花果期特征(始花期、末花果期和生殖期长),比较开花物候的差异,并通过一般线性模型探究其与气候因子(年均温与年均降水量)的相关性。结果表明,南亚热带与北温带地区C₃植物的始花期均比C₄植物早。两地C₄共有种在南亚热带地区具有更早的始花期、更晚的末花果期和更长的生殖期,而C₃共有种的末花果期在两地无显著差异,但在南亚热带地区始花期更早,生殖期更长。随年均温升高,北温带地区禾本科植物的始花期提前,而南亚热带地区则延后;随年均降水量升高,两地禾本科植物始花期与末花果期均延迟;禾本科植物生殖期长与年均温和年均降水量均不存在相关性。跨地区分析表明,末花果期、生殖期长与年均温和年均降水量均正相关,而与始花期不相关。禾本科C₃植物比C₄植物对地区间气候差异响应更敏...