鸡新城疫病毒RT-TaqMan-LAMP检测方法的建立及应用

【背景】新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的传染可能会引发作为二类传染病之一的新城疫(Newcastledisease,ND),给养禽业带来巨大的经济损失,因而早期、精准的NDV筛查是防治ND暴发的关键。【目的】针对新城疫病毒(NDV)建立结合TaqMan探针的反转录环介导等温扩增技术(RT-TaqMan-LAMP)快速检测方法。【方法】根据NDV F基因序列设计特异性引物组和TaqMan探针,以重组质粒pMD-NDV-F为阳性标准品优化反应条件,验证该方法的特异性、灵敏性和重复性,同时与国家标准(GB/T16550—2020)中推荐的RT-qPCR方法比较,对70份实际样本进行验证。【结果】最佳反应条件为61℃60 min。引物和探针最优浓度：1.6μmol/L (FIP/BIP)、0.2μmol/L (F3/B3)、0.8μmol/L (LF/LB)、0.2μmol/L (GTP)。最低检测限为1.651×102 copies/μL,灵敏性是LAMP方法的100倍。无非特异性扩增,与禽流感病毒(avian influenza virus, AIV...     

四种K:CA荚膜型别克罗诺杆菌的荚膜多糖组分研究

【目的】克罗诺杆菌(Cronobacter)是一类以奶粉为主要传播媒介的食源性致病菌,能够引起坏死性小肠结肠炎、脑膜炎、菌血症等疾病。荚膜是细菌常见的毒力因子,本研究对4种K:CA型别的Cronobacter荚膜多糖进行分析,以期发现荚膜型别与荚膜多糖的单糖组成的关联规律。【方法】本研究通过苯酚-硫酸法和氢核磁共振(1HNMR)分别对28株Cronobacter(4种K:CA型别)荚膜多糖的产量和单糖组成进行分析。【结果】文章研究了不同培养基、培养时间对Cronobacter荚膜多糖产生的影响,确定了最佳培养条件为在牛奶琼脂培养基中培养48.0h,而且不同条件下未改变Cronobacter荚膜多糖的单糖组成。本研究进一步发现,4种K:CA型别菌株间的荚膜多糖产量具有显著差异,K2:CA2型别的荚膜多糖平均产量最高。其中,2株荚膜多糖产量高的菌株C. sakazakii ATCC 12868和C. sakazakii ATCC 29004也均为K2:CA2型别,产量分别为19.6%和28.4%。此外,通过¹H NMR测定出28株Cronobacter的荚膜多糖中的单...     

小檗碱抗新生隐球菌活性和作用机制

【目的】研究小檗碱对新生隐球菌的抗菌活性及其作用机制。【方法】采用微量肉汤稀释法测定小檗碱对新生隐球菌标准菌株和临床分离菌株的最小抑菌浓度,通过棋盘法测定小檗碱与氟康唑、两性霉素B的协同作用,测定小檗碱对隐球菌重要毒力因子的表达,以及对巨噬细胞和隐球菌互作的影响,采用隐球菌感染大蜡螟模型测定小檗碱的体内杀菌活性。【结果】小檗碱是一种杀真菌化合物,在测试的菌株中,最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)范围为8-16μg/mL。亚致死剂量小檗碱能够抑制隐球菌荚膜大小、产黑色素能力和有性生殖能力,并能增强巨噬细胞的杀菌能力。锌指转录因子Nrg1介导了上述重要的过程。在隐球菌感染动物模型中,小檗碱能够延长感染大蜡螟的存活时间。【结论】小檗碱在体内外具有优异的抗隐球菌活性,有望作为抗隐球菌药物开发的起始化合物。     

常见水稻病虫害胁迫对转cry1C基因抗虫水稻Bt蛋白表达量的影响

【目的】明确转Bt基因抗虫水稻在病虫害胁迫下对Bt蛋白表达量的影响。【方法】以Bt水稻T1C-19(表达Cry1C蛋白)为研究对象,探究褐飞虱、白叶枯病等6种水稻常见病虫害胁迫下其体内Bt蛋白的表达量变化。【结果】褐飞虱取食引起T1C-19水稻叶片中Bt蛋白含量降低,而黑尾叶蝉取食显著降低了T1C-19水稻叶鞘中的Bt蛋白含量,白叶枯病侵染导致Bt水稻叶鞘中的Bt蛋白含量显著上升。二化螟、水稻普通矮缩病、稻瘟病的胁迫对转基因水稻T1C-19叶片和叶鞘中的Bt蛋白含量均无显著影响。【结论】病虫害胁迫因种类不同对Bt水稻中Bt蛋白表达量的影响有所不同。这将为Bt水稻的抗虫效果评价提供数据基础,同时为Bt水稻病虫害综合治理提供科学依据。     

酵母生物合成胞苷二磷酸胆碱 Ⅲ.异常汉逊酵母SVI 311生物合成CDP胆碱的条件

对异常汉逊酵母(H.anomala)SVI 311静息细胞由 CMP和磷酸胆碱合成 CDP- 胆碱的条件,包括反应物浓度、膜活性剂、温度和pH等进行了研究。考察了这些条件对CDP- 胆碱生物合成各主要步骤的影响。     

Human pescadillo induces large-scale chromatin unfolding

The human pescadillo gene encodes a protein with a BRCT domain. Pescadillo plays an important role in DNA synthesis, cell proliferation and transformation. Since BRCT domains have been shown to induce chromatin large-scale unfolding, we tested the role of Pescadillo in regulation of large-scale chromatin unfolding. To this end, we isolated the coding region of Pescadillo from human mammary MCF10A cells. Compared with the reported sequence, the isolated Pescadillo contains in-frame deletion from amino acid 580 to 582. Targeting the Pescadillo to an amplified, lac operator-containing chromosome region in the mammalian genome results in large-scale chromatin decondensation. This unfolding activity maps to the BRCT domain of Pescadillo. These data provide a new clue to understanding the vital role of Pescadillo.     

5Fr Heartrail ST01导管在冠心病复杂病变介入治疗中的应用经验

目的:评价5Fr Heartrail ST01导管在冠心病复杂病变介入治疗中的输送支撑作用。方法:连续入选2012年10月至2014年02月南京市第一医院所有冠心病介入治疗过程中使用5Fr Heartrail ST01导管的病例,回顾性分析患者基线特征、病变特征和手术经过及器械成功率。结果:共有33例患者介入术中使用5Fr Heartrail ST01导管,剔除10例并非处理冠状动脉狭窄病变而使用5Fr Heartrail ST01导管的患者,共有23例冠心病患者采用5Fr Heartrail ST01导管增强支撑,协助球囊和/或支架通过病变。5Fr Heartrail ST01导管的器械成功率为86.96%。其中2例器械失败患者采用Tornus穿通导管补救成功;1例改用6F AL 1.0指引导管补救成功。手术成功率为91.30%,1例无法继续配合而手术失败;1例因出现非血流限制性夹层而失败。结论:5Fr Heartrail ST01导管为冠心病复杂病变介入治疗提供优秀的支撑,提高手术成功率。     

重工业城市(抚顺)实施清洁生产发展循环经济实例研究

论证了清洁生产与循环经济之间的关系 ,全面论述了发展循环经济的重要性、必要性及现实意义 ,提出了发展循环经济的切实可行的对策方案 ,为开创资源型城市可持续发展道路打下了扎实的理论基础。同时 ,以抚顺为研究对象 ,通过对其工业布局、产业结构、经济发展规模的分析 ,探索找出了重工业城市实施清洁生产的最佳途径。     

避暗反应测定大鼠学习记忆功能方法的探讨

目的 为了提高避暗反应测定动物学习记忆功能的敏感性,本实验对三种实验及统计方法进行了评价。方法 采用IBO致基底前脑胆碱能神经元损伤模型和东莨菪碱所致的记忆障碍模型,对单次简单测试法、多次简单测试法和多次记分测试法的敏感性进行了比较。结果 对于基底前脑损伤模型,单次简单测试法的潜伏期学习记忆指标无法显示出模型组与对照组之间的差异。多次简单测试法两种指标均能显示出显著性差异,且较多次记分测试法的指标差异的显著性高。对于东莨菪碱致痴呆模型,也有同样的效果。结论 多次简单测试法更能敏感地反映动物的学习记忆功能。     

全光和遮阴下两种亚热带木本植物的光合作用对光的响应

以气体交换和调制叶绿素荧光测定技术测定了2年生亚热带乔木黧蒴,林下灌木九节在全自然光和17％自然光下叶片同部位的光合作用和与之相关的荧光参数的日变化。和全光照比较,遮阴下植物叶片净光合速率Pn,气孔导度gs,胞间CO2浓度与大气CO2浓度之比Ci/Ca,类胡萝卜素与叶绿素含量之比Car/Chl,光系统Ⅱ原初光[化学效率Fv/Fm 的变化幅度相对较小,种间差异较不明显,全光照黧蒴和九节Pn的口变化图式与gs,Ci/Ca类似,与Φpsll,qp的下降吻合。全光下黧蒴叶片qN和Car/Chl的口进程表现为增加,九节则下降,低的Car/Chl可能是导致强光下九节未能提高其qN的原因,正午前后,黧蒴qN和Car/Chl增大,而qp和Φpsll降低,Fv/Fm则保持相对稳定,反映其开放的PSII反应中心数目在此期间虽有所减少,但仍然维持了较高的光化学效率,提高的Car/Chl和qN则说明其肯有较强的对过剩激发能的耗散能力,此条件下九节的gs,Fv/Fm和qN下降且明显低于黧蒴,Φpsll和qp保持相对稳定但高于黧蒴的水平,表明九节的PSII反应中心活性较稳定,但强光下气孔部分关闭,较低的Fv/Fm和qN限制了CO2供应和对光能的有效利用,且未能诱导热能耗散机制的积极运行及对光合器起到保护作用。总体上说,九节对高光强反应比黎蒴敏感。