全文获取类型
收费全文 | 119133篇 |
免费 | 9399篇 |
国内免费 | 7705篇 |
出版年
2024年 | 161篇 |
2023年 | 1374篇 |
2022年 | 2936篇 |
2021年 | 5897篇 |
2020年 | 3881篇 |
2019年 | 4775篇 |
2018年 | 4719篇 |
2017年 | 3521篇 |
2016年 | 5016篇 |
2015年 | 7264篇 |
2014年 | 8534篇 |
2013年 | 8977篇 |
2012年 | 10806篇 |
2011年 | 9610篇 |
2010年 | 5948篇 |
2009年 | 5224篇 |
2008年 | 6101篇 |
2007年 | 5410篇 |
2006年 | 4743篇 |
2005年 | 3676篇 |
2004年 | 3254篇 |
2003年 | 2805篇 |
2002年 | 2444篇 |
2001年 | 2231篇 |
2000年 | 2059篇 |
1999年 | 2021篇 |
1998年 | 1134篇 |
1997年 | 1245篇 |
1996年 | 1108篇 |
1995年 | 986篇 |
1994年 | 1026篇 |
1993年 | 712篇 |
1992年 | 1057篇 |
1991年 | 904篇 |
1990年 | 645篇 |
1989年 | 601篇 |
1988年 | 510篇 |
1987年 | 443篇 |
1986年 | 409篇 |
1985年 | 413篇 |
1984年 | 225篇 |
1983年 | 205篇 |
1982年 | 146篇 |
1981年 | 118篇 |
1980年 | 109篇 |
1979年 | 117篇 |
1978年 | 81篇 |
1977年 | 61篇 |
1974年 | 74篇 |
1972年 | 62篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 18 毫秒
991.
单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ型及Ⅱ型之间有很多共同抗原,能引起血清学交叉反应,鉴别诊断比较困难。本实验利用重组DNA技术,将部分HSV-2DNA的PstI片段克隆到载体质粒PSK中,并筛选出两个重组质粒(P和P)只与HSV-2反应,与HSV-1不反应,这两个重组质粒中所含的HSV-2DNA片段大小分别是3.1和4.3kb,另外,还筛选了一个重组质粒(PHSV2-1,含5.8kbHSV-2DNA片段)与HSV-1和HSV-2均反应。将4.3kb的片段用光生物素标记后作为探针检测了159份人阴道拭子,其中23份样品呈阳性反应,其余均为阴性,从23份阳性样品中挑选12价涂片用间接荧光抗体法检测也都呈阳性反应,随机挑选的几份杂交反应阴性样品在间接荧光试验中也是阴性。本实验制备的HSV通用及HSV-2型特异性探针将比常规的血清学方法诊断和鉴别HSV-1和HSV-2感染更为可靠。 相似文献
992.
发酵活性豆渣饲料的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
活性豆渣饲料是新鲜豆渣经微生物发酵而得到的。本文介绍了发酵菌株的筛选过程,并对发酵的最适条件进行了研究。分析结果表明,这种饲料含有蛋白酶等多种酶类,蛋白质、氨基酸的含量均比未发酵的豆渣有所增加,而且克服了豆渣含水量大、易腐败的缺点,有利于畜禽更充分地消化吸收。经动物喂养实验证明.活性豆渣饲料可代替50%以上的鱼粉,是一种非常理想的蛋白饲料。 相似文献
993.
一株斜纹夜蛾核型多角体病毒毒力及基因组酶切的研究王晓容,刘明富,刘润忠,兰萍章,张友清(中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071)关键词斜纹夜蛾,核多角体病毒,毒力测定,限制酶分析斜纹夜蛾(Spodopleralitura)是重要的农业害虫之一。关... 相似文献
994.
伪狂犬病毒闽A株基因文库的构建及物理图谱分析 总被引:6,自引:0,他引:6
本文报道以质粒pBR322作载体,用鸟枪法克隆出了PRV闽A株除BamHI-1,2外的所有酶切片段,构建了PRV闽A株基因文库,并以克隆出的BamHI片段用光生物素标记作探针,应用分子杂交法确定了PRV闽A株绝大部分限制性内切酶位点的位置。 相似文献
995.
地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA 总被引:2,自引:0,他引:2
本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长抑素反意RNA(cRNA)探针。实验动物选用wistar新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Dig-UTP标记的cRNA探针杂交,杂交后用抗Dig-碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。X-磷酸盐-NBT显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素mRNA神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Dig标记cRNA探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内mRNA的表达。 相似文献
996.
评世界保护联盟新的物种受威胁分类系统草案 总被引:2,自引:0,他引:2
王献溥 《植物资源与环境学报》1994,3(4):55-58
为了进一步了解物种受威胁的情况和发展,以加强物种保护工作,世界保护联盟制定了一个新的物种受威胁分类系统草案,把物种受威胁的程度分为9个级别,即绝灭种、野生状态下的绝灭种、极危种、濒危种、渐危种、敏感种、安全的/危险性小的种、不充分了解的种和未估价的种。本文对这个分类系统草案作了简略的评介。 相似文献
997.
本实验用平截末端连接法把卡那霉素抗性基因插入到大豆根瘤菌(Brahyrh;zobiumjaponicum)110的苹果酸脱氢酶(mdh)基因中,致使mdh基因失活,再通过电激法把这一重组基因转入大豆根瘤菌(Brahyrhizobiumjaponicum)2143中,进而探讨mdh基因失活对大豆固氮作用的影响。 相似文献
998.
异质性荧光染色的巨噬细胞功能研究I.异质性荧光染色的巨噬细胞吞噬活性 总被引:1,自引:1,他引:0
利用淀粉多糖和免疫促进剂(白喉类毒素和卡介苗)诱导和活化小鼠腹腔巨噬细胞,观察了四种异质性荧光染色的巨噬细胞非特异性和特异性吞噬活性。实验证明,深蓝色和淡蓝色荧光的巨噬细胞是分化程度低的幼稚细胞,非特异性吞噬功能较弱,但在特异性吞噬过程中呈现了活跃的吞噬活性,特别是在免疫促进剂的活化下,它们的特异性吞噬功能显著增强、淡蓝绿色荧光的巨噬细胞是分化程度较高、非特异性和特异性吞噬功能最旺盛的巨噬细胞,而黄色荧光的巨噬细胞是分化程度最高、特异性吞噬功能较减退的巨噬细胞。 相似文献
999.
草鱼出血病病毒多肽的荧光染色 总被引:1,自引:0,他引:1
将草鱼出血病病毒(GrassCarpHemorrhageVirus,GCHV)置于还原性的溶液中,然后加入等体积的NaHCO3配制的异硫氰酸荧光索溶液进行多肽的标记,再经SDS-PAGE分析,在紫外灯下即可检测到GCHV全部的11个结构多肽的荧光带。该方法最小检测量为500ng,由该方法回收的多肽具有抗原活性,可作为抗原进行免疫学实验。 相似文献
1000.
高效价甘薯羽状斑驳病毒抗血清的制备 总被引:6,自引:0,他引:6
用嫁接方法将甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)接种到I.setosa上扩繁,以0.2mol/LpH7.2PBK缓冲液、垫层差速离心、蔗糖密度梯度离心提取纯化SPFMV。纯化的SPFMVOD260/280的比值为1.25。将纯化的SPFMV免疫家兔制备抗血清,在环状沉淀和微量沉淀试验中,用提纯病毒测定抗血清的效价均为1:4096;以SPFMV-IgG为第一抗体,应用Dot-ELISA对甘薯和I.selosa叶片中的SPFMV分别作了测定。 相似文献