基于四环素调控系统的ApoE-rtTA/TRE-HCV-C双转基因小鼠的制备

目的为了丰富现有的四环素调控系统的小鼠资源库,同时也为更好地研究目的基因HCV-C的作用机制提供一个活体的动物模型,制备基于四环素调控系统原理的调控部分ApoE-rtTA的转基因小鼠,与反应部分TRE-HCV-C转基因小鼠,相互交配制作出双转基因小鼠。方法应用显微注射法将构建好的两种基因片段ApoE-rtTA及TRE-HCV-C分别注入超排的昆明母鼠的受精卵,再植入假母输卵管,出生动物及其后代经PCR初步筛选出阳性,将两者及阳性后代交配产生携带5只转基因鼠再经Western blot和RT-PCR在RNA和蛋白水平上进一步鉴定。结果产生了3只整合有ApoE-rtTA基因的首见鼠和125只阳性子代,以及产生了5只整合有TRE-HCV-C基因的首见鼠和16只阳性子代。PCR及Southern Blot证实上述阳性鼠确有转基因整合。将两者交配产生携带5只双转基因鼠。结论成功制备了携带有ApoE-rtTA及TRE-HCV-C转基因小鼠,建立了分别携带有这两种基因的鼠群,以及同时携带有两种基因的双转基因小鼠,为四环素调控系统提供了一个良好的通用型的调控动物模型,同时也可利用四环素调控系统来研究HCV中的C基因对小鼠的作用,也是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具。     

葫芦岛地区东亚飞蝗体内的汞含量及分布

通过调查葫芦岛地区东亚飞蝗（Locusta migratoria manilensis）体内的Hg浓度,研究了Hg在其不同器官中的含量与分布。结果表明：葫芦岛地区东亚飞蝗体内的Hg浓度较高,Hg含量范围为0．33～174．86ng·g^-1,平均值为36．44ng·g^-1;东亚飞蝗体内总Hg及不同器官中总汞浓度均与体长、体质量呈显著的负相关;东亚飞蝗不同器官中的总Hg浓度为翅膀〉头〉腹〉胸≈足;随着飞蝗体质量增加,飞蝗体内绝对Hg含量增大,但生物量稀释作用使飞蝗体内总Hg浓度降低。Hg主要累积在飞蝗的翅膀和头部。生物量稀释作用及将Hg累积到翅膀中可能是东亚飞蝗抵御Hg危害的重要机制。     

拟南芥乙烯信号转导机理的遗传学和化学生物学研究

乙烯信号途径的建立得益于一系列的突变体研究,EIN3是乙烯信号转导通路的核心转录因子,EIN3的蛋白质含量严格受F-BOX蛋白EBF1/EBF2的降解调控。为了进一步挖掘乙烯信号途径的新组分和深入研究EIN3及其下游的信号组分,作者筛选了四个不同来源的T-DNA库,并利用转基因植物EIN3ox作为遗传背景,进行了EIN3下游的抑制子筛选工作,还利用化学遗传学的方法筛选了四个小分子库。     

18β-甘草次酸对Wistar大鼠脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接的影响

目的：探讨18β-甘草次酸对Wistar大鼠脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接的影响,为寻求强效和可逆的缝隙连接阻断剂提供实验依据。方法：去除脑微动脉段外层结缔组织后,应用全细胞膜片钳技术,观察不同种类的缝隙连接阻断剂对Wistar大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞膜电容（Cinput）、膜电导（Ginput）和膜电阻（Rinput）的影响。结果：（1）Wistar大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞Cinput高于消化分离的单个平滑肌细胞。（2）18β-甘草次酸（18pGA）能浓度依赖性的抑制Wistar大鼠脑动脉平滑肌细胞间的缝隙连接,IC50分别为2．0μM。当18βGA100μM时,Wistar大鼠脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput、Ginput或Rinput与单个平滑肌细胞十分接近。结论：1813GA可以浓度依赖性的抑制Wistar大鼠脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接。     

唇腺活检、自身抗体在干燥综合征诊断中的意义

目的:探讨干燥综合征(ss)患者的唇腺活检病理表现、自身抗体及其在诊断中的意义。方法:收集85例干燥综合征患者的临床体征、唇腺活检以及其他相关辅助检查,对其唇腺活检病理标本及相关检查进行分析。结果:根据唇腺病理结果,单纯唇腺活检的阳性率为68.2%;单纯血清抗SSA/SSB抗体检出阳性率为78.8%;联合唇腺活检、抗SSA/SSB抗体疾病检出率达94.1%,与单纯唇腺活检或抗SSA/SSB抗体单项阳性的疾病检出率有统计学意义(P0.05);并且唇腺活检阳性患者较阴性患者口干或眼干持续时间长(P0.05);但腮腺ECT异常、关节肿痛、肺脏损害均较唇腺活检阴性组患者累及率高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:唇腺活检、自身抗体是诊断干燥综合征的必要检查,而其联合应用更具有举足轻重的意义。     

抗肺炎支原体卵黄抗体的制备及其免疫特性

目的制备抗肺炎支原体卵黄抗体,并研究其免疫特异性。方法以超声粉碎法制备肺炎支原体抗原;以ELISA法测定卵黄抗体的效价及免疫特异性;以水稀释法联合疏水层析的方法分离纯化卵黄抗体;应用SDS-PAGE法测定分子量及鉴定抗体纯度;改良Lowry法测定蛋白含量。结果低、高剂量组均诱导母鸡产生有效免疫应答,高剂量组免疫效价高于低剂量组。高剂量组于初免疫后约50d抗体效价达高峰,持续约2个月;而低剂量组在初免疫后约60d抗体效价达高峰,持续约1个月。之后效价逐渐下降,在免疫约120d,高剂量组由13log2下降到10log2;而低剂量组则由11log2下降到7log2。以水稀释法联合疏水层析法制备了电泳纯抗肺炎支原体IgY,分子量约178KD,平均每1ml卵黄液可获得较纯抗体6.4mg。制备的IgY与肺炎支原体具有较高特异性,与解脲支原体和人型支原体无明显交叉反应,与生殖支原体有轻度的交叉反应。结论本研究初步制备了抗肺炎支原体卵黄抗体,为肺炎支原体的防治与检测提供新的途径。     

福建省3个植物新记录

报道福建省植物分布新记录3种(亚种),即浙赣车前紫草Sinojohnstonia chekiangensis、显脉山绿豆Desmodium heterocarpon subsp. angustifolium、鼎湖耳草Hedyotis effusa。其中,车前紫草属Sinojohnstonia为福建新记录属。     

澳门松山公园树木健康评估

通过调查样带中树木病虫危害和藤本植物危害等指标,对澳门松山公园树木健康状况进行了评估.结果表明,本次调杳的6个样带中,2/3的样带处于生长较差状态;所调杏的900株树木中,不健康树木涉及20科23属32种,占所调查树木的18.9%.这说明整个松山公园的树木生长较差.提出维护树木健康的建议:(1)尽快研究找出树木病虫害发病机制,切断病害传播途径,彻底消除病虫害;(2)加紧对入侵植物和土著危害藤本的防治;(3)加强景观改造和植被恢复的力度,构建健康的森林群落结构;(4)建立松山公园树木健康预警机制,对树木健康动态进行长期监控.     

噬菌体展示技术的原理和方法

噬菌体展示(Phage display)最早是由George开始于 1 985年1.最先构建的噬菌体多肽或抗体展示文库则始于 1990年2,3.由此,噬菌体展示技术进入了一个飞速发展的时期。噬菌体展示的基本概念是将外源蛋白质或多肽的基因表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,并在其表面展示,同时将其遗传密码信息整合到个体噬菌体的基因组中。这个技术的最大优点是直接将可现的表达型与其基因型联系在一起,再利用其配体的特异性亲和力,将所感兴趣的蛋白质或多肽挑选出来。       

大鼠脑组织中胆囊收缩素基因表达与发育的关系

研究CCK基因在不同日龄大鼠脑中转录水平上的表达。取出生后不同日龄Wistar大鼠脑组织,提取总RNA,甲醛凝胶电泳,Northern印迹与α-32P标记CCKcDNA的探针杂交,放射自显影后,经激光扫描测定自显影图中斑点光密度,以估量CCKmRNA表达的相对水平。结果表明,刚出生的大鼠脑中CCK的mRNA含量甚低,随着鼠龄增长,浓度增高,20日龄时CCKmRNA浓度急剧升高,40日龄CCKmRNA的水平稍降低。CCK基因在转录水平的表达与个体发育有关。 Abstract：In this paper the clone was used as probe to study its expression for revealing the relationship between the level of CCK mRNA and the brain development.Total RNA from Wistar rats of various stages of development was isolated by acid guanidinium-thiocyanate phenol-chloroform extraction,followed by formaldehyde gel-electrophoresis.Northern blot,hybridization with a32P-labeled CCK cDNA probe,autoradiography and quantitation were performed by the laser density scanning.It was concluded from the results that the quantites of CCK mRNA in rat brain increased during development.From those mentioned above,it can be said that brain CCK mRNA may serve as a marker for the brain development.