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Deletion mapping of the rotavirus metalloprotein NS53 (NSP1): the conserved cysteine-rich region is essential for virus-specific RNA binding. 总被引:9,自引:7,他引:2 下载免费PDF全文
NS53 (NSP1), the gene 5 product of the group A rotaviruses, is a minor nonstructural protein of 486 to 495 amino acids which binds zinc and contains an amino-terminal highly conserved cysteine-rich region that may form one or two zinc fingers. To study the structure-function of the gene 5 product, wild-type and mutant forms of NS53 were produced by using a recombinant baculovirus expression system and a recombinant vaccinia virus/T7 (vTF7-3) expression system. Analysis of the RNA-binding activity of the wild-type NS53 immobilized onto protein A-Sepharose beads with NS53-specific antiserum showed that the protein exhibited specific affinity for all 11 rotavirus mRNAs. The use of short virus-specific RNA probes indicated that NS53 specifically recognizes an element located near the 5' ends of viral mRNAs. Analysis of the RNA-binding activity of deletion mutants of NS53 showed that the RNA-binding domain resides within the first 81 amino acids of the protein and that the highly conserved cysteine-rich region within this region of the protein is essential for the activity. Gel electrophoresis and Western immunoblot analyses of intracellular fractions derived from infected cells revealed that large amounts of NS53 were present in the cytosol and in association with the cytoskeletal matrix. Indirect immunofluorescence analysis of cells programmed to transiently express mutant forms of NS53 using vTF7-3 indicated that the intracellular localization domain resides between amino acids 84 and 176 of NS53. Together, these data show that the RNA-binding domain and the intracellular localization domain lie upstream from the region of NS53 previously determined not to be essential for replication of rotaviruses in cell culture (J. Hua and J. T. Patton, Virology 198:567-576, 1994). 相似文献
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马蹄香大小孢子发生及雌雄配子体形成 总被引:1,自引:0,他引:1
马蹄香(Sarumahenryi,Oliv.)花药壁的发育属双子叶型。花粉母细胞减数分裂为同时型,四分体主要为四面体形,少数为左右对称式排列。腺质绒毡层,其细胞可排列为不规则的两层,双核或多核。到单细胞花粉阶段,绒毡层细胞内切向壁上出现许多乌氏体。成熟花粉为2细胞型,圆球状,具单萌发沟。雌蕊6心皮,上部彼此分离、下部联合。倒生胚珠,双珠被,厚球心。胚囊发育蓼型。成熟胚囊为七细胞结构,但两个助细胞退化较早。 相似文献
35.
36.
细胞间粘附分子1的研究进展 总被引:11,自引:0,他引:11
细胞间粘附分子1(ICAM-1),又名CD54,是一种重要的细胞表面粘附分子,属免疫球蛋白超家族.它可与鼻病毒以及整合素家族成员结合,参与炎症,普通感冒,变态反应及移植排斥反应.文章就其细胞分布、表达调节、结构功能、基因工程以及临床应用进行了综述. 相似文献
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38.
用吸收光谱和圆二色谱的方法研究了蜂毒素与嗜血菌紫膜的相互作用机理.通过与三种在结构和电荷上不同的表面活性剂与紫膜的作用相比较,可以年出蜂毒作为带正电荷的分子与同样带正电的表面活性剂DTAB在引起紫膜凝聚方面表现相同;但在对紫膜可见光区的吸收光谱和圆二色谱的影响上却与具有刚性结构的CHAPS相似,表明蜂毒可在紫膜表面以一种刚性较大的构象(如α螺旋)存在,不能进入膜蛋白流水区的深层.另外,从紫膜-Triton-蜂毒混合作用体系的研究中得到如下推测:蜂毒与Triton竞争菌紫质分子周围的结合位点,可排斥位于菌紫质周围的Triton分子.表明蜂毒具有比Triton更强的与菌紫质的亲和力,从而提供了支持蜂毒分子存在与膜蛋白-菌紫质的直接相互作用的有力证据. 相似文献
39.
促进兴安落叶松天然更新的出苗条件研究 总被引:7,自引:0,他引:7
根据40多块标准地调查,促进更新措施后兴安落叶松1年生幼苗出现的频度及数量与种子年关系很大,幼苗更新效果最好的是种子年当年,更新频度可达60%以上,幼苗平均为1.0—2.0×103株·ha-1,其他年份促进的效果较差.同时,也与迹地类型、种源状况和整地质量关系较大.一般在山坡中、下部,土壤湿润的杜香落叶松和藓类越桔落叶松林迹地促进效果较好,其更新频度为60—70%.绝大部分更新幼苗出现在表土裸露、无杂草灌木、土壤湿润的地方.更新频度与植被盖度呈明显的衰减指数相关.促进地块距下种林墙最好不超过60m范围. 相似文献
40.
Addition of polyamines or their analogs to newly confluent LLC-PK1 cells resulted in down-regulation of Na+-glucose transport (symport) activity. Polyamines prevented the induction of this symporter by the differentiation inducer hexamethylene bisacetamide (HMBA) but did not influence induction by the phosphodiesterase inhibitor 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX). Partial depletion of endogenous polyamines after addition of α -difluoromethylornithine (DFMO) resulted in a 4 to 5-fold increase in symporter expression. Symporter induction by either HMBA or DFMO was inhibited by the protein kinase inhibitor H-7 but H-7 did not affect symporter induction by IBMX. Changes in symporter activity were accompanied by changes in levels of the 75 kD symporter subunit detected by Western blot. Cultures exposed to HMBA exhibited reduced levels of ornithine decarboxylase activity. Our results suggest that induction of symporter expression by HMBA may be mediated in part by its effects on polymine metabolism, and point to parallel roles of polyamines and cyclic AMP in regulating the expression of this physiologically important renal transport system. © 1993 Wiley-Liss, Inc. 相似文献