Map locations of mouse hepatitis virus temperature-sensitive mutants: confirmation of variable rates of recombination.

Using standard genetic recombination techniques, studies in our laboratory suggest that recombination rates are very high and vary in different portions of the mouse hepatitis virus (MHV) genome. To determine the actual recombination frequencies in the MHV genome and localize the nucleotide boundaries of individual viral genes, we have sequenced temperature-sensitive and revertant viruses to identify the location of specific mutant alleles. Complementation group F RNA+ ts mutants (LA7, NC6, and NC16) each contained a unique mutation which was tightly linked to the ts phenotype and resulted in a conservative or nonconservative amino acid change in the MHV S glycoprotein gene. In agreement with previous recombination mapping studies, the mutation in LA7 and NC6 mapped within the S1 domain while NC16 mapped within the S2 domain. To determine the map coordinates of the MHV polymerase genes, several RNA- mutants and their revertants belonging to complementation groups C (NC3 and LA9) and E (LA18 and NC4) were also sequenced. Mutations were identified in each virus that were tightly linked to the ts phenotype and resulted in either a conservative or nonconservative amino acid change. The group C allele spanned the ORF 1a/ORF 1b junction, while the group E mutants mapped at the C terminus of ORF 1b about 20 to 22 kb from the 5' end of the genome. Mutation rates, calculated from the reversion frequencies of plaque-purified ts viruses requiring a single nucleotide alteration for reversion, approached 1.32 (+/- 0.89) x 10(-4) substitutions per nucleotide site per round of template copying. Detailed recombination mapping studies across known distances between these different ts alleles has confirmed that homologous recombination rates approached 25% and varied within different portions of the MHV genome.     

从水稻根部悬浮培养细胞分离原生质体及植株再生

以长香稻(Oryza sativa L．)(糯稻)的幼嫩种子根为材料,在Ms和N6培养基上诱导产生结构松软而分散的愈伤组织,经过AA液体培养基振荡悬浮培养,悬浮培养细胞经酶解后得到了活性较高的原生质体,试验结果表明这是分离原生质体较理想的材料。在附加2,4-D lmg／L(以下单位同)、KT(激动素)0．2、各氨酰胺876、天门冬酰胺266的Ms琼脂糖培养基中,诱导出了大量愈伤组织,在含KT2、NAA(α-萘乙酸)0．2、zT(玉米素)0．2、cH(水解酪蛋白)1000和4％椰子汁的N6培养基中成功地诱导出了由原生质体再生的植株。当代原生质体再生植株能正常开花、结实、产生种子;染色体数均为二倍性(2n＝24),最显著的特点是结实率低,穗粒数减步、生育期延迟。     

基因工程链激酶(r—SK)纯化及其单克隆抗体制备和鉴定

采用Rotofor等电聚焦和分子筛技术纯化大肠杆菌表达的重组链激酶(r—SK),其纯度为97%。比活性1×10⁶IU／mg,回收率41％。分析所纯化的r—SK　N端氨基酸顺序证实其1—15个氨基酸顺序与SK基因的核苷酸顺序所示3联密码子一致。以纯化r—SK为抗原,通过杂交瘤技术构建了分泌抗r—SK单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞(4D11),该McAb属IgG1亚型．特异地作用于r-SK和C组口溶血性链球菌分泌的SK。用底物显色法测定该McAb可抑制SK对纤溶酶原的激活。Western blot法证实该McAb能识别分子量为16 250Da的r—SK的CNBr裂解片段。推测SK蛋白中第71残基至第237残基间的氨基酸顺序参与SK与纤溶酶原的结合。     

银杏授粉研究初报

本文报道银杏授粉的适宜品种,气候条件、不同时期、方法、浓度、雌花不同发育阶段等试验结果．为提高银杏的座果率提供有效的技术措施。     

银杏扦插繁殖试验

本文报道银杏扦插繁殖技术。采用不同插穗、机械处理、不同激素及浓度处理进行扦插繁殖试验．扦插成活率可达９０—１００％。     

边界层阻力在叶片气体交换过程中的作用

作者对现有的气体交换法的叶室作了改进。从实验上检验了作者根据电学类比分析和模拟检验得到的结论：在已有的气体交换测定装置中,空气流速不变,叶片的边界层导度也固定不变,所得到的结论用于边界层导度变化的情形时,会造成比较大的误差。现加一障碍物使得流过叶片的风速减小,从而改变叶片的边界层导度。通过测量在不同边界层导度下同一叶片的光强曲线可以考察不同边界层导度下的气孔导度、光合速率、蒸腾速率以及它们之间的相互关系。实验结果与作者以前的电学类比分析和模拟得到的结论是基本一致的     

沈阳西部污灌水中有机污染物的分析

沈阳西部污灌水中有机污染物的分析刘海玲,张丽珊,姚家彪,于殿臣,朱岩,可夫,姜萍（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＯｒｇａｎｉｃＰｏｌｌｕｔａｎｔｓｉｎＩｒｒｉｇａｔｅｄｓｅｗａｇｅＩｎＷｅｓｔｅｒｎＳｈｅｎｙａｎｇ．...     

RGDS肽对大鼠主动脉球囊内膜剥脱后血管壁增殖的影响

在大鼠主动脉球囊内膜剥脱术后血管壁细胞过度增殖模型上,用合成的血小板膜纤维蛋白原受体（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎⅡｂ／Ⅲａｃｏｍｐｌｅｘ,ＧＰⅡｂ／Ⅲａ）拮抗剂ＲＧＤＳ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ,５０μｍｏｌ·ｋｇ－１·ｄ－１）治疗可有效地抑制损伤血管壁的细胞计数增加和内膜增厚以及血管平滑肌细胞增殖,显著降低其血管组织３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－Ｌｅｕ的参入增加程度。实验结果提示ＲＧＤＳ肽作为血管成型术的辅佐剂,对于防治血管再狭窄可能具有潜在的临床应用前景。     

河南木兰属9种植物过氧化物同工酶分析

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,测定了河南木兰属8种、1变种50多份的成熟叶片材料的过氧化物同工酶酶谱。测定结果表明,该属植物9种、变种的酶谱均有差异性,每种、变种均有特征酶谱,种间酶谱显著大于种内酶谱,根据其酶谱差异性,可以进行生物种、变种的鉴别和良种的选择。为免除其酶带Rf单一指标,鉴别生物种、变种可能出现的问题,作者创立了"酶谱多指标综合判断距离法"分析技术,首次将该属植物种、变种酶谱的酶带数目、Rf、酶带宽度及其活性强弱4个因子的差异性,进行编码联机、电脑运算分析,其结果与该属玉兰亚属内的玉兰派和辛夷派的形态分类相吻合。但是,从酶学观点不支持椭圆叶玉兰作为独立种的存在,以作为河南玉兰的变种为宜,也不支持河南玉兰派和腋花玉兰派的成立,以并入辛夷派为佳。