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61.
多数重要的功能基因属于多基因家族,这些家族成员间存在功能冗余,高效的多基因干扰体系对研究多基因家族成员的生物学功能及其分子调控机制具有重要意义。对pCAMBIA1301载体改造,构建了适用于植物的多基因干扰体系pCAMBIA1301m和pCAMBIA1301s。使用该多基因干扰体系构建了四基因的干扰载体pCAMBIA1301m:35S∷SlPP2C1-2-3-4,4个目标基因为来源于番茄PP2C家族A组的PP2C1、PP2C2、PP2C3和PP2C4,并通过遗传转化导入番茄,用GUS染色和PCR检测转基因阳性植株,再利用RT-qPCR技术检测T1和T2代转基因植株中目标基因的干扰效率,用T2代种子分析转基因番茄对ABA敏感性。结果表明,应用该干扰体系成功获得了四基因干扰的转基因植株35S∷SlPP2C1-2-3-4。在转基因番茄中4个目标基因的表达量显著低于野生型,其干扰效率均高于70%,转基因番茄种子萌发具有强烈的ABA不敏感性。多基因干扰体系能高效地同时沉默多个目标基因。 相似文献
62.
63.
Chang-Fa Lin Chun Wei Li-Zhi Jiang Ke-Gui Li Xiao-Yin Qian Kotb Attia Jin-Shui Yang 《DNA sequence》2004,15(4):269-276
Suppression subtractive hybridization was carried out to enrich gene fragments over-expressed in rice leaves by subtraction to rice roots, from which two identical cDNA fragments were identified to encode putative phosphoenolpyruvate carboxylase. Then the corresponding full-length cDNA (Osppc) is isolated by RT-PCR and sequenced, which indicates an open reading frame of 2895bp is contained. Its deduced protein is encoded in 10 exons and shows high similarity to many other plant PEPCs. Comparing with maize and bacterial PEPCs, it is revealed that OSPPC shares many conserved domains and active sites that responsible for the structure, activity and regulation of this enzyme. Phylogenetic analysis demonstrates that OSPPC is grouped with C3 form PEPCs of wheat, maize and sorghum, which is consistent with the classification of rice. And a putative promoter element is predicted with DOF binding box, CAAT box and TATA box in the 5'-flanking sequence of Osppc gene. Moreover, Quantitative RT-PCR analyses are performed in hybrid rice and its parents, which show that Osppc is specifically expressed in leaf including leaf vein and sheath. 相似文献
64.
65.
紫米基因与RFLP标记的连锁分析 总被引:12,自引:0,他引:12
选用种皮呈紫黑色的水稻体细胞无性系变异体黑珍米和其种皮呈无色的原始亲本Basmati370配制组合,同时应用121个DNA探针检测了黑珍米与Basmati370之间的RFLP。应用F2和F3群体研究了紫色种皮的遗传控制。结果表明,有一个显性主效基因控制着黑珍米和Basmati370在种皮颜色上的差异。通过多态性DNA探针与种皮颜色的共分离分析,发现该基因与水稻第四染色体上的DNA标记RG329和RG214连锁,与RG329和RG214的遗传图距分别为18.9cM和26.3cM。 相似文献
66.
67.
哺乳动物透明带糖蛋白及其生物活性 总被引:1,自引:0,他引:1
透明带在哺乳动物的受精过程中发挥着重要作用,透明带化学成分及其生物活性的研究对于了解精卵识别、顶体反应的诱导等过程的分子机理具有重要意义.近10年来的研究表明透明带主要由糖蛋白(ZPGPs)组成,是在细胞质内合成后转移至透明带的.大多数动物的ZPGPs为4~5种,不同种类动物的ZPGPs的氨基酸序列存在高度同源性.在受精过程中,ZPGPs具有精子受体和诱导顶体反应的双重作用,ZPGPs含有N-连接和O-连接寡聚糖,这些寡糖链是ZPGPs行使生物活性不可缺少的部分. 相似文献
68.
69.
Qian Shi Pascal Verdier-Pinard Arnold Brossi Ernest Hamel Kuo-Hsiung Lee 《Bioorganic & medicinal chemistry》1997,5(12):2277-2282
(+)-Thiocolchicine (2b) was prepared from (±)-colchicine (1) in a five-step reaction sequence that included chromatographic separation of appropriate camphanylated diastereomers. Acid hydrolysis of the (+)-diastereomer, followed by acetylation, yielded the desired product 2b. (+)-Thiocolchicine has 15-fold lower inhibitory activity against tubulin polymerization than (−)-thiocolchicine, and is 29-fold less potent for inhibiting growth of human Burkitt lymphoma cells. The enantiomer 2a, prepared from the (−)-camphanylated diastereomer, had potent activity in all assays comparable to that of (−)-thiocolchicine prepared by other methods. These results support the hypothesis that the proper configuration of colchicine-related compounds is an important requirement for their anti-tubulin action. 相似文献
70.