首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   14743篇
  免费   1537篇
  国内免费   1509篇
  2024年   34篇
  2023年   195篇
  2022年   475篇
  2021年   833篇
  2020年   613篇
  2019年   771篇
  2018年   765篇
  2017年   552篇
  2016年   738篇
  2015年   930篇
  2014年   1137篇
  2013年   1130篇
  2012年   1329篇
  2011年   1216篇
  2010年   723篇
  2009年   699篇
  2008年   753篇
  2007年   652篇
  2006年   519篇
  2005年   468篇
  2004年   485篇
  2003年   494篇
  2002年   440篇
  2001年   376篇
  2000年   285篇
  1999年   238篇
  1998年   155篇
  1997年   116篇
  1996年   121篇
  1995年   75篇
  1994年   79篇
  1993年   61篇
  1992年   59篇
  1991年   64篇
  1990年   52篇
  1989年   34篇
  1988年   30篇
  1987年   27篇
  1986年   18篇
  1985年   24篇
  1984年   5篇
  1983年   6篇
  1982年   5篇
  1981年   4篇
  1980年   2篇
  1979年   1篇
  1950年   1篇
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
111.
将诱变的αCD3杂交瘤(TK~-)与PD4杂交瘤(HGPRT~-)融合,获得分泌双功能抗体(BsAb)的四体杂交瘤C3.BsAbC3可分别与CD3分子及胃癌相关抗原P40反应.体外杀伤试验证实,当效靶比为40:1,BsAbC3浓度为1mg/L时,其杀伤效应可达77.6%.该杀伤效应具有明显的特异性,仅P40阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后5d,以BsAbC3活化的外周血淋巴细胞(PBLs)经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退(5/5).这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考.  相似文献   
112.
旱地玉米农田棵间蒸发研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用中子微区模拟装置测量旱地玉农田棵间蒸发,实验表明,本实验装置实用可行。晋西棵间蒸发量占降水量(510nm)的55%以上,棵间蒸发与蒸散的比值同时叶面积指数呈反相关,玉米产量与作物蒸腾呈正相关。  相似文献   
113.
Cysteine sulfinic acid decarboxylase (CSAD), the rate-limiting enzyme in taurine biosynthesis, appears to be present in the brain in multiple isoforms. Two distinct forms of CSAD, referred to as CSAD I and CSAD II, were obtained on Sephadex G-100 column. CSAD I and CSAD II differ in (1) the elution profile on Sephadex G-100 column; (2) the sensitivity towards Mn2+, methione, and other sulfur-containing amino acids and (3) their immunologic properties. CSAD II has been purified to about 2,500-fold by a combination of column chromatographies and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). The purity of the enzyme preparation was established as judged from the following observations: (1) a single protein band was observed under various electrophoretic conditions, e.g., 5–20% nondenaturing PAGE, 7% nondenaturing PAGE and 10% SDS-PAGE and (2) in nondenaturing PAGE, the protein band comigrated with CSAD activity. CSAD II has a molecular weight of 90 kDa and is a homodimer consisting of two 43 ± 2 kDa subunits. CSAD appears to require Mn2+ for its maximum activity. Other divalent cations fail to replace Mn2+ in activation of CSAD activity. However, the precise role of Mn2+ in the action of CSAD remains to be determined.  相似文献   
114.
远交系小鼠胚胎干细胞系的建立及嵌合鼠的获得   总被引:2,自引:0,他引:2  
ES细胞(EmbryonicStemCells)是来源于小鼠早期胚胎的多潜能干细胞,它可以在体外大量培养。并以单细胞的形式注射到早期胚胎里,发育为嵌合体。到目前为止,通常使用的129小鼠品系是来源于近交系(inbred)小鼠的胚胎.与之相比,远交系小鼠应当具有较强的生命力和抗病能力。曾有人报道过建成了远交系小鼠胚胎干细胞系,但是尚没有见到获得嵌合鼠的报道。有人甚至认为:由于不同品系小鼠所具有的遗传背景不同,有的小鼠不能建成ES细胞系。最近,本实验室在这方面做了有益的探索,成功地建成了远交系小鼠胚胎干细胞系,并在这里报导首例用远交系小鼠胚胎干细胞系培育成功嵌合体小鼠。采用源于Swiss小鼠远交群的昆明(KM)品系小鼠囊胚建成了三个小鼠胚胎干细胞系(KE1.KE2.KE5)。核型正常率均达到70%以上。自第八代起分批冻存,复苏后,培养至第12代,消化成单细胞,通过囊胚显微注射,将其注射到615品系小鼠胚胎。在幸存的幼鼠中获得了一只来源于KE1细胞的嵌合鼠(Table1).其毛色表现为受体鼠(615)的白色中嵌合有供体鼠(KM)的黑褐色(PlateI-A).嵌合鼠与受体鼠的杂交后代鼠中仍然出现了受体鼠的毛色类型(  相似文献   
115.
The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and HIV-2 Vpr and Vpx proteins are packaged into virions through virus type-specific interactions with the Gag polyprotein precursor. To examine whether HIV-1 Vpr (Vpr1) and HIV-2 Vpx (Vpx2) could be used to target foreign proteins to the HIV particle, their open reading frames were fused in frame with genes encoding the bacterial staphylococcal nuclease (SN), an enzymatically inactive mutant of SN (SN*), and chloramphenicol acetyltransferase (CAT). Transient expression in a T7-based vaccinia virus system demonstrated the synthesis of appropriately sized Vpr1-SN/SN* and Vpx2-SN/SN* fusion proteins which, when coexpressed with their cognate p55Gag protein, were efficiently incorporated into virus-like particles. Packaging of the fusion proteins was dependent on virus type-specific determinants, as previously seen with wild-type Vpr and Vpx proteins. Particle-associated Vpr1-SN and Vpx2-SN fusion proteins were enzymatically active, as determined by in vitro digestion of lambda phage DNA. To determine whether functional Vpr1 and Vpx2 fusion proteins could be targeted to HIV particles, the gene fusions were cloned into an HIV-2 long terminal repeat/Rev response element-regulated expression vector and cotransfected with wild-type HIV-1 and HIV-2 proviruses. Western blot (immunoblot) analysis of sucrose gradient-purified virions revealed that both Vpr1 and Vpx2 fusion proteins were efficiently packaged regardless of whether SN, SN*, or CAT was used as the C-terminal fusion partner. Moreover, the fusion proteins remained enzymatically active and were packaged in the presence of wild-type Vpr and Vpx proteins. Interestingly, virions also contained smaller proteins that reacted with antibodies specific for the accessory proteins as well as SN and CAT fusion partners. Since similar proteins were absent from Gag-derived virus-like particles and from virions propagated in the presence of an HIV protease inhibitor, they must represent cleavage products produced by the viral protease. Taken together, these results demonstrate that Vpr and Vpx can be used to target functional proteins, including potentially deleterious enzymes, to the human or simian immunodeficiency virus particle. These properties may be exploitable for studies of HIV particle assembly and maturation and for the development of novel antiviral strategies.  相似文献   
116.
phbB,phbC基因克隆,序列分析及植物表达载体的构建   总被引:11,自引:0,他引:11  
利用聚合酶链式反应技术,从真养产碱杆菌Alcaligenes eutrophus H16染色体DNA中的主增并克隆了调控聚-β-羧基丁酸生物合成的两个关键酶基因;依赖NADPH的乙酰乙酰CoA还原酶基因和PHB合成酶基因。限制性内切酶图谱和核苷酸序列分析证实了克隆结果,并表明所克隆的基因与国外报道的有很高的同源性。  相似文献   
117.
四个籼稻(Oryza sativa L.)品种幼苗经1℃黑暗或光照250 μm ol·m - 2·s- 1处理后,抗冷的“桂山矮选3”比不抗冷的“青华6 号”幼苗存活率高,其子代是以“桂山矮选3”为母本的比“青华6 号”为母本的存活率较高。抽穗期剑叶经光照低温处理12、24 和36 h 后,光合作用是“桂山矮选3”和以“桂山矮选3”为母本的子代比“青华6 号”和以“青华6 号”为母本的子代下降较少。呼吸作用是前者比后者在处理12 h 时有明显升高现象。荧光参数Fv/Fo和Fv/Fm比值在处理24 h 时前者比后者下降明显,但在常温下恢复则是前者比后者明显较快。自然低温(寒露风)对叶绿素荧光的影响亦有相似的规律。对水稻后代的抗冷性倾向于母本进行了讨论  相似文献   
118.
菜豆热激蛋白在生物膜上的定位   总被引:8,自引:0,他引:8  
选用菜豆 Phaseolus vulgris L. 下胚轴 ,运用35S- Met标记放射自显影和二维电泳技术 ,研究热激蛋白 HSPs 的表达和在生物膜组分中的定位 .实验结果表明 ,盐溶蛋白中主要HSPs为 70 k D HSPs和小分子量 HSPs,而小分子量组 HSPs大量富集在质膜和液泡膜组分中 .  相似文献   
119.
棒状类细菌电击转化中多种条件对转化效率的影响   总被引:9,自引:0,他引:9  
以质粒PXZl0145电击转化不同棒状类细菌菌株,研究了影响电击转化效率的诸个因素,在含4%甘氨酸的培养基中生长至对数前期的菌体最适用于电击转化,当以同源DNA进行电击转化时,1.μgDNA中转化效率最高可达到8×1O6转化子,但用异源DNA时,转化效率要比前者低102~103倍。  相似文献   
120.
复合酶制剂EA-2对鲤生长的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
利用复合酶制剂EA-2在池溏中饲养鲤50d,实验组鲤尾增重率高于对照组12.3—27.5%,而饲料系数低于对照组18.76—10.89%。实验组鲤肝胰脏淀粉酶活力显著增加,而肝、胰脏蛋白酶活力显著降低,实验组鲤肠内蛋白酶活力和淀粉酶活力均显著增加。酶制剂对鲤肥满度、肝胰比、内脏比、肝胰脏和背部肌肉的生化成份均无显著影响。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号