首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   30029篇
  免费   2822篇
  国内免费   3096篇
  35947篇
  2024年   99篇
  2023年   459篇
  2022年   1070篇
  2021年   1716篇
  2020年   1222篇
  2019年   1492篇
  2018年   1431篇
  2017年   1072篇
  2016年   1443篇
  2015年   1943篇
  2014年   2389篇
  2013年   2327篇
  2012年   2794篇
  2011年   2550篇
  2010年   1527篇
  2009年   1419篇
  2008年   1593篇
  2007年   1372篇
  2006年   1046篇
  2005年   920篇
  2004年   871篇
  2003年   829篇
  2002年   740篇
  2001年   592篇
  2000年   478篇
  1999年   405篇
  1998年   267篇
  1997年   219篇
  1996年   224篇
  1995年   155篇
  1994年   165篇
  1993年   123篇
  1992年   139篇
  1991年   145篇
  1990年   111篇
  1989年   79篇
  1988年   74篇
  1987年   58篇
  1986年   61篇
  1985年   66篇
  1984年   29篇
  1983年   38篇
  1982年   24篇
  1981年   13篇
  1980年   23篇
  1979年   15篇
  1978年   14篇
  1975年   13篇
  1974年   14篇
  1973年   14篇
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 0 毫秒
101.
分析了北京鹫峰山区侧柏、荆条枝条水及其潜在水分来源的氢氧同位素特征,运用IsoSource模型解析侧柏、荆条系统水分利用来源的季节变化及其对降雨事件的响应.结果表明:旱季初期(4月)研究区0~20 cm土层富集土壤水18O值,20 cm以下该值则随着土层深度增加逐渐减小,侧柏主要利用前2~3 d降雨补充的0~30 cm层土壤水;旱季末期(6月)侧柏和荆条分别利用当天雨水补充的0~10和10~30 cm层土壤水;雨季(7月)侧柏利用前期降水补给的0~40 cm层土壤水(59.3%)和近期降水(12.5%),荆条则利用近期降雨供给的0~30 cm层土壤水;侧柏的土壤水分来源逐月加深,至生长季末(11月)其主要利用60~80 cm层土壤水(前2~3 d降雨补给),而荆条枝条水δ18O值远离各水分来源δ18O值.两物种对水分的竞争压力小,适应本区域气候特征,尤其在应对特大暴雨等极端天气时,植物系统垂直分布的水分来源能够有效分流洪峰,减小暴雨瞬时破坏力.  相似文献   
102.
目的:构建Beclin-1基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,感染人SH-SY5Y细胞,观察沉默Beclin-1基因后低氧对SH-SY5Y细胞自噬的影响。方法:构建特异性靶向Beclin-1基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;再将载体转染入SH-SY5Y细胞;RT-PCR检测Beclin-1的mRNA表达;Western blot检测Beclin-1蛋白表达;CCK-8法测定Beclin-1 shRNA对SH-SY5Y细胞活力的影响。再将空白对照、阴性对照、转染型三种细胞分别以21%常氧及5%低氧培养,Western blot检测各组细胞LC3蛋白表达;电镜观察自噬小体。结果:Beclin-1 shRNA能明显抑制SH-SY5Y细胞Beclin-1的mRNA及蛋白的表达;沉默Beclin-1基因后,Beclin-1 shRNA组细胞存活率与阴性对照组相比无差异;成功建立了稳定表达Beclin-1 shRNA的SH-SY5Y细胞。5%低氧处理后,与阴性对照组相比较,Beclin-1 shRNA组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下调,细胞内自噬小体数量减少。结论:慢病毒介导的Beclin-1shRNA对SH-SY5Y细胞的活力无影响,但可以抑制低氧诱导的自噬。  相似文献   
103.
Tau protein is present in six different splice forms in the human brain and interacts with microtubules via either 3 or 4 microtubule binding repeats. An increased ratio of 3 repeat to 4 repeat isoforms is associated with neurodegeneration in inherited forms of frontotemporal dementia. Tau over-expression diminishes axonal transport in several systems, but differential effects of 3 repeat and 4 repeat isoforms have not been studied. We examined the effects of tau on mitochondrial transport and found that both 3 repeat and 4 repeat tau change normal mitochondrial distribution within the cell body and reduce mitochondrial localization to axons; 4 repeat tau has a greater effect than 3 repeat tau. Further, we observed that the 3 repeat and 4 repeat tau cause different alterations in retrograde and anterograde transport dynamics with 3 repeat tau having a slightly stronger effect on axon transport dynamics. Our results indicate that tau-induced changes in axonal transport may be an underlying theme in neurodegenerative diseases associated with isoform specific changes in tau's interaction with microtubules.  相似文献   
104.
发表了东北柳属一新变种  相似文献   
105.
HCV E2蛋白诱导的体液免疫及CTL应答研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用PCR方法扩增出HCVE2基因编码417a.a~750a.a的DNA片段,克隆到原核表达载体pQE30 LacZ启动子下游,转化JM109菌株.在JM109菌株中诱导表达出N端含6个组氨酸的E2融合蛋白,用Ni-NTA-Superflow亲和层析柱纯化作为抗原免疫实验兔和BALB/c鼠.定期取免血,采用间接ELISA方法检测兔子体内针对E2的抗体水平和维持规律.结果显示,距初次免疫14d兔子体内已有抗体产生,直至免疫第55d抗体水平持续上升,之后抗体水平保持稳定,抗体滴度达到13200.六周后,取鼠脾脏制备淋巴细胞,定向刺激扩增后与经过重组真核表达质粒pCE2转染的P815细胞作用,利用LDH释放试验检测作用效果.在ET=2001的情况下,杀伤率超过30%.这些结果表明工程菌株表达的HCV E2蛋白具有良好的免疫原性,可以诱发免疫实验动物机体产生较高滴度的抗体及特异性CTL应答.由此我们认为E2蛋白是发展HCV预防工程蛋白疫苗的合适候选者.  相似文献   
106.
人血小板因子4在大肠杆菌中的高效表达及活性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了提高人血小板因子 4(humanplateletfactor 4,hPF4)的表达 ,在PT7 7 hPF4表达质粒的基础上 ,采用PCR定位突变技术 ,改造人血小板因子 4(hPF4)cDNA基因片段 ,去除cDNA 3′端非翻译区AT富含序列 ,改用大肠杆菌强串联终止密码子TAATAA ,成功构建了高效表达质粒pBV2 2 0 hPF4。摇瓶发酵重组人血小板因子 4的产量达 1 60mg L较原表达质粒PT7 7 hPF4表达量提高了近 80倍。经包涵体的洗涤、变性、复性后 ,采用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验测定复性后rhPF4的生物学活性 ,结果显示 :rhPF4具有抑制血管生成活性。  相似文献   
107.
MTT比色法测定促肝细胞生长物质对肝细胞生长的刺激活性   总被引:8,自引:1,他引:8  
本实验建立了用简便的MTT比色法对促肝细胞生长物质的促肝细胞增殖作用的测定方法,确定了实验的最适条件。与传统的3H TdR掺入法进行比较的结果显示,MTT比色法与3H TdR掺入法测定结果基本相符,灵敏度相近,但消除了同位素的污染,是一个测定促肝细胞生长物质刺激肝细胞增殖活性的简便方法。  相似文献   
108.
贵州黔西县少数民族ABO血型分布及基因频率调查   总被引:5,自引:0,他引:5  
对贵州黔西县1260例6个少数民族人群红细胞ABO表现型进行了检测;结果如下:贵州黔西县布依族、满族、苗族、白族这四个民族的ABO血型基因频率很相近,彝族和仡佬族与这4个民族的差别较大,布依族,苗族,满族,白族ABO血型分布为O>B>A>AB,彝族为O>A>B>AB,仡佬族为A>O>B>AB;经Hardy Weinberg吻合度检测可以证明贵州黔西县的ABO血型表现型分布状况及基因频率相对稳定,其分布符合hardy Weinberg平衡,获得了该地ABO血型系统群体遗传学数据,为群体遗传学的研究提供了一定的资料。  相似文献   
109.
Functional characterization of a new human Ad4BP/SF-1 variation, G146A   总被引:4,自引:0,他引:4  
Ad4BP/SF-1 plays key roles at all levels of the hypothalamic-pituitary-steroidogenic organ axis and its functional disruption causes endocrine disorders of these organs. However, only three human subjects with Ad4BP/SF-1 mutations have been reported to date, suggesting limited clinical significance as a cause of inborn adrenal or sexual abnormalities. We report the first functional characterization of a new variation found in the hinge region of human Ad4BP/SF-1, G146A. Resulting from a single nucleotide shift (GGG-->GCG), G146A bears slightly diminished transactivation activity evidenced by both adrenal specific cyp11A promoter and ovary specific cyp19 promoter II. The variation does not affect protein expression or stability, exhibiting no dominant negative effect. G146A has a normal interaction pattern with standard co-regulators and subnuclear distribution pattern, and can be considered as a nonsynonymous single nucleotide polymorphism, since it occurs in normals and patients with adrenal diseases. In normal Japanese the allele C frequency is 8%, while in a preliminary population of patients with adrenal diseases it is elevated to 30%; suggesting the G146A variation might be of clinical importance.  相似文献   
110.
高效降解棉酚菌株的选育及脱毒条件的研究   总被引:19,自引:0,他引:19  
From mildewed cottonseed cake and stock cultUres of mold and yeast We select more than ten strains of yeastS and molds which can degrade cotton Phenol. At last we got four strains which can degrade cotton phenol highly effeted after mutagenized by physical and chemical factors and induced by cotton Phenol. They belong to Candida tropicalis, Torulopsis candida, Aspergillus flavus and ASPergillus niger. By small and medium size fermenfations, the content of dissociated cottom Phenol all reach safe criterion (…  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号