大黄鱼白细胞介素8基因克隆及特征分析

白细胞介素8是一种CXC型趋化性细胞因子,在免疫反应中起着非常重要的作用。本文在构建大黄鱼肌肉组织cD-NA文库的基础上,克隆了白细胞介素8基因。克隆到的白细胞介素8全长为2582bp,基因组包含106bp的5’端非编码区,52bp的外显子Ⅰ,168bp的内含子Ⅰ,133bp的外显子Ⅱ,149bp的内含子Ⅱ,87bp的外显子Ⅲ,682bp的内含子Ⅲ,13bp的外显子Ⅳ和1192bp的3’端非编码区,编码序列285bp,编码94个氨基酸。氨基酸序列具有趋化性因子CXC家族的结构特征,在进化上高度保守,与鲈鱼的同源性在90％以上。在检测的大黄鱼的10种组织中,表达量较高的为肾、肝、肠和脾,脑、心和肌肉中表达量较低。     

Hsc70-Auxilin复合物的拉伸分子动力学模拟

Hsc70与auxilin蛋白组成的系统是Hsp70/Hsp40分子伴侣系统家族的一员,在热休克反应中发挥重要作用。本文为得出auxilin蛋白J结构域的关键氨基酸,首先采用由二硫键交联的Hsc70 R171C与auxilin D876C的复合物结晶结构作为初始模型,进行分子动力学模拟,通过比较平衡后的结合部位发现,将形成二硫键的氨基酸突变为原来的氨基酸结构在结合位点上与生化结果较为相近,之后利用此结构通过拉伸动力学模拟分析了auxilin蛋白J结构域与Hsc70的ATPase功能域的解离过程,并探讨了Hsc70与auxilin蛋白之间的相互作用力。结果表明位于HPD loop上的His874,Asp876,Thr879,螺旋Ⅲ上的Glu884,Asn895,Asp896,Ser899,Glu902,Asn903为关键氨基酸,这些数据符合之前核磁共振实验证实的T抗原J结构域的HPD基序和螺旋Ⅲ与Hsc70的ATPase功能域之间的相互作用。     

紫花芒花芽生长发育规律

用环剥摘叶法和石蜡切片法对紫花芒花芽生长发育规律进行研究,结果表明:紫花芒花芽生理分化期开始于末次梢停长后1 ～6周(11月初) ,到11月23日为止,75 %以上的芽完成了生理分化。形态分化始期为末次梢停长后3 ～4周(11月中旬) ,到第二年1月中下旬止,持续时间为60 ～75 d。从10月30日到11月6日为花芽未分化期或是处于叶芽期,11月16日至次年1月4日为花芽分化前期,11月16日至次年1月8日为花序分化期,12月21日至次年1月8日为花序第一分枝分化期,12月21日至次年1月14日为花序第二分枝分化期,1月8日至1月26日,开始花序基部的小花花器官的分化,先是花萼、花瓣的分化,接着为雄蕊、雌蕊、蜜盘的形成,此为花器官分化期。     

基于过程模型CROBAS的全局灵敏度分析方法比较

过程机理模型在开发过程中常受限于生理学参数无法直接或准确测量.全局灵敏度分析可以评估模型预测结果对于生理学参数变化的响应,为模型结构改进、数据收集和参数校准提供参考.本研究基于过程模型CROBAS,以华山松为例,选取模型中描述树木结构关系的10个参数,以树高和各器官生物量的Nash-Sutcliffe效率(NSE)为目...     

果寡糖和甘露寡糖对断奶仔猪免疫机能的影响

研究探讨了果寡糖和甘露寡糖对断奶仔猪免疫机能的影响。实验采用随机区组设计法将48头健康、体重一致的35日龄断奶杜洛克仔猪分为4组,每组3次重复,每个重复4头进行为期28天的饲养实验。4个处理组分别为:基础日粮 0.5%果寡糖(FOS组)、基础日粮 0.3%甘露寡糖(MOS组)、基础日粮 0.45%果寡糖 0.25%甘露寡糖(F M组)、基础日粮 75 mg/kg金霉素 40 mg/kg洛克沙生(ABT组)。实验结果表明:(1)寡糖组免疫器官指数较ABT组大(P>0.05)。(2)在断奶后第7天,FOS组(0.32±0.49)、MOS组(0.32±0.04)和F M组(0.32±0.07)均较ABT组(0.20±0.01)显著提高了血清免疫球蛋白A(IgA)的浓度(P<0.05),同时FOS组(3.50±0.49)较ABT组(2.68±0.47)显著提高了IgG浓度(P<0.05);F M组显著提高了断奶后第21天IgG浓度(P<0.05);MOS组显著提高了断奶后第21天IgM浓度(P<0.05)。(3)与ABT组相比,FOS显著提高了断奶后第7天胸腺(21.33±6.03对37.33±4.04)、脾脏(19.67±2.08对30.33±8.73)、淋巴结(24.67±4.16对37.67±2.52)CD4 T淋巴细胞百分数(P<0.05);FOS组(21.33±4.04对32.00±5.29)、MOS组(21.33±4.04对37.33±3.21)、F M组(21.33±4.04对32.00±3.60)显著提高了断奶后第28天胸腺CD4 T淋巴细胞百分数(P<0.05);MOS组(20.67±3.51对29.67±5.51)显著提高了断奶后第7天胸腺CD8 T淋巴细胞百分数;F M组(17.00±1.00对22.67±3.06)显著提高了断奶后第7天脾脏CD8 T淋巴细胞百分数(P<0.05);各寡糖组对断奶后第28天CD4 、CD8 T淋巴细胞百分数影响不显著(P>0.05);ABT组(34.33±5.03)在断奶后第7天较F M组(20.67±6.43)显著提高了淋巴结CD8 T淋巴细胞百分数(P<0.05);在断奶后第7天,FOS组(1.42±0.32)、MOS组(1.52±0.46)、F M组(1.51±0.30)淋巴结CD4 与CD8 比值显著(P<0.05)大于ABT组(0.71±0.03);在断奶后第28天,FOS组(1.36±0.21)和MOS组(1.34±0.16)脾脏CD4 与CD8 比值显著(P=0.01)大于ABT组(0.94±0.29),除此之外,各寡糖组CD4 与CD8 比值较寡糖组大(P>0.05),寡糖组间差异不显著。     

LB克隆系统的构建及在鞘氨醇单胞菌基因融合表达中的应用

为摆脱限制性酶切位点不足的限制,构建可灵活改变多基因融合方向的表达载体,基于ⅡS型和ⅡT型限制性内切酶LguⅠ和BbvC Ⅰ设计开发了 LB克隆系统.该克隆系统是以广宿主质粒pBBR1MCS-3为初始载体,利用 PCR的方法,在其多克隆位点区插入LB片段(GCTCTTCCTCAGC)构建得到的.LB片段含Lgu Ⅰ和B...     

ToxR负调控副溶血弧菌中c-di-GMP的合成

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是世界范围内引起海产品相关食物中毒的主要致病菌,具有很强的生物膜形成能力。ToxR是一种膜结合调控蛋白,对副溶血弧菌生物膜形成具有一定的调控作用,但具体机制尚未见报道。c-di-GMP是一种普遍存在于细菌中重要的第二信使,参与调控细菌的多种生物学行为包括生物膜的形成。本文探究ToxR对副溶血弧菌中c-di-GMP代谢的调控作用。利用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定副溶血弧菌野生株(wild-type,WT)和toxR突变株(ΔtoxR)中c-di-GMP水平的差异。挑选c-di-GMP代谢相关基因scrA、scrG和vpa0198为进一步研究的靶标,采用实时定量qPCR实验检测靶基因在WT和ΔtoxR中的转录水平差异;将靶基因调控区DNA序列克隆入pHRP309质粒中无启动子的β半乳糖苷酶基因上游,采用lacZ报告基因融合实验进一步研究ToxR对靶基因的转录调控关系;将重组质粒分别导入含有pBAD33或pBAD33-toxR的EC100lpir中,采用lacZ报告基因融合实验研究ToxR是否能在异体宿主中调控靶基因的表达;PCR扩增靶基因上游调控区DNA序列,并纯化His-ToxR蛋白,用凝胶阻滞实验(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)研究His-ToxR与靶基因启动子区DNA序列是否具有结合作用。ELISA结果显示ΔtoxR中c-di-GMP含量显著性高于WT中的,说明ToxR抑制c-di-GMP的产生;实时定量qPCR结果表明WT中scrA、scrG和vpa0198的转录水平显著性高于ΔtoxR中的,表明ToxR抑制它们的转录;lacZ报告基因融合实验结果表明ToxR可抑制副溶血弧菌和EC100lpir中scrA、scrG和vpa0198的启动子区活性;EMSA实验显示His-ToxR能特异性地结合到scrA和scrG的上游调控区DNA序列上,而对vpa0198的上游调控区DNA序列无结合作用。综上所述,ToxR通过直接调控相关酶蛋白基因的转录来抑制副溶血弧菌内c-di-GMP的合成,从而有助于精确调控生物膜形成等细菌行为。     

前蛋白转换酶枯草溶菌素9抑制剂降低脂蛋白(a)作用的机制

脂蛋白(a)(lipoprotein(a),Lp(a))在结构上与低密度脂蛋白相似,是动脉粥样硬化性心血管疾病发病的独立危险因素和潜在的治疗靶点。前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)抑制剂可有效降低Lp(a)的循环水平并减少心血管事件风险。本文综合近年来的相关研究,阐述PCSK9抑制剂减少Lp(a)合成和促进其降解的相关机制,分析该领域所面临的挑战和未来的发展方向。     

频繁使用染发剂对小鼠染色体畸变率影响的研究

研究了多次接触７ 种染发剂对不同组小鼠骨髓和生殖细胞染色体畸变率的影响。结果发现, ７ 种染发剂均导致出现较高的染色体畸变率,３ 种能引起小鼠骨髓细胞染色体畸变率显著上升, 其中以粉末状染发剂的影响最为严重。４ 种染发剂对进行生殖细胞染色体畸变实验的小鼠均产生显著影响, 尤以氧化型染发剂最为明显。     

内蒙古厕蝇属一新种(双翅目:厕蝇科)

报道了采自内蒙古自治区阿拉善右旗的厕蝇科１新种,命名为阿拉善厕蝇。模式标本保存于沈阳师范学院昆虫研究所。