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出版年
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2023年 | 425篇 |
2022年 | 789篇 |
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2020年 | 871篇 |
2019年 | 948篇 |
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2017年 | 647篇 |
2016年 | 665篇 |
2015年 | 972篇 |
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2013年 | 1204篇 |
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2009年 | 1235篇 |
2008年 | 1275篇 |
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2006年 | 1195篇 |
2005年 | 1019篇 |
2004年 | 848篇 |
2003年 | 726篇 |
2002年 | 672篇 |
2001年 | 581篇 |
2000年 | 509篇 |
1999年 | 289篇 |
1998年 | 171篇 |
1997年 | 158篇 |
1996年 | 136篇 |
1995年 | 103篇 |
1994年 | 90篇 |
1993年 | 80篇 |
1992年 | 75篇 |
1991年 | 63篇 |
1990年 | 61篇 |
1989年 | 59篇 |
1988年 | 51篇 |
1987年 | 30篇 |
1986年 | 44篇 |
1985年 | 32篇 |
1984年 | 31篇 |
1983年 | 23篇 |
1982年 | 32篇 |
1981年 | 20篇 |
1980年 | 15篇 |
1979年 | 12篇 |
1977年 | 8篇 |
1975年 | 6篇 |
1971年 | 6篇 |
1950年 | 5篇 |
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91.
【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30-50℃下活性较高,在pH 4.0-8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH 4.0-8.0缓冲液处理1 h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73) U/mg;利用薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25 (EC 3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。 相似文献
92.
Joe F. Bozeman III Shauhrat S. Chopra Philip James Sajjad Muhammad Hua Cai Kangkang Tong Maya Carrasquillo Harold Rickenbacker Destenie Nock Weslynne Ashton Oliver Heidrich Sybil Derrible Melissa Bilec 《Journal of Industrial Ecology》2023,27(2):382-394
Now is the time to refocus efforts in urban research and design. A changing climate and extreme weather events are presenting unique challenges to urban systems around the world. These challenges illuminate the social barriers that accompany disruptive events such as resource inequities and injustices. In this perspective, we provide three research priorities for just and sustainable urban systems that help to address these matters. The three research priorities are: (1) social equity and justice, (2) circularity, and (3) digital twins. Conceptual context and future research directions are provided for each. For social equity and justice, the future directions are mandatory equity analysis and inclusionary practices, understanding and reconciling historical injustices, and intentional integration with diverse community stakeholders. For circularity applications, they are better metrics for integration, more robust evaluation frameworks, and dynamic modeling at multiple spatial and temporal scales. Future directions for digital twins include developing principles to reduce complexity, integrating model and system components, and reducing barriers to data access. These research priorities are core to meeting several of the United Nations Sustainable Development Goals (i.e., 1—No Poverty, 8—Decent Work and Economic Growth, 10—Reduced Inequalities, and 11—Sustainable Cities and Communities). Useful social and technical matters are discussed throughout, where we highlight the importance of prioritizing localized research efforts, provide guidance for community-engaged research and co-development practices, and explain how these priorities interact to align with the evolving field of industrial ecology. 相似文献
93.
应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对307例自然人群和228例胃病患者的血清进行了抗幽门螺杆菌(HP)抗体的检测,同时与尿素酶试验和涂片镜检结果比较。结果:自然人群中HP抗体阳性率为14.66%,不同性别、职业、民族间HP抗体的阳性率无差异。各年龄组间HP抗体阳性率有随年龄增加而升高趋势。胃病患者HP抗体阳性率为61.41%,GMT为1:430.53,明显高于自然人群的14.66%,GMT 1:15783,两者差异显著。ELISA法与尿素酶试验和涂片镜检结果存在相关关系。认为ELISA法结果可靠,可用于人群普查及HP感染的诊断。 相似文献
94.
【目的】探究植物乳杆菌培养上清(Lactobacillus plantarum culture supernatant,LPC)对3种血清型沙门氏菌猪霍乱(Salmonella cholerae,SC)、肠炎(Salmonella enteritidis,SE)和鸡白痢(Salmonella pullorum, SP)的生长和致病性的抑制作用效果及机理。【方法】将2%LPC与3种沙门氏菌分别共培养后,采用比浊法及牛津杯抑菌圈试验检测沙门氏菌生长情况及LPC中的主要抑菌物质,使用实时荧光定量PCR (quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)探究沙门氏菌致病性相关基因表达水平,最后通过结晶紫染色法检测沙门氏菌的生物被膜。【结果】2%LPC能够显著抑制3种沙门氏菌的生长,其作用效果与庆大霉素(gentamicin, GM)相近且对SE的生长抑制效果优于GM,其主要抑菌物质为有机酸;2%LPC对3株沙门氏菌SPI-1编码的主要毒力基因(InvA、InvF、SopE、SopB、SipB、HilA和SipA)、SPI-2毒... 相似文献
95.
相比于氨氮,天然水体中的硝酸盐氮通常更稳定,导致更难将其从水中去除。由于好氧反硝化可以在有氧环境下进行反硝化作用去除硝酸盐氮,该过程对含有较高溶解氧的天然水体中硝酸盐氮处理有重要作用。本文综述了好氧反硝化菌的分离纯化现状、微生物代谢机制和环境影响因子,并介绍了功能菌群在微污染饮用水源水生物修复的应用研究进展。与一般的厌氧反硝化类似,好氧反硝化菌的种属分布较广,常见的如假单胞菌属(Pseudomoas)、产碱杆菌属(Alcaligenes)、副球菌属(Paracoccus)和芽孢杆菌属(Bacillus)等所属部分微生物均有好氧反硝化能力。大部分好氧反硝化菌株在最佳生长条件下(25–37℃、溶解氧浓度为3–5mg/L、pH为7–8、碳氮比为5–10)具有高效的脱氮效率。但目前好氧反硝化作用在微污染饮用水源水的生物修复方面的应用仍有着脱氮性能不稳定、菌剂流失等不足。此外,目前较少相关中试及实际工程应用的研究,需要进一步的深入探究。 相似文献
96.
【目的】对分离自健康成人粪便样本的棒状腐败乳杆菌(Loigolactobacillus coryniformis)Lc7进行分类学鉴定和益生潜力评估。【方法】基于16SrRNA基因和基因组核心基因构建系统发育树,对Lc7进行分类学鉴定;通过耐酸和胆汁酸盐、粘附、抗氧化和抑菌实验,以及溶血、明胶酶活性和抗菌药物敏感性实验,评估Lc7的益生特性。同时,构建小鼠溃疡性结肠炎模型,评估Lc7的体内抗炎潜力。【结果】Lc7鉴定为L. coryniformis,在酸和胆汁酸盐的连续作用下,Lc7的存活率为70.17%。Lc7对HT-29细胞的粘附指数为56.33 CFU/cell,其自聚集和疏水性分别为80%和40%;Lc7对福氏志贺菌和鼠伤寒沙门菌等7个常见致病菌均有较强的抑制能力;对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)和羟自由基(hydroxyl radicals,·OH)的清除率分别为91.70%和48.53%;Lc7无溶血现象和明胶酶活性,对选取的大多数抗生素均敏感。在小鼠结肠炎实验中,Lc7干预组小鼠结肠长度明显长于模型组(... 相似文献
97.
【目的】为选育出高度耐酸性酒酒球菌(Oenococcus oeni)突变菌株,研究其胁迫耐受性能及苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)能力。【方法】以酒酒球菌SD-2a为出发菌株,通过常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变技术,筛选高耐酸性酒酒球菌突变菌株,并探究其乙醇耐受性及在模拟酒和葡萄酒条件下的MLF能力。【结果】经过ARTP诱变处理后,利用pH 3.0的胁迫传代培养和分离纯化等,获得了5株β-葡萄糖苷酶活性较好的耐酸突变菌株,且在高乙醇浓度下表现出了较好的耐乙醇性。其中突变菌株ARTP-2在模拟酒中的β-葡萄糖苷酶活性和l-苹果酸累积降解量最高,且其在葡萄酒中l-苹果酸降解速率快于出发菌株,在第18天完成MLF,发酵后的葡萄酒香气成分的含量显著高于接种SD-2a的酒样。【结论】突变菌株ARTP-2具有良好的胁迫耐受性和MLF能力,对葡萄酒的香气起到积极的作用,为进一步开发优质的MLF商业发酵剂奠定基础。 相似文献
98.
【目的】多重耐药菌的出现对公共卫生安全构成严重威胁,本研究分离多重耐药大肠杆菌噬菌体,研究其生物学特性和基因组特征,为耐药菌的噬菌体疗法提供理论依据。【方法】使用双层平板法从污水样本中分离纯化大肠杆菌噬菌体;磷钨酸染色后通过透射电镜观察形态;测定其宿主范围,测定温度和pH稳定性、一步生长曲线和体外抑菌效果等生物学特性;体内抑菌试验评估噬菌体对多重耐药大肠杆菌N1203-1Af感染的大蜡螟幼虫的保护作用;基于全基因组测序对其基因组特点进行分析。【结果】本研究分离共得到5株大肠杆菌噬菌体,分别命名为pEC-S163-2.1、pEC-S163-2.2、pEC-M1167-5Ar.1、pEC-m1291-2Dr.1和pEC-N1203-2Af.1;电镜结果显示噬菌体pEC-N1203-2Af.1属于短尾噬菌体中罕见的C3形态型,头部较长,长是宽的2–3倍;pEC-N1203-2Af.1可裂解受试15株大肠杆菌中的3株;感染10 min后进入指数增长期,–20-50℃、pH值为4.0–10.0的环境下均能够保持稳定活性;大蜡螟幼虫感染大肠杆菌N1203-2Af后噬菌体pEC-N1203-2Af.... 相似文献
99.
100.
Yang Tang Sijia Lu Chao Fang Huan Liu Lidong Dong Haiyang Li Tong Su Shichen Li Lingshuang Wang Qun Cheng Baohui Liu Xiaoya Lin Fanjiang Kong 《Plant biotechnology journal》2023,21(4):782-791
Flowering time is one of important agronomic traits determining the crop yield and affected by high temperature. When facing high ambient temperature, plants often initiate early flowering as an adaptive strategy to escape the stress and ensure successful reproduction. However, here we find opposing ways in the short-day crop soybean to respond to different levels of high temperatures, in which flowering accelerates when temperature changes from 25 to 30 °C, but delays when temperature reaches 35 °C under short day. phyA-E1, possibly photoperiodic pathway, is crucial for 35 °C-mediated late flowering, however, does not contribute to promoting flowering at 30 °C. 30 °C-induced up-regulation of FT2a and FT5a leads to early flowering, independent of E1. Therefore, distinct responsive mechanisms are adopted by soybean when facing different levels of high temperatures for successful flowering and reproduction. 相似文献