含PR启动子的原核高效表达载体的构建及应用

组建了一个仅含P_R启动子的原核高效表达载体pRC,它同时含有cⅠ调控基因、多酶切位点和两个强的转录终止序列.现已成功地用于表达重组人肿瘤坏死因子-α（hTNF-α）、重组人白细胞介素-3（hIL-3）和抗溶菌酶（HEL）抗体Fd基因,表达量均占菌体总蛋白的36％以上.同时还研究了不同的宿主菌和原核增强子序列等因素对P_R启动子载体表达的影响.此外,还比较了分别以P_R、P_L或P_RP_L作为启动子时表达hTNF-α的情况,结果表明,单用P_R或P_L启动子可获得与使用P_RP_L串联启动子一样的高效表达.     

广东省生态农业建设及其发展对策

介绍了广东生态农业的产生和发展的背景及生态农业建设的基本情况,并着重对目前广东省生态农业建设的9种主要模式及其经济和生态效益以及存在的问题进行了较详细的分析,在此基础上提出了广东生态农业发展的主要对策。     

华南五针松叶发育的研究

利用光学显微镜和电子显微镜对华南五针松叶的生长和发育进行研究,结果表明:华南五针松叶为单脉序的三棱形针状叶,气孔分布在腹面,为单环型;皮下层一到两层;内皮层明显;转输组织为松型;树脂道三个,出现两个边生、一个中生或缺,三个中生,三个边生,仅二个中生等类型;叶缘的细齿由表皮细胞壁形成。气孔器发育方向是先中央后两端,在部分区域具有合并及不连续的现象。     

木本植物内源生长素免疫胶体金定位分析技术的研究

以木本植物杨树(Populus sp.)和核桃(Juglans regia L.)为材料,对内源生长素免疫胶体金定位技术在固定、烤片、免疫染色、显色等关键环节进行了改进优化与验证.结果显示,优化后适合木本植物定位方法的主要技术要点是:在染色中,通过采用尿素-胰蛋白酶联合消化技术和增加牛血清白蛋白处理大大地改善了抗原修复结果,提高了染色的敏感性和特异性.利用优化后的方法对核桃幼胚和杨树嫩茎诱导生根过程中的吲哚乙酸(IAA)进行定位研究,发现杨树试管嫩茎生根过程中,形成层及周缘维管束有很强的IAA信号,核桃子叶生根中,胚中有很强的IAA信号,胚根中有半圆形、胚芽中有>"形强信号区,胚轴信号较弱,胚根信号最强.研究表明,与传统免疫染色方法相比,优化后的方法对木本植物生长素定位具有敏感性高,特异性强,银颗粒明显,背景清晰,耗时少等特点.     

小麦苗期地下茎蛋白质双向电泳技术体系的优化

以东农冬麦1号为材料,对苗期地下茎处的蛋白提取方法、蛋白溶解、上样量、胶条的转移等方面进行了试验.结果表明:在蛋白提取方面,TCA/丙酮法(T法)和尿素/硫脲法(N法)相比T法能减少低丰度蛋白的损失得到蛋白点数更多的图谱.在蛋白溶解方面,经过两次水化液溶解的蛋纯度较高,在等电聚焦时能保持8000伏较高电压.上样量方面,10mg粗蛋白溶于两次水化液能得到清晰、分离效果好、蛋白点数较多的图像.胶条转移方面,先向胶面中加入400μl0.3%普通琼脂糖溶液后,用200μl的电极缓冲液冲洗胶条支撑膜会使胶条顺利转移到第二向胶面上且胶条与胶面间不会产生气泡.     

基于生态足迹模型的延边林区可持续发展评价

生态足迹是评价可持续发展状况和能力的重要指标之一。本文以统计年鉴和林业年鉴为主要数据来源,对延边林区1996~2002年的生态足迹进行了计算和分析。结果表明,该区人均生态足迹逐年下降,人均生态承载力波动较小,而人均生态盈余逐年增长。人均万元GDP生态足迹逐年递减,同西部地区相当,而明显高于东部。人均林地生态足迹变化平稳,天然林保护工程实施前后林地生产足迹和林地出口足迹的平均值分别降低了0.341和0.327 hm2.人-1,降幅分别为46.32%和54.94%。延边区域和林业的发展是可持续的,天然林保护工程的实施有助于增强其可持续发展能力,但同林业发达国家相比,仍有很大差距。依靠科技,提高单位面积林地产量和资源利用率,合理经营和管理森林生态系统是今后的工作重点。     

应用GeneXpert MTB/RIF对肺外结核的快速检测及评估

目的 评估GeneXpert MTB/RIF检测肺外结核分枝杆菌的准确性,并与传统方法进行比较。 方法 选取2016年6月至2017年6月在本院就诊的144例疑似肺外结核病患者,对所有标本分别进行金胺“O”荧光染色镜检、液体培养及药敏试验、固体培养及比例法体外药敏试验和Xpert法检测。 结果 收集的144例疑似肺外结核标本中,确诊108例,以胸水、淋巴结活检和脓液感染较多,另36例阴性患者中,10例为非结核分枝杆菌感染。Xpert试验的敏感性为28.73%,特异性为96.00%,其阳性预测值和阴性预测值均高于其他3种检测方法。在阳性检出率方面,Xpert试验高于涂片镜检(χ2=17.39,P2=8.64,P2=2.56,P>0.05)。固体培养、液体培养和Xpert试验3种方法对结核分枝杆菌利福平耐药率检测差异无统计学意义(P>0.05),耐药率分别为8.33%、9.68%和11.11%,且Xpert试验方法检测出2株耐多药结核分枝杆菌,平均耗时2.5 h。 结论 GeneXpert MTB/RIF可以作为一种筛选及快速检测工具应用于肺外结核的诊断,同时可作为检测MDR TB的一种指标。     

利用肠激酶加工融合蛋白的方法制备重组人甲状旁腺素（1—34）肽

采用全基因分段合成和补丁连接相结合的方法构建了人甲状旁腺素 (hPTH) (1～ 34)肽基因 ,并利用GST融合表达系统 ,在大肠杆菌中克隆和可溶性表达了hPTH(1～ 34)肽基因。融合蛋白表达量占菌体总蛋白质的 2 5 %以上 ,经高密度发酵、亲和纯化后 ,在每升发酵液中得到了 10 g融合蛋白。融合蛋白经肠激酶一步加工并亲合纯化和反相脱盐后 ,最终可以得到约 0 .6g /L人甲状旁腺素 (1～ 34)肽纯品 ,样品的理论回收值达到了4 8.75 %。产物的纯度和性质经HPLC、毛细管电泳、质谱分析、N端测序等得到证明 ,并与化学合成产物的结果相吻合。兔肾皮质细胞测活表明 ,重组产物与化学合成人甲状旁腺素 (1～ 34)肽具有相近的腺苷酸环化酶激活活性。     

MicroRNA，lncRNA与神经退行性疾病

综述了microRNA和lncRNA在一些神经退行性疾病病理生理中的作用机制．随着社会生产的发展,人类文明的进步,人口日益老年化,神经退行性疾病正在全球范围内流行,严重地危害着人类的健康．尽管长期的研究使人们对神经退行性疾病有了比较全面和深入的了解,但是其背后隐藏的发病机制仍然是个谜．人类基因组约98%的转录产物为非编码RNA(ncRNA),在生命活动中有着许多鲜为人知的广泛而多样性的生物功能．小分子RNA(microRNA)是研究得相对比较深入的一类小ncRNA,最近2～3年,长非编码RNA(lncRNA)受到人们的重视,已积累了一些相关研究成果．     

九种蟋蟀mtDNA-16S rRNA基因序列及其系统进化(直翅目:蟋蟀科)

蟋蟀科5属9个种的线粒体16S rRNA基因部分序列被测定或从Gen Bank获得,比较其同源性,计算核苷酸使用频率,并构建NJ和MP分子系统树。在获得的449bp的序列中A、T、C和G碱基含量分别为31．8％、36．9％、9．9％和21．4％,A T平均含量为68．7％。研究结果表明：所研究的5属9种蟋蟀聚成3个聚类簇,斗蟋属先与灶蟋属汇合,再与棺头蟋属构成聚类簇Ⅰ;油葫芦属黑脸油葫芦和北京油葫芦与蟋蟀属的家蟋相聚构成聚类簇Ⅱ;蟋蟀属的田蟋单独构成聚类簇Ⅲ。