研究性教学模式在"植物的抗逆生理"教学中的应用

阐述了研究性教学的内涵及将之引入"植物的抗逆生理"教学的必要性,并介绍了开展研究性教学活动过程,评价了其教学效果.在此基础上就研究性教学模式下研究专题的选择、学生的成绩考核指标及教师扮演的角色等内容进行了讨论.     

连续3步缺口修复构建小鼠乳清酸蛋白-人溶菌酶杂合基因座

目的:构建一个利用小鼠乳清酸蛋白(mWAP)基因座完整的上下游调控序列指导人溶菌酶(hLYZ)基因组序列在乳腺内特异性高效表达的mWAP-hLYZ杂合基因座,实现人溶菌酶的高效表达。方法:采用连续3步缺口修复的方法。首先,以pBR322载体作为骨架,插入预先合成的6个同源臂序列,构成能够连续进行3次缺口修复的基因抓捕载体。然后在大肠杆菌内利用λ噬菌体Red同源重组系统介导的同源重组方法:第一步,从含mWAP基因座的细菌人工染色体(BAC)上亚克隆8 kb的mWAP基因3’端完整侧翼序列到抓捕载体上;第二步,从含hLYZ基因的BAC上亚克隆5 kb的从起始密码子(ATG)到终止密码子(TAA)的hLYZ基因组序列;第三步,从mWAP BAC上亚克隆9kb的mWAP基因5’端完整侧翼序列,并使上述3个片段在抓捕载体上自动无痕地连接在一起。结果:构建了全长约22 kb的mWAP-hLYZ杂合基因座,经PCR扩增、限制性内切酶酶切和序列测定验证,构建的杂合基因座达到原mWAP基因座中mWAP基因组编码序列从起始密码子(ATG)到终止密码子(TAA)完全被hLYZ基因组序列精确置换的目的。结论:通过连续3步缺口修复构建杂合mWAP-hLYZ基因座乳腺表达载体,为乳腺生物反应器高效表达人溶菌酶提供了可行的思路和方法。     

水稻内生成团泛菌YS19共质体形成差异表达蛋白MalE及其兼职功能

成团泛菌YS19是从水稻“越富”品种中分离的一种优势内生细菌,与宿主水稻互作时具有多种促生作用,其形成的共质体(symplasmata)结构与菌体抗逆及与宿主互作有重要意义．研究发现了一种在YS19共质体形成阶段高表达的差异蛋白,对其用肽指纹图谱进行鉴定,发现其属于周质空间麦芽糖结合蛋白家族．克隆了该蛋白质的基因,重组表达并分离纯化了该蛋白质,发现它是一种兼职功能蛋白,其不仅参与麦芽糖的ABC运输系统,而且在强酸环境下不易发生变性沉淀,并可通过疏水面的显著暴露结合底物蛋白来发挥分子伴侣活性,这些兼职功能构成了菌体抗逆生存适应性的重要分子基础．     

六盘山小流域地形、植被特征与土壤水文物理性质的关系

利用多元统计方法,分析了六盘山分水岭沟小流域107个样地的地形、植被特征与土壤水文物理性质的关系。结果表明:饱和持水量、总孔隙度、毛管持水量、容重、石砾体积含量、非毛管孔隙度可作为土壤水文物理性质类型划分的6项重要指标,同时土壤毛管持水量还是一个敏感指标。将所有调查样地划分为土壤物理性质组间差别较大但组内接近的3组样地,发现各组样地的植被类型相近。土壤水文功能最好的第III组是以桦树和山杨为主的天然阔叶次生林样地,其主要分布在阴坡、中坡位;华北落叶松人工林为第Ⅱ组,其土壤水文功能次之;土壤水文功能最差的第Ⅰ组多是位于陡坡悬崖的华山松天然林及杂灌丛样地。土壤孔隙性受到地形和植被特征的共同影响,影响显著的地形特征主要是相对高程、坡向和坡位;植被特征主要是胸径、乔木高度和灌木层盖度。     

黄淮平原冬小麦不同品种根系生长差异

选择黄淮平原地区当前主推品种郑麦9023,以及早期引进品种阿勃和丰产3号为材料,利用微根管技术,研究冬小麦活根长和根直径径级的分布动态,以及以活根长为基础的净生长速率的变化规律.结果表明：根直径为0.05～0.25 mm的细根是冬小麦根系的主要组成部分,根直径≤0.5 mm的细根占活根长的98%以上;冬小麦的平均根直径随着生育进程不断变化,其变化范围为0.15～0.22 mm,不同品种之间没有显著差异;活根长与根尖数呈显著正相关,表明根尖数是活根长增加的主导因素;返青期到拔节期是冬小麦根系生长最旺盛的时期,阿勃和丰产3号具有较长时期的根系增长活力,郑麦9023自拔节期以后根直径≥0.1 mm的细根根尖数占总根尖数的比例有所上升,这有利于提高生育后期根系抗性和保证根系活性稳定,以满足籽粒灌浆的需要.     

不同丰容方式对圈养成年山魈行为影响的试验

于2011年对成都动物园饲养的8只成年圈养山魈进行3种食物丰容、2种环境丰容及5种食物与环境丰容试验,考察不同形式丰容方式对圈养山魈行为的影响.结果表明,第一期丰容试验(B)后,山魈的休息行为、运动行为和玩耍行为增加极显著(P＜0.01),而交往行为和取食行为减少极显著(P＜0.01);第二期丰容(D)后,休息行为减少极显著,交往行为增加显著,运动行为、采食行为和玩耍行为增加极显著.山魈对纯轮胎丰容方式的接触次数最少,而对食物丰容方式接触次数更多.有两种丰容方式(纯轮胎丰容和纯轮胎+纯麻袋丰容)仅持续很短的时间即失去作用,其余的丰容方式一般在第8d出现兴趣下降的现象,因此建议每种丰容方式的持续使用时间不超过8d.     

凝固酶阴性葡萄球菌临床耐药性的连续性研究

目的了解凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性情况。方法分析2008年至2010年沈阳军区总医院临床分离的484株凝固酶阴性葡萄球菌的药敏结果。结果 2008年至2010年凝固酶阴性葡萄球菌的分离率分别为4.7%、3.6%和3.1%。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）分别为76.6%、78.5%和79.9%。青霉素G、红霉素和苯唑西林的耐药率较高,平均分别为91.2%、87.5%和82.6%。万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的耐药率均为0。结论 2008年至2010年凝固酶阴性葡萄球菌检出率相对稳定,对常用抗菌药物的耐药率相对稳定,这为临床用药选择及加强感染控制提供了有力指导。     

Depletion of Regulatory T Lymphocytes Reverses the Imbalance between Pro- and Anti-Tumor Immunities via Enhancing Antigen-Specific T Cell Immune Responses

Background

The regulatory T cells (Tregs) can actively suppress the immune responses. However, literature about detailed changes of host effective and suppressive immunities before and after depletion of Tregs in ovarian carcinomas, is rare.

Materials and Methods

Ovarian cancer patients and the ascitogenic animal model were employed. Immunologic profiles with flow cytometric analyses, immunohistochemistric staining, RT-PCR, ELISA, and ELISPOT assays were performed. In vivo depletion of Treg cells with the mAb PC61was also performed in the animal model.

Results

The cytokines, including IL-4 (p = 0.017) and TNF-α (p = 0.046), significantly decreased while others such as TGF-β (p = 0.013), IL-6 (p = 0.016), and IL-10 (p = 0.018) were elevated in ascites of ovarian cancer patients, when the disease progressed to advanced stages. The ratio of CD8⁺ T cell/Treg cell in ascites was also lower in advanced diseases than in early diseases (advanced 7.37±0.64 vs. early 14.25±3.11, p = 0.037). The kinetic low-dose CD25 Ab depletion group had significantly lower intra-peritoneal tumor weight (0.20±0.03 g) than the sequential high-dose (0.69±0.06 g) and sequential low-dose (0.67±0.07 g) CD25 Ab deletion groups (p = 0.001) after 49 days of tumor challenge in the animal. The kinetic low-dose CD25 Ab depletion group generated the highest number of IFN-γ-secreting, mesothelin-specific T lymphocytes compared to the other groups (p<0.001).

Conclusions

The imbalance between effective and suppressive immunities becomes more severe as a tumor progresses. The depletion of Treg cells can correct the imbalance of immunologic profiles and generate potent anti-tumor effects. Targeting Treg cells can be a new strategy for the immunotherapy of ovarian carcinoma.     

动物离心机中大鼠行为状态无线视频采集装置的研制

目的:研制一种在正加速度作用下能实时观测大鼠行为状态的实验视频采集装置,为研究正加速度导致脑损伤的病理生理机制和防治措施提供新的方法。方法:依据正加速度对大鼠体位的要求和离心机特殊的环境,通过特制的大鼠座舱和无线视频采集单元来实现对动物离心机中正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测;固定大鼠的座舱主要由胸部固定圈、身长调节圈、头部运动限制框构成;无线视频采集单元由2.4 G无线摄像头、无线信号接收器、信号放大器、计算机以及视频采集软件组成。结果:座舱特殊的大鼠固定方式,既满足了正加速度对体位的要求,又不影响对大鼠行为状态的观测,2.4 G无线视频采集技术保证视频信号在离心机高速旋转环境下的实时传输和观测,视频画面清晰流畅,并且能保存视频供回放分析。结论:动物离心机无线视频采集装置可用于正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测与研究。     

Iron Chelation Inhibits Osteoclastic Differentiation In Vitro and in Tg2576 Mouse Model of Alzheimer’s Disease

Patients of Alzheimer’s disease (AD) frequently have lower bone mineral density and higher rate of hip fracture. Tg2576, a well characterized AD animal model that ubiquitously express Swedish mutant amyloid precursor protein (APPswe), displays not only AD-relevant neuropathology, but also age-dependent bone deficits. However, the underlying mechanisms remain poorly understood. As APP is implicated as a regulator of iron export, and the metal chelation is considered as a potential therapeutic strategy for AD, we examined iron chelation’s effect on the osteoporotic deficit in Tg2576 mice. Remarkably, in vivo treatment with iron chelator, clinoquinol (CQ), increased both trabecular and cortical bone-mass, selectively in Tg2576, but not wild type (WT) mice. Further in vitro studies showed that low concentrations of CQ as well as deferoxamine (DFO), another iron chelator, selectively inhibited osteoclast (OC) differentiation, without an obvious effect on osteoblast (OB) differentiation. Intriguingly, both CQ and DFO’s inhibitory effect on OC was more potent in bone marrow macrophages (BMMs) from Tg2576 mice than that of wild type controls. The reduction of intracellular iron levels in BMMs by CQ was also more dramatic in APPswe-expressing BMMs. Taken together, these results demonstrate a potent inhibition on OC formation and activation in APPswe-expressing BMMs by iron chelation, and reveal a potential therapeutic value of CQ in treating AD-associated osteoporotic deficits.