Microsatellite analysis of the genetic relationships between wild and cultivated giant grouper in the South China Sea

The giant grouper (Epinephelus lanceolatus) is a coral fish with high commercial value in Southeast Asia. In the present study, we isolated 11 microsatellite DNA markers, and analysed the genetic diversity and differentiation between cultured stocks and wild populations of the giant grouper originating from the South China Sea. A total of 390 alleles at 11 microsatellite loci were detected in 130 individuals from five different populations. The expected heterozygosity varied from 0.131 to 0.855 with a mean value of 0.623 and the observed heterozygosity varied from 0.145 to 0.869 with a mean value of 0.379. The allelic richness and heterozygosity studies revealed that the genetic diversity of the cultured population was significantly reduced when compared with that of the wild population. The F_is, pairwise F_st values, analysis of molecular variance (AMOVA), three-dimensional factorial correspondence analysis and structure analysis revealed significant population differentiation between the cultured stocks and the wild populations, among the three cultured populations and between the two wild populations. These differences may be caused by random genetic drift, the effects of artificial selection and founder effects. Our results will be useful in the management of cultured stocks and conservation of wild populations of the giant grouper.     

建兰花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用

用建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗CymMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(2C6、5B7和12G9),分别制备它们的单抗腹水。其中5B7和12G92株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,3株单抗的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链。利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测CymMV的方法。蝴蝶兰病叶作1∶10240倍稀释、提纯CymMV病毒浓度为4.87ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.487ng)时,该方法仍能检测到病毒。利用ACP-ELISA方法检测了田间样品,发现CymMV在兰花上发病很普遍。     

丙型肝炎病毒基因变异及候选保守表位分析

HCV分离株主要分为4个基因型(HCV Ⅰ～Ⅳ),各型间的氨基酸及核苷酸组成同源性均小于80％, 氨基酸变异率分别为C 8%,E1 35%,E2/NS1 53%,NS3 27%,NS4 35%,NS5 39%.不同型别的HCV有不同的地区分布特征.根据HCV表达产物多肽的保守性、亲水性、抗原性及空间构型等特性,已在HCV表达产物中鉴定出一些高度保守的候选B细胞表位及T细胞表位, 其中B细胞表位一般为12～40肽, T细胞表位一般为7～9肽, 这些B/T细胞保守表位的鉴定, 将有助于推动HCV的免疫治疗及疫苗研究的发展.     

检测人结肠癌组织端粒酶活性的TRAP方法研究

对检测人结肠癌组织端粒酶活性的端粒酶重复序列扩增法(TRAP)进行了研究.当Mg^2＋浓度为1.8 mmol/L、退火温度为55℃时,能得到可靠的检测结果.影响检测结果可靠性的另两个因素是抽提物的反应用量和阳性片段的污染.     

小麦品种群体的细胞学研究

对９个小麦品种群体进行了细胞学观察。结果表明,４．５３％的细胞含有至少一对不配对的染色体,２．３１％的细胞里,染色体偏离正常的数目。显然,这种自然的不规则性可能导致非整倍体后代的产生。３．５７％的细胞发生了易位,群体的２．２２％为单体植株。     

小麦耐盐细胞系及后代耐盐稳定性的生化分析

以离体培养筛选出的耐盐小麦变异系及其后代为材料,对其耐盐稳定性进行有关生理生化特性分析。结果表明：（１）随着耐盐愈伤组织耐盐能力的提高,过氧化物同工酶酶带谱加,与对照相比,三个区域出现了明显差异;（２）从耐盐愈伤组织酯酶同工酶酶谱发现,耐盐愈伤组织具有Ｃ２,Ｃ５,Ｃ９,Ｃ１１新增加酶带;（３）耐盐系后代幼苗能维持较高的Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比值,在盐浓度为０．９％时,其Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋为０．７８８,而对     

高压力对限制性内切酶活性的影响

以质粒ｐＳＰＯＲＴ１为底物研究了高压力对Ⅱ型限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ和ＸｂａⅠ反应的影响。高压力未引起两酶底物碱基特异性的改变,但二者反应活力均随压力升高而逐渐下降,ＸｂａⅠ对高压力更敏感。引起ＨｉｎｄⅢ和ＸｂａⅠ限制性内切酶活性完全丧失的压力分别为２００和１８０ＭＰａ,半失活压力分别为１３０和７５ＭＰａ。     

转基因在玉米中的遗传分离与整合特性的研究

用ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交方法研究了转基因Ｂｔ在３种不同方法获得的８个转化体后代中的遗传分离、整合性质及其稳定性,结果表明：（１）转基因在大多数转化体后中呈简单的孟德尔遗传;在Ｒ１至Ｒ２代,部分家系中转化体比例偏低,有的发生转基因丢失,但到Ｒ３代以后均趋于正常的孟德尔遗传方式,在群体中固定下来;（２）转基因在不同转化体中的整合类型有一定差异,但整合的位点和拷贝数都较少,且多呈串联或紧密连锁的整合;（