大鼠颌下腺及其离体培养细胞脱氢表雄酮（DHEA）的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法,研究了颌下腺及无血清培养的颌下腺上皮细胞DHEA的定位,结果显示,大鼠颌下腺的浆液性腺泡的上皮细胞及各级导管上皮细胞均呈DHEA免疫反应阳性,无血清培养腺上皮细胞也呈DHEA免疫反应阳性,阳性物质分布于胞质,胞核呈阴性反应,此结果提示：大鼠颌下腺能自身合成DHEA,DHEA对消化功能可能具有重要的调节作用。     

银染DD-PCR法筛选游泳疲劳小鼠肝脏中差异表达基因的初步研究

目的:筛选小鼠游泳疲劳相关基因,为阐明疲劳产生的分子机制奠定基础.方法:取30只BALB/c雄性小鼠,体重(20±2)g,随机分成对照组、浸水组和游泳疲劳组,对游泳疲劳组小鼠进行负重游泳致疲劳后,与其他两组同时采集肝脏组织,利用改进后的银染DD-PCR法筛选小鼠肝脏中差异表达的基因,并进行鉴定,采用BLAST软件对阳性片段进行同源性分析.结果:经反向Northern blot和测序鉴定后,获得了7条阳性差异表达基因片段(DD-ESTs),其中有2条DD-ESTs只在游泳疲劳组表达,2条呈现下调表达,另3条呈现上调表达;阳性片段中一条为新基因,登录GenBank数据库后获得登录号为AY615302.结论:利用银染DD-PCR法获得了7条游泳疲劳小鼠差异表达基因片段(DD-ESTs).     

Efficient generation of transgenic mice by direct intraovarian injection of plasmid DNA

We established a rapid procedure for obtaining transgenic mice by directly injecting an enhanced green fluorescent protein (EGFP)-expressing plasmid (pIRES-EGFP) into the ovaries of fertile mice. The frequency of transgenic mouse production was determined by pair-mating, and by polymerase chain reaction (PCR) and sequence analysis of DNA taken from the tails of the offspring. The mice that received the EGFP gene transmitted it to their offspring (F(1)). Genetic and PCR analyses of F(1) progeny confirmed that the inserted EGFP was stably inherited. Of six female F(1) mice, all were able to pass the foreign DNA on to the next generation (F(2)). In situ hybridization using paraffin-embedded sections of ovarian and testicular tissues from the F(1) and F(2) progeny showed that the introduced gene was expressed in the gonads of the animals. The chromosomal location of the injected DNA was determined by fluorescence in situ hybridization, and the frequency of multiple site versus single site insertions is 85.71% (18/21) analyzed by FISH. We anticipate great progress in murine genetic engineering using this technique.     

川西高山典型自然植被土壤动物多样性

为了解川西高山不同自然植被类型下土壤动物的多样性差异,于2008年8月至2009年6月对该地区代表性植被--针叶林、灌木林和草甸下的土壤动物群落进行调查.从3种植被下共捕获土壤动物48343只,隶属于7门16纲31目117科.不同植被类型的大型土壤动物优势类群差异较大,其土壤动物类群数存在显著差异(P＜0.05).3种植被下土壤动物个体密度与类群数的垂直分布均具有明显表聚性.针叶林苔藓层的土壤动物个体密度与类群数极显著高于凋落物层和土壤层（P＜0.01）.不同植被下土壤动物密度 类群指数(DG)存在极显著差异(P＜0.01).大型土壤动物生物量在6月达到最大值.Jacard相似系数显示:受干扰草甸的土壤动物群落与其他植被相似程度最低.表明植被类型对土壤动物群落结构特征影响显著;坡向、海拔以及干扰等因素对土壤动物群落结构也有影响.     

长链非编码RNA SNHG7靶向调控miR-9-5p参与舌癌进程

目前发现长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）小核仁RNA宿主基因7 (small nucleolar RNA host gene 7, SNHG7)在多种肿瘤中高表达,发挥原癌基因效应,但是其在舌癌中的功能尚未研究。qRT-PCR结果证实,SNHG7在舌癌组织和细胞中均下调。在舌癌细胞中,过表达SNHG7抑制舌癌细胞增殖,敲低SNHG7促进舌癌细胞增殖。生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验证实,miR-9-5p与SNHG7结合且下调其表达。过表达SNHG7,miR-9-5p表达量降低而自噬/苄氯素1调节因子1（autophagy/Beclin 1 regulator 1, Ambra1）的表达增加。敲低SNHG7,上调miR-9-5p,且降低Ambra1的表达。临床组织标本随访资料统计发现,SNHG7、Ambra1与舌癌患者预后正相关,而miR-9-5p与舌癌患者预后负相关。提示SNHG7/miR-9-5p/Ambra1可作为舌癌预后的潜在标志物。     

大豆花叶病毒胁迫诱导的消减文库构建及初步分析

大豆花叶病毒病是危害大豆产量和品质的主要病害之一 ,通过分子手段研究大豆花叶病毒病基因的抗病相关基因表达可以辅助抗病育种工作。利用SSH技术 ,对抗大豆花叶病毒病的大豆品种 814 3进行分析 ,构建大豆花叶病毒胁迫诱导表达的cDNA文库 ,并对文库进行初步分析。     

家蝇卵黄蛋白基因启动子区的克隆与活性分析

从家蝇基因组文库中分离到含约1．7kb5’上游区的家蝇卵黄蛋白-1基因组基因序列,根据其5’上游序列,PCR扩增出大小不同的4个启动子片段,分别插入到切除了CMV启动子的pCMV-GFP质粒中的绿色荧光蛋白报告基因上游,构建了pMYP1-GFP、pMYP2-GFP、pMYP3-GFP和pMYP4-GFP4个重组质粒。另将 684／ 7、 1165／ 7这两个启动子片段用SpeⅠ和HindⅢ双酶切,去除包含CAAT／TATA盒的 302／ 7序列区后,分别构建了pMYP5-GFP和pMYP6-GFP两个重组质粒。通过电转移实验和荧光检测表明。 684／ 7、 1165／ 7、 1616／ 7这3个启动子片段具有转录活性,而 684／ 7启动子片段的转录活性最强, 296／ 7、 684／ 302、 1165／ 302这3个启动子片段无转录活性。上述实验结果表明。 302／ 7序列区为启动子的核心部分。 302到 1616之间存在调控性启动子或增强子等其他一些顺式元件。细胞转染实验证实,6种启动子片段在BHK-21和Sf9细胞中都未表现出可检测的转录活性,说明家蝇卵黄蛋白基因启动子具有组织或细胞特异性。     

不同繁育器材对褐带卷蛾茧蜂繁育效果比较

为提高以大蜡螟为替代寄主繁育棕榈害虫红脉穗螟幼虫寄生蜂——褐带卷蛾茧蜂的增殖效果,比较了100目管、60目管、透明网盒、顶透瓶和透气离心管5种繁育器材对褐带卷蛾茧蜂的室内繁育效果。研究结果表明,供试的器材均可进行褐带卷蛾茧蜂的繁育,但繁育效果存在差异,其中60目管寄生效果较佳,表现在寄主被成功寄生率相对较高,平均达到80%,单头雌蜂产蜂数最高,平均为24.13头,被成功寄生的寄主单头出蜂率亦最高,为30.11头,其次为100目管、透明网盒、顶透瓶,而透气离心管饲养效果较差。