利用DNA池技术研究猪GH基因启动子序列的多态性

目的:分析猪GH基因启动子区序列的多态性,期望筛选出对猪生长性状有显著影响的SNP位点,为地方猪种的选育及选种提供一定的理论依据.方法:以大约克、可乐猪、香猪和黔北黑猪为试验对象,构建品种DNA池,采用PCR产物直接测序法对猪GH基因启动子区-856～+171片段共1 027bp进行单核苷酸多态性检测.结果:除香猪外,在其他3个猪种5'-端侧翼序列发现5个SNP位点:C22T、A- 26T、G- 219A、T- 385A和C-391T,并且在大约克GH基因启动子区-640处发现了一个12bp碱基序列(GGCAAAGTGTAG)的缺失.结论:DNA池结合PCR产物直接测序技术能够很好的筛选SNP位点,本研究采用该技术在猪GH基因启动子区- 856～+171片段检测到了5个SNP位点.     

江西阳际峰自然保护区陆生贝类物种多样性

2007年11月～2008年5月调查了江西阳际峰自然保护区陆生贝类资源,共采得陆生贝类47种(含2个未定种),隶属13科27属,其中16种为江西省陆生贝类新纪录种.区系分析表明,该保护区陆生贝类以东洋界成分为主,占种类总数的63.83%.其优势种为墙草真管螺和同型巴蜗牛.分析11个采集点生物多样性指数结果表明,Margalef丰富度指数(dMA)范围为0～6.2345;Shannon-Wiener多样性指数( H ′)范围为0～3.5676;Pielou均匀度指数( Jsw )范围为0～1.3610.环境越复杂,种类组成越丰富;物种分布越均匀的地区,陆生贝类多样性指数就越高.     

Engineering mouse apolipoprotein A-I into a monomeric, active protein useful for structural determination

Apolipoprotein AI (apoAI), the major protein component of HDL, is one of the best predictors of coronary artery disease (CAD), with high apoAI and HDL levels being correlated with low occurrences of CAD. The primary function of apoAI is to recruit phospholipid and cholesterol for assembly of HDL particles. Like other exchangeable apolipoproteins, lipid-free apoAI forms a mixture of different oligomers even at 1.0 mg/mL. This self-association property of the exchangeable apolipoproteins is closely associated with the lipoprotein-binding activity of this protein family. It is unclear if the self-association property of apolipoprotein is required for its lipoprotein-binding activity. We developed a novel method for engineering an oligomeric protein to a monomeric, biologically active protein. Using this method, we generated a monomeric mouse apoAI mutant that is active. This mutant contains the first 216 residues of mouse apoAI and replaces six hydrophobic residues with either polar or smaller hydrophobic residues at the defined positions (V118A/A119S/L121Q/T191S/T195S/T199S). Cross-linking results show that this mutant is greater than 90% monomeric at 8 mg/mL. CD, DSC, and NMR results indicate that the mutant maintains an identical secondary, tertiary structure and stability as those of the wild-type mouse apoAI. Lipid-binding assays suggest that the mutant shares an equal lipoprotein-binding activity as that of the wild-type apoAI. In addition, both the monomeric mutant and the wild-type protein make nearly identical rHDL particles. With this monomeric mouse apoAI, high-quality NMR data has been collected, allowing for the NMR structural determination of lipid-free apoAI. On the basis of these results, we conclude that this apoAI mutant is a monomeric, active apoAI useful for structural determination.     

人类新基因WDR24的研究初报

WD40家族是一类结构保守、功能复杂的蛋白.目前很多研究显示该家族成员通过参与MAPK信号途径调控细胞内信号转导而影响细胞的基本生命活动.为了鉴定参与细胞生命活动的新基因,运用同源基因克隆法,通过PCR技术扩增获得一个新的人类基因WDR24, 其cDNA全长3 302 bp,2 373 bp长的开放阅读框编码由790个氨基酸残基组成的蛋白质.生物信息学分析表明,WDR24蛋白在进化上高度保守,与其他脊椎动物中的同源蛋白组成了一个功能未知的亚家族.蛋白序列分析显示其中有6个WD40重复序列和1个ERK的停泊位点D-domain.RT-PCR分析表明,该基因在所有被检测的人类胚胎组织中表达.     

长江中下游滩地植被与钉螺孳生关系的研究

对由莎草、苔草、狗牙根为优势种组成的杂草群落植被类型、由多种苔草、荻、为优势种组成的苔草、荻群落植被类型和由芦苇、菱笋、蒌蒿及蓼类为优势种组成的芦苇群落植被类型３种长江中下游滩地主要群落植被类型进行了钉螺密度与植被高度、钉螺密度与植被盖度之间的关系。结果表明：杂草群落植被类型,钉螺生存最适宜的植被高度为２２．０５ｃｍ、范围为１５～４７ｃｍ,钉螺生存最适宜的植被盖度为６５．２８％、范围为３５％～９０％;苔草、荻群落植被类型,钉螺生存最适宜的植被高度为２２．６９ｃｍ、范围为２０～３３ｃｍ,钉螺生存最适宜的植被盖度为６７．８０％、范围为３５％～９５％;芦苇群落植被类型,钉螺生存最适宜的植被高度为６４．８２ｃｍ、范围为７２～７８ｃｍ,钉螺生存最适宜植被盖度为６３．９５％、范围为１％～１００％。这一研究结果对通过生态工程措施控制植被因子,实现抑螺防病的策略提供科学依据     

水稻条纹病毒两个分离物RNA4基因间隔区的序列比较

通过RT-PCR扩增了我国水稻条纹病毒(RSV)山东济宁(JN)、云南宜良(YL)两个分离物RNA4基因间隔区(intergenic region,IR)序列,并克隆于pGEM-T easy载体上.序列分析结果表明:JN、YL两分离物RNA4 IR均由654个核苷酸组成,两者之间的同源率为92%.JN、YL两个分离物RNA4 IR在AU碱基富集处可形成两个明显的发夹结构,其中一个序列比较保守,形成的发夹结构稳定;但另一个由于碱基变异导致所形成的发夹结构的稳定性在各个分离物中差异较大.这些结果说明了我国水稻条纹病毒存在明显的分子变异.     

首次报道中国北方Fonsecaea monophora所致着色芽生菌病1例及其相关实验研究

目的首次报道中国北方1例由Fonsecaea monophora所致着色芽生菌病。方法患者男性,58岁,主因"右腕部皮损伴瘙痒8~9a"就诊。对皮损脓液直接镜检,皮损组织病理检查,真菌培养,并对培养获得菌株进行形态学,分子生物学鉴定等实验室研究。结果脓液直接镜检可见多个圆形、厚壁、棕色硬壳细胞,皮损组织病理表现为慢性肉芽肿样改变,并可见硬壳小体。真菌培养可见暗棕色,橄榄色至黑色菌落生长,生长速度较慢,镜下可见枝孢型和喙枝孢型产孢。ITS区序列分析鉴定为Fonsecaea monophora。依据临床及实验室检查确诊该例为Fonsecaea monophora所致的着色芽生菌病。口服伊曲康唑200mg,1次/d;特比萘芬250mg,1次/d。治疗3个月后,皮损消退痊愈。结论 Fonsecaea monophora感染也可见于我国北方地区的着色芽生菌病患者,而ITS区序列分析是该菌种鉴定的重要手段,伊曲康唑联合特比萘芬治疗本例患者显示较好疗效。     

改良早期预警评分对转院转运工作影响的临床研究

目的 研究改良早期预警（MEWS）评分对转院转运工作的影响.方法 在转院转运工作中应用MEWS评分系统对患者进行病情评估,对比其应用前（对照组）、应用后（研究组）转院患者转运途中病情恶化的发生率、患者或家属满意度及医生、护士对实施MEWS评分转运管理模式前（对照组）、后（研究组）满意度的变化.结果 转院患者转运途中病情恶化发生率由应用前（对照组）的10.63%降至应用后（研究组）的3.74%,应用前、后比较差异有显著统计学意义（P＜0.01）;患方满意度则由96%提高至99%,医护人员对实施MEWS评分转运管理模式前、后的满意度由应用前的83.3%提高至应用后的95%,应用前、后比较均有显著性意义（P＜0.05）.结论 MEWS评分能对转院患者的病情进行比较客观、准确的评估,提高了医务人员的质量和医疗干预意识,从而有效降低转院患者转运途中的病情恶化发生率和提高院前医患双方的满意度,是转院转运工作中简便、快捷、客观、实用的病情评估方法和模式,值得推广应用.     

吸虱昆虫群落数量分类及其与小兽宿主的协同进化关系

以云南省16种主要小兽宿主体表吸虱群落为分类单元,以基于共54个群落特征变量的各群落优势虱种的相对优势度D_r、染虱率R_L、虱指数I_L、总染虱率R_LT和总虱指数I_LT及各群落的结构参数（平均丰富度 、平均均匀度 、平均多样性指数 及平均优势度指数 ）来探讨云南省吸虱昆虫与其宿主协同进化的关系。运用SPSS12.0统计软件中的系统聚类分析,对16种主要小兽宿主体表吸虱群落进行数量分析。结果将16种小兽宿主体表吸虱群落分为8个类群。隶属同一个属的小兽,其体表吸虱群落相似程度高,在系统聚类分析中聚为一类; 大多数吸虱群落相似性大小与相应小兽宿主在动物分类上的近缘性高低呈高度一致。结果提示： 吸虱昆虫与其所寄生的小兽宿主存在同步进化的关系,特定的小兽宿主,其体表吸虱群落的构成比较稳定,宿主动物的近缘关系越近,其体表吸虱群落的相似性越高,这是吸虱昆虫与小兽宿主协同进化的一个重要生态学证据。     

三氟氯氰菊酯对棉铃虫神经细胞延迟整流钾电流的抑制作用

用膜片钳技术首次研究了三氟氯氰菊酯对离体培养的棉铃虫中枢神经细胞延迟整流钾通道电流的影响。结果表明,药物作用前有81%和39%的细胞的通道分别在-30 mV 和 -40 mV 激活（n=21）。三氟氯氰菊酯（10^-5 mmol/L）作用15 min后,有63%和38%细胞的通道分别在-40 mV 和 -50 mV 激活（n=8）;作用1 min后电流幅值明显降低,抑制率达到了37.7%（n=19）;加药后激活曲线明显左移且Vh 值变化显著,但k值没有明显变化。实验结果说明,三氟氯氰菊酯作用后,通道更容易激活,但显著抑制电流峰值,导致神经敏感性降低,棉铃虫中枢神经细胞钾通道也是拟除虫菊酯类药物的作用靶标之一。