重组人FOXL2基因的原核表达和纯化研究

目的通过pET32a（＋）原核表达载体,表达重组人叉头框蛋白L2（human forkhead box12,FOXL21）。并且进行纯化和鉴定。方法从正常人血液中提取基因组DNA,利用PCR扩增FOXL21目的基因片段,构建FOXL21原核表达重组质粒[pET32a（＋）-FOXL21]并转化E．coli的BL21（DE3）菌株,IPTG诱导重组蛋白表达,经HisTrap FF亲和层析柱纯化,再通过SDS—PAGE和Western印迹鉴定。结果成功克隆到大小为1131bp的人源FOXL21基因片段并准确插入表达载体pET32a（＋）,0．1mmol／LIPTG诱导转化菌8h可表达大量的FOXL21蛋白,并可经HisTrap FF柱亲和层析得到高度纯化。结论成功获得纯化的66kD重组人FOXL21蛋白,为后续进行FOXL21蛋白的功能研究奠定了基础。     

张家界市部分农作物可食部位硒含量研究

采用国家标准( GB/T5009.93-2003),用荧光分光光度计对张家界市22种农作物40个样本可食部位中的硒含量进行了分析.结果表明,测定的22个种类40个样本均属于富硒及高硒作物,以茶叶的硒平均含量最高为2.0102 mg/kg,其次是豆类平均含量为1.8518 mg/kg,薯类含量最低为1.0240 mg/kg.所测定的各种作物可食部位富硒能力依次为:茶叶2.0102 mg/kg＞豆类(干)1.8518 mg/kg＞水稻、玉米1.5326 mg/kg＞蔬菜类1.3438 mg/kg＞水果类1.0783 mg/kg＞薯类1.0240 mg/kg.该研究确定了部分农作物硒含量的水平及富硒作物品种.     

海芦笋及其生物盐中多酚酸和绿原酸的定量分析

以绿原酸为对照品,利用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别建立了测定海芦笋中多酚酸和绿原酸含量的方法.紫外分光光度法检测波长为338 nm;高效液相色谱法采用Zorbax Eclipse XDB-C187(4.6 mm×150mm,5um),以甲醇和0.5％冰醋酸水溶液梯度洗脱.结果发现海芦笋及其生物盐中含有大量的多酚酸和绿原酸,其中多酚酸含量分别为6.49 g/kg,3.37 g/kg,绿原酸含量分别为0.234 9/kg,0.180 g/kg.同时也表明高效液相色谱法可用于海芦笋中多酚酸含量的确定.这两种简单快捷的定量分析多酚酸和绿原酸的方法,不仅可用于海芦笋及其生物盐产品的质量控制,而且也为海芦笋的进一步研究和开发提供了一定的依据.     

乳酸菌的降血糖作用研究进展

目前乳酸菌的防治糖尿病功效已得到广泛认可.本文综述国内外关于乳酸菌应用于临床糖尿病治疗的研究进展,对乳酸菌可能的降血糖作用机理及物质基础进行了分析总结,并对目前存在的安全性问题和今后研究方向进行探讨,希望为糖尿病防治提供新的思路,为开发新型降糖药物提供一定的理论依据.     

HSCCC-ELSD法分离纯化青葙子中的皂苷

连接有蒸发光散射检测器的高速逆流色谱仪首次成功的应用于制备和分离青葙子中的皂苷celosins A和B.二氯甲烷∶正丁醇∶甲醇∶水(4∶0.3∶3∶2)+0.5％冰醋酸作为洗脱溶剂系统.从半制备型HSCCC收集到的组分进行HPLC分析,可以得到:celosin A纯度为98.9％,celosin B的纯度为98.1％.这是高速逆流色谱仪首次被用于纯化青葙子中的皂苷,两个化合物的结构通过碳谱和质谱来确定.     

超声辅助提取凤丹籽总黄酮的工艺研究

本文以经脱脂处理后的凤丹籽为原料,在单因素实验的基础上,选取乙醇浓度、料液比、超声时间和超声功率为自变量,以总黄酮得率为响应值,采用Box-Behnken响应面设计分析方法优化凤丹籽总黄酮的提取工艺。通过此模型得出:超声时间对凤丹籽总黄酮提取的影响最为显著,超声时间和乙醇浓度,超声时间和料液比,超声时间和超声功率之间的交互作用显著。模型预计凤丹籽总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度75%,料液比1:21 g/mL,超声时间49 min,超声功率240 w,在此条件下,总黄酮得率平均值为9.015 mg/g。     

枇杷蜜中脱落酸、多酚的测定及其指纹图谱的研究

以我国不同产地的10种枇杷蜜中的脱落酸及没食子酸、原儿茶酸、p-香豆酸、阿魏酸、芦丁、柚皮素、山奈酚等13种酚类物质为检测对象,利用高效液相色谱-二极管阵列检测技术(HPLC-DAD)进行检测。采用Welch XtimateTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以5%甲酸水及甲醇为流动相进行梯度洗脱,50 min内能较好地分离14种目标成分。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对所得的图谱数据进行相似度分析,制定枇杷蜜的标准指纹图谱。同时利用掺入不同含量油菜蜜的枇杷蜜图谱数据对标准指纹图谱进行了验证。结果表明,14种目标成分在各自浓度范围内相关性良好(r=0.9990～0.9999);不同品牌枇杷蜜总酚物质分布不同(从263.4μg/100 g到580.3μg/100 g蜂蜜),其中总酚酸含量平均为249.3μg/100 g蜂蜜,显著高于总黄酮的含量(平均为140.9μg/100 g);14种成分在枇杷蜜中的分布不同,其中芦丁、脱落酸、α-儿茶酸含量最高,三者占总物质含量的68.9%;相似度的对比分析可以成功区分出不同程度的枇杷蜜掺假。本研究结果适合枇杷蜜中脱落酸及酚类物质的快速分离检测,制定的枇杷蜜标准指纹图谱可以有效用于单花蜜的品种鉴别及掺假检测,对于枇杷蜜的功能性分析及质量控制有重要的借鉴。     

HPLC法测定积雪草总苷转化产物中积雪草酸B单葡萄糖苷、羟基积雪草酸单葡萄糖苷和积雪草酸单葡萄糖苷的含量

本文建立了积雪草总苷转化产物中积雪草酸B单葡萄糖苷、羟基积雪草酸单葡萄糖苷和积雪草酸单葡萄糖苷含量的测定方法。采用Agilent 1100 Series高效液相色谱仪,Welch Materials,XB-C18(250 mm×4.60 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-4 mmol/Lβ-CD溶液(1～15 min:26∶74;15～45 min:28∶72;45～60 min:29∶71,磷酸调节至pH 2.8)梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为204 nm的方法。积雪草酸B单葡萄糖苷、羟基积雪草酸单葡萄糖苷和积雪草酸单葡萄糖苷依次在0.6～6.0μg、1.24～12.4μg和1.34～13.4μg范围内线性关系良好,Y=335.19X-4.7855(r=0.9999)、Y=303.61X-15.208(0.9998)和Y=281.77X-16.357(0.9999);平均加样回收率(n=6)依次为97.59%、100.19%和100.33%,RSD分别为1.70%、0.91%和0.45%。方法学研究结果表明该方法准确、可靠,适用于积雪草总苷转化产物中积雪草酸B单葡萄糖苷、羟基积雪草酸单葡萄糖苷和积雪草酸单葡萄糖苷的含量测定。     

深圳市生态用地景观连通性动态评价

生态用地是快速城市化地区敏感的土地利用类型,景观连通性是研究景观结构和景观功能互馈关系的重要途径.利用1996-2008年深圳市土地利用数据和基于图论的整体连通性指数、可能连通性指数和斑块重要值,对深圳市生态用地的景观连通性进行动态评价,试图从空间上识别出维持整体景观连通性的重要斑块,并结合深圳市基本生态控制线,评价生态控制线内外生态用地景观连通性的变化.结果表明:1996-2008年,深圳市生态用地全局连通性基本呈下降趋势,维持连通性的重要斑块的重要程度及其分布均发生变化;基本生态控制线对维持线内生态用地的景观连通性发挥了一定作用.     

黄芪注射液对2型糖尿病动物模型KKAy小鼠脑微血管病变的影响

目的：观察黄芪注射液对2型糖尿病动物模型KKAy小鼠脑微血管病变的影响,探讨黄芪注射液对糖尿病脑血管病变的保护作用。方法：饲养至14周龄的雄性KKAy小鼠随机分成模型组和黄芪注射液治疗组（每日腹腔给药,剂量为3mL／kg）,同龄雄性C57BL／6J小鼠作为对照组。血糖仪测量20、24、28周龄时各组小鼠的空腹血糖水平。28周龄时处死各组小鼠,放射免疫法检测血清6-酮-前列腺素-F1α（6-Keto-PGF1α）和血栓素B2（TXB2）的含量。透射电子显微镜观察脑组织超微结构变化。结果：模型组KKAy小鼠从20周龄开始血糖水平明显高于正常组小鼠（P〈0．01）;黄芪治疗组小鼠从20周龄开始血糖水平明显高于正常组小鼠（P〈0．01）,但低于模型组小鼠（P〈0．05或P〈0．01）。模型组小鼠血清6-Keto—PGF1α水平较正常组降低（P〈0．01）,TXB2含量增高（P〈0．01）;与模型组相比,黄芪注射液治疗组小鼠6-Keto—PGF1α水平升高（P〈O．01）,TXB：含量下降（P〈0．01）。透射电镜显示模型组小鼠神经细胞胞核染色质疏松,线粒体肿胀,粗面内质网缩小,核糖体减少;治疗组小鼠以上病变明显改善。结论：黄芪注射液可以有效改善2型糖尿病动物模型KKAv小鼠脑微血管病变,保护神经细胞结构。