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151.
用蛋白质工程方法改变葡萄糖异构酶最适pH和最适温度 总被引:5,自引:2,他引:3
用寡核苷酸诱导的定点突变方法构建了葡萄糖异构酶基因的突变体(N184D和A198C)。含突变体的重组质粒pTKD-GI1(N184D)和pTKD-GI2(A198c)在E.coliK38菌株中表达,用DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S-300HR柱层析分离纯化突变酶。与野生型葡萄糖异构酶比较实验表明:(1)突变酶N184D的最适pH值下降了1个单位;等电点下降了0.6个单位 相似文献
152.
乙肝病毒PreSl片段与乙肝表面抗原羧端的融合表达 总被引:4,自引:0,他引:4
我们利用聚合酶链反应法(PCR)得到了编码乙肝病毒肝细胞受体结合位点PreSl(21 ̄47)的基因片段,并将它分别融合到S基因中相应于第175,188和223位氨基酸残基处。所得到的融合基因插入痘苗病毒表达载体pGJP-5后,在哺乳动物细胞CV-1中进行了暂时表达,对融合蛋白的表达、分泌和抗原性的研究表明,3种融合基因均能表达具有S和PreSl双重抗原性的融合蛋白,但融合位点对表达水平和分泌性质有 相似文献
153.
本文了剑角蝗科窝蝗属1新种:郑氏窝蝗Foveolatacris zhengi,sp.nov。,采自甘肃省南县宝瓶河牧场;并据此对属征作了必要的修订,给出了分种检索表。模式标本保存于陕西师范大学动物研究所。 相似文献
154.
陕西根螨属一新种记述(蜱螨亚纲:粉螨科) 总被引:4,自引:0,他引:4
本文描述根螨属1新种:大蒜根螨Rhizoglyphus allii sp.nov.,模式标本保存在西南农业大学植物保护系。 相似文献
155.
This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed. 相似文献
156.
157.
Y. Pu I. A. Bernstein L. I. Bernstam R. L. Bronaugh 《In vitro cellular & developmental biology. Animal》1995,31(4):283-287
Summary The culture of cutaneous keratinocytes grown on a Puropore nylon microporous membrane at the air-liquid interface has been
shown to be similar to the epidermis in a number of molecular and morphologic characteristics but to exhibit a significantly
greater degree of tritiated water permeation. Various culture conditions have been altered in an effort to improve the water
barrier properties. A Kp value in the range of 5.5±1.6×10−3 has been obtained for 79% of the culturea) by plating 0.9×106 viable basal cells on a piece (13-mm diameter) of membrane for 7 days of submerged growth,b) by placing two membranes on two stacked glass fiber filters (47-mm extra-thick) in a culture dish (60 mm) for 14 days of
growth at the air-liquid interface,c) by replacing the growth medium, i.e., 1 ml of complete minimum essential medium (CMEM) every 24 h after lifting,d) by using 10% fetal bovine serum (FBS) in the CMEM during the submerged culture period and 15% FBS in the CMEM during the
lifted culture period, ande) by adding a dialysis membrane on top and a Puropore nylon membrane below the culture when the cultures were inserted in
the permeation cell for testing. The percentage of cultures with this value for Kp can be increased to 90% if only cultures
with yellow, smooth, and shiny surfaces are tested. This system should be useful as a replacement for skin in testing the
cutaneous permeation of some chemicals.
To whom correspondence should be addressed at 1528 Public Health, The University of Michigan, Ann Arbor, Michigan 48109-2029. 相似文献
158.
凤眼莲能够吸收和在体内聚集外源苯酚,体内的酸含量随着环境中酚浓度的上升而上升。从生长于合酚培养液中的凤眼莲体内能够检测到酚糖苷,说明凤眼莲体内有酚精苷转移酶的存在。浓度小于50mg/L的外源酚能提高凤眼莲体内的多酚氧化酶和过氧化物酶的活性。多酚氯化酶与过氧化物酶在线粒体和微粒体中均有不同程度的分布,而酚糖苷转移酶则不存在于这些细胞器中。 相似文献
159.
本实验构建了在大肠杆菌中能表达玉米叶绿体CF1完整β亚基、缺失N端23个氨基酸残基的β亚基以及完整ε亚基的表达质粒。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westernblot实验表明,在分别含这些表达质粒的细菌中β、ε亚基蛋白的合成量在诱导3h后即达到饱和,其含量各占细菌体总蛋白的10%左右。这些表达产物在细菌体中形成不溶性的包含体。可通过对菌体蛋白的分级分高,将表达产物溶于5mol/L的尿素溶液中。 相似文献
160.
大阪鲫鱼两种卵黄蛋白免疫细胞化学的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以电泳提纯的卵黄脂磷蛋白和卵黄蛋白L制备兔抗两种蛋白的抗血清,采用PAP法对性腺成熟雌性大阪鲫鱼的肝细胞和卵母细胞进行两种蛋白免疫细胞化学位研究。肝细胞的粗面内质网上有强烈的卵黄脂磷蛋白的阳性反应,特别是在线粒体的基质中也发现卵黄脂磷蛋白的阳性反应,而另外一种类似于卵黄高磷蛋白的卵黄蛋白-卵黄蛋白L在肝细胞的粗面内质网和线粒体均呈现阴性反应,提示卵黄脂磷蛋白的前体物质存在于肝细胞的粗面内质网和线粒 相似文献