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191.
从已经建立的易错PCR初级突变文库中筛选得到的16个兼具耐酸、高温稳定、高酶活力的克隆出发,将其作为DNA shuffling的亲本基因,利用DNA shuffling技术,结合易化筛选和96微孔板通量筛选的方法获得耐酸、高温稳定的克隆。并且,对筛选出来的耐酸高温稳定的突变子进行测序分析和同源建模,比较分析β-甘露聚糖酶突变基因序列的生物学信息。经过两轮DNAshuffling,最终筛选得到一个耐酸高温稳定突变体1108,其在90℃时酶活力还能维持在70%;在pH 3.0时酶活力维持在70%;在高温80℃和pH 4.0的条件下,酶活力是野生型的10倍;常规条件下(pH 6.0,40℃),酶活力是野生型酶的5倍。序列比对发现耐酸、高温稳定突变体1108有三个碱基发生了改变(T289A、A535T、T1085C),导致相应的氨基酸发生了改变(Ser97Thr、Val362Ala、Ile179Leu)。根据同源建模结果和氨基酸性质研究发现,突变位点位于催化中心附近,推测第97位的突变与酶的耐酸性和活性有关,第179位和第362位的突变与酶的高温稳定性有关。实验结果为进一步了解β-甘露聚糖酶MAN47的结构与功能之间的关系提供有用参考。 相似文献
192.
DNA疫苗进入细胞后,除了转译成蛋白质抗原,通过MHC分子进行内源性或外源性抗原提呈外,近年来还发现可直接与相应的被称为核酸传感器分子,如TLR9、DAI、AIM2、STING、DDX41解旋酶和RNA聚合酶Ⅲ等结合,继而激活不同的免疫信号通路.基于DNA疫苗的传感器分子和信号通路研制免疫佐剂,可有效增强DNA疫苗的免疫原性. 相似文献
193.
194.
Lj-RGD1来源于日本七鳃鳗口腔腺,富含半胱氨酸并具有RGD(Arg-Gly-Asp)模体.为了验证Lj-RGD1是否具有抑制血小板聚集、抗血管新生等去整合素样典型功能,本文对七鳃鳗Lj-RGD1进行了克隆表达及活性测定.提取七鳃鳗口腔腺中总RNA进行RT-PCR扩增,获得Lj-RGD1的420 bp cDNA.对其进行克隆、表达及组氨酸亲和层析纯化后,获得分子量为169 kD的可溶性蛋白rLj-RGD1.活性测定结果显示,rLj-RGD1呈剂量依赖方式抑制ADP诱导的兔血小板聚集,IC50为123 μmol/L;血管新生抑制实验结果表明,rLj-RGD1能够诱导ECV304细胞凋亡,抑制ECV304细胞增殖和管状物形成,并呈剂量依赖性方式抑制鸡胚胎绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管新生.由此可见,Lj-RGD1具有去整合素样生物活性,在血栓或血管异常新生类疾病治疗中具有应用前景. 相似文献
195.
目的:通过对黑龙江省强制戒毒医疗机构--安康医院人力资源现状调查,掌握该院人力资源数量、质量的特点;了解其医护人员培训状况、流动情况及工作状况;找出目标医院人力资源中存在的问题,并提出改进策略。方法:采用文献法,了解国内外戒毒医疗机构人力资源现状;采用现场问卷调查法、个人深入访谈法对目标医院进行人力资源现状调查;采用头脑风暴法,针对存在的问题,提出改进对策。结果:目标医院医护人员总数为100人,医护比为1:0.85,医护床比为1:0.85:2.78;准入方式为通过公务员考试;目标医院近五年医生年平均调入2.4人,护士年平均调入1.4人;医生年平均调出0.2人;护理人员每天工作超过15小时的占43.3%,每月工作超过22天的占63.3%;医护人员对培训满意度较差,医护人员亟待培训的内容为用药知识、心理治疗、精神科专业知识和最新护理技术与信息的动态知晓、心理护理、仪器设备的操作与简单故障排除;医护人员压力较大,压力源主要为工作环境压力、工作繁忙假期少、患者原因、人际关系及职业发展;职业防护不足;医生、护理人员对工作的总体满意度分别为80%、93.3%,医生、护理人员对薪酬的满意度分别为50%、44%。结论:目标医院医护人员队伍比较稳定;医生数量基本满足工作需要,护理人员匮乏,且工作负荷、压力过大;医护人员培训没有满足实际培训需求;医护人员职业防护的力度、医护人员工作满意度较低。 相似文献
196.
尚振伟李晋姜永帅张明明吕洪超张瑞杰 《现代生物医学进展》2012,12(20):3943-3946
目的:基于已知药物靶点和潜在药物靶点蛋白的一级结构相似性,结合SVM技术研究新的有效的药物靶点预测方法。方法:构造训练样本集,提取蛋白质序列的一级结构特征,进行数据预处理,选择最优核函数,优化参数并进行特征选择,训练最优预测模型,检验模型的预测效果。以G蛋白偶联受体家族的蛋白质为预测集,应用建立的最优分类模型对其进行潜在药物靶点挖掘。结果:基于SVM所建立的最优分类模型预测的平均准确率为81.03%。应用最优分类器对构造的G蛋白预测集进行预测,结果发现预测排位在前20的蛋白质中有多个与疾病相关。特别的,其中有两个G蛋白在治疗靶点数据库(TTD)中显示已作为临床试验的药物靶点。结论:基于SVM和蛋白质序列特征的药物靶点预测方法是有效的,应用该方法预测出的潜在药物靶点能够为发现新的药靶提供参考。 相似文献
197.
目的:探讨封包联合窄波UVB治疗寻常型银屑病疗效及护理方法。方法:自2010年2月至2011年8月到我院治疗的142例寻常型银屑病患者分为两组,治疗组予封包联合窄波UVB治疗并配合精心护理,对照组仅予封包治疗,两组均在治疗6周后观察症状及体征的变化。患者治疗后随访半年。结果:治疗组较对照组第4周PASI评分(4.33±3.23 vs 6.24±3.35)和第6周PASI评分(2.32±2.02 vs 3.68±2.52)明显降低,有统计学差异(P<0.05)。治疗组与对照组有效率分别为85.89%和67.19%,差异有显著统计学意义(P<0.01)。随访半年结果治疗组复发率较对照组少(P<0.05)。结论:封包联合窄波UVB治疗寻常型银屑病并配合精心护理能够取得良好的临床治疗效果。 相似文献
198.
王菲吕楠张奇昕苏靖 《现代生物医学进展》2012,12(22):4205-4207
目的:研究以对苯二甲醛( Terephthalaldehyde)为连接剂的聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)衍生物PEI-Tp对肝癌细胞Hep G2的转染活性和细胞毒性的影响.方法:以荧光素酶质粒作为报告基因,研究高分子和DNA的复合物在Hep G2细胞中的转染活性,用MTT的方法研究高分子对Hep G2细胞的毒性.结果:Hep G2细胞转染结果显示构建的聚乙烯亚胺衍生物PEI-Tp具有高效输送质粒的能力;细胞毒性结果显示PEI-Tp随着浓度的增加,其毒性显著低于PEI25 kDa.结论:Hep G2细胞实验数据显示PEI-Tp是一种高效、低毒,在基因治疗领域有相当前景的非病毒载体. 相似文献
199.
目的:探讨旋转恒定磁场治疗盆腔子宫内膜异位症的效果.方法:选择山东省立医院2008年1月-2009年1月妇科确诊及收治的72例患者.采用双旋磁治疗机对照治疗观察,在月经周期前10天,每天1小时,共3个周期,观察痛经的缓解情况.结果:研究发现治疗组36例患者中完全缓解率为94%,部分缓解率为2.6%,复发率为2.7%,完全缓解率明显高于对照组.结论:旋转磁场治疗盆腔子宫内膜异位症具有安全简便、无痛苦、患者易接受和效果显著的特点,有一定的应用价值. 相似文献
200.
苏杰吕凯荧王鑫瑜冯祯声高勤革 《现代生物医学进展》2012,12(16):3123-3125
目的:探讨Modified Kugel补片治疗腹股沟疝的手术操作要点,并评价其疗效。方法:对2010年1~12月我院应用ModifiedKugel补片行开放性前入路腹膜前修补术的82例临床资料进行回顾性分析。结果:平均手术时间(55±10)min,术后住院(5.2±1.4)d。术后无尿潴留、切口感染等并发症。全组病人伤口一期愈合,无浆液肿及感染发生。术后随访12-23个月,无复发。结论:应用Modified Kugel补片修补腹股沟疝是一种创伤小、无张力、安全的手术方式,术后恢复快,近期疗效满意。 相似文献