RNAi的抗病毒机制及应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)能够在转录水平、翻译水平和转录后水平上抑制病毒的复制,这为临床治疗病毒性疾病奠定了理论基础。近年来,RNAi技术发展迅速,使得RNAi技术应用于病毒性疾病的治疗成为可能。本文从RNAi抗病毒的作用机制及RNAi在抗动物病毒性疾病方面的应用等方面进行综述,并对RNAi在抗病毒方面的应用前景进行展望。     

变铅青链霉菌66中对噬菌ΦHAU3显示抗性的基因（ψHAU3￣R）的核苷酸定序和分析

杂合质粒ｐＩＪ８３１０是链霉菌低拷贝质粒ｐＩＪ９２２１携带了１０．８ｋｂ来自变铅青链霉菌ＪＴ４６菌株,编码对噬菌体ΦＨＡＵ３抗性的ＤＮＡ片段。已知Ｔｎ４５６０插到该克隆中３ｋｂ的ＥｃｏＲＩ或３．３ｋｂ的ＢａｍＨＩ片段（这两个片段之间有２．５ｋｂ的重叠区）上,中断了ΦＨＡＵ３抗性基因的表达。已将３．０ｋｂ的ＢｃｏＡＩ片段分别以两种不同的取向克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）上。核苷酸序列分析揭示出一个１．３ｋｂ的ＯＲＦ的存在,其所编码的４７８个氨基酸组成的蛋白与λ噬菌体的ｅａ５９基因所编码的氨基酸序列显示了高度的同源性,其氨基酸序列的同一性高达３７％,相似性达５８％,而λ噬菌体的ｅａ５９基因是编码赖ＡＴＰ和单键ＤＮＡ的核酸内切酶Ｉ的,该区域与λ的复制无关。此外,这段具有高度同源性的ＤＮＡ区域的Ｇ＋Ｃ％只有６０％,低于变铅青霉菌ＤＮＡＧ＋Ｃ％的平均值（７４％）。     

盐穗木甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH）的克隆及其在盐胁迫下的表达分析

根据我们实验室已发表的植物甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH）的同源保守区设计引物,通过RT—PCR扩增获得了由1503个核苷酸组成的盐穗木BADH基因开放阅读框,推测该基因编码500个氨基酸,分子量约为54．49kDa的多肽。推测的盐穗木BADH氨基酸序列中包含一段甜菜碱醛脱氢酶中高度保守的十肽序列（VTLELGGKSP）以及与酶功能有关的半胱氨酸残基（Cys）。序列比对结果显示,盐穗木BADH与盐地碱蓬、中亚滨藜、盐爪爪以及菠菜等的核苷酸序列同源性在81％以上,与水稻的同源性也达到68％。半定量RT—PCR分析结果表明,盐穗木BADH基因的表达受盐胁迫诱导,推测BADH可能与盐穗木具有较强的耐盐能力有关。     

叶黄素的抗癌作用及其研究现状

叶黄素是自然界广泛存在的类胡萝卜素,可以提高人体的免疫能力,也是一种抗氧化剂,对老年视黄斑退行性变化有很好的预防作用,但更重要的是研究表明,叶黄素对一些类型的癌症具有预防效果。本综述了近年来有关叶黄素预防癌症作用的流行病学调查、分析,以及与癌症关系的实验研究及作用机制等方面的研究进展。     

植物PDR型ABC转运蛋白的结构及功能

ATP-结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白是目前已知最大、功能最广泛的蛋白质家族。多向耐药性(pleiotropic drug resistance,PDR)蛋白是该家族中仅存于植物和真菌中的一个亚族,结构域与其他亚族相反,即核苷酸结合域(nucleotide-binding domain,NBD)位于跨膜结构域(trans-membrane domain,TMD)的N端。目前已发现PDR型转运蛋白具有转运次生代谢产物和参与胁迫反应等方面的功能。植物PDR基因分为5个亚族:I族基因涉及多种生物和非生物胁迫反应,II￣V族基因功能研究甚少。植物PDR基因在器官水平、化学及环境因素影响下具有特异性较好的表达谱。本文系统阐述了植物PDR型转运蛋白基因的进化、结构及其功能,为理解植物PDR型转运蛋白在生物分子转运和复杂生理功能方面提供一个基础框架。     

镉胁迫对拟南芥MLH1基因启动子甲基化的影响

采用重亚硫酸盐测序和结合重亚硫酸盐限制性分析技术研究了镉（Cd）胁迫对拟南芥幼苗错配修复基因MutL—homologue 1（MLH1）启动子甲基化的影响,并结合幼苗的形态和生理指标,筛选Cd胁迫敏感的生物标记物。结果表明：不同浓度（0、0．125、0．25、1．0、3．0mg·L^-1）Cd处理3d对幼苗叶片数、地上部鲜重、地上部叶绿素含量影响不大,根长和地上部可溶性蛋白质含量随Cd浓度的增加较对照显著降低（P〈0．05）,幼苗MLH1启动子甲基化水平随Cd浓度的增加较对照明显上升。以上结果表明,基因舰驯启动子甲基化的变化可作为检测Cd污染对植物遗传毒性效应潜在的、有用的生物标记物。     

超声处理对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生理代谢的影响

为了了解超声处理对霍山石斛类原球茎产生的生理效应,研究了超声波功率和超声时间对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长以及多糖和蛋白质合成的影响;分析了培养基中碳、氮利用、细胞内活性氧水平以及蔗糖转化酶、硝酸还原酶、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性的变化。结果表明,适当功率和时间的超声处理（300 W3 min）能显著促进霍山石斛类原球茎的增殖,最大细胞干重为34．6g·L^-1;明显促进培养基中碳和氮的利用;显著提高胞内可溶性多糖、可溶性蛋白质和H2O2的含量;细胞内蔗糖转化酶、硝酸还原酶以及SOD、CAT和POD的活性明显升高。适当的超声波处理能促进霍山石斛类原球茎的生长发育和提高细胞的生理活性。     

Biosynthesis of Callose and Cellulose by Detergent Extracts of Tobacco Cell Membranes and Quantification of the Polymers Synthesized in vitro

The conditions that favor the in vitro synthesis of cellulose from tobacco BY-2 cell extracts were determined. The procedure leading to the highest yield of cellulose consisted of incubating digitonin extracts of membranes from 11-day-old tobacco BY-2 cells in the presence of 1 mM UDP-glucose, 8 mM Ca2+ and 8 mM Mg2+. Under these conditions, up to nearly 40% of the polysaccharides synthesized in vitro corresponded to cellulose, the other polymer synthesized being callose. Transmission electron microscopy an...     

No Intestinal Stem Cell Regeneration after Complete Progenitor Ablation in Drosophila Adult Midgut

<正>Adult stem cells or progenitors are essential for maintaining the normal structure and function of adult tissues(i.e.,homeostasis).One of the best examples is the adult intestinal epithelium which is constantly renewed by the progeny of intestinal stem cells(ISCs).The proliferation and differentiation of adult stem cells must be tightly controlled in order to maintain resident tissue homeostasis.Mis-regulation of stem     

Exposure of silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) to environmentally relevant levels of cadmium:hematology,muscle physiology,and implications for stock enhancement in the Xiangjiang River (Hunan,China)

Cadmium is a non-essential metal with a wide distribution that has severe toxic effects on aquatic animals. Changes in hematology and muscle physiology were examined in silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) exposed to environmentally relevant levels of cadmium (0.01 mg L-1 ) for 96 h. Cadmium exposure induced significant increases in the red blood cell count, and in the plasma concentrations of cortisol, glucose, and lactate. This suggests that the dose of cadmium was sufficient to cause stress, possibly associated with impaired gas exchange at the gills. There were no changes in hemoglobin concentration or plasma protein concentration. Significant decreases in muscle energy fuels (ATP and glycogen), and increases in muscle lactate persisted until the end of the exposure period, respectively. The changes in muscle lactate and protein in silver carp differed from those observed in response to exposure of fish to cadmium and heavy metals in other studies. The study highlights the importance of selecting unpolluted release sites with suitable water conditions for the survival of newly released individuals for stock enhancement of the Xiangjiang River.