牛SRY蛋白表达纯化与体外功能鉴定

利用PCR技术从北京黑白花奶牛(Bostaurus)的基因组DNA中克隆了SRY(Sex-determiningregionontheYchromosome)基因编码区全长序列。序列分析表明牛SRY基因的HMG区(Highmobilitygroup)呈现高度的保守性,与人、小鼠、猪等的相似性达到70%。将SRY基因与pET-28a( )载体相连,构建表达载体pET-28a/SRY;把该表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导30℃诱导4h,SRY蛋白可高效表达,表达产物占总蛋白量的26%。对表达产物进行了Western-blotting检测,并采用亲和层析技术获得了高纯度的牛SRY蛋白。通过PCR技术分别获得牛、人、鼠的苗勒氏管抑制物(MullerianInhibitingsubstances,MIS)启动子,凝胶阻滞试验证明,牛SRY蛋白可与人及牛的MIS启动子结合,但与鼠的Mis启动子不发生相互作用。     

双重标准差法在昆虫科阶元分类学上的应用

在科分类阶元上对半翅目、鳞翅目和鞘翅目8个科的23种昆虫图像中提取的昆虫面积、周长等11项数学形态特征进行了双重标准差法分析,以评估该方法在昆虫科阶元分类上的应用有效性。结果表明,在科的阶元上11项特征可靠性大小依次为: （似圆度、偏心率、 圆形性>（横轴长、形状参数、叶状性>（面积、周长、球状性> (纵轴长、亮斑数)。科的亲缘关系远近结果显示： 蝽科和缘蝽科关系较近>丽金龟科、天牛科与鳃金龟科关系较近>夜蛾科、大蚕蛾科和粉蝶科关系较近。所得结果与统计假设检验分析所得结果非常相似。     

猴头菌丝多糖降血糖作用研究

目的:研究猴头菌丝多糖的降血糖作用。方法:以液体发酵生产的猴头菌丝体为原料,经热水浸提、浓缩、酒精沉淀获得菌丝粗多糖;以常规降糖药物格列本脲为阳性治疗对照,通过四氧嘧啶诱发小鼠糖尿病的预防试验,比较猴头菌丝多糖各剂量与格列本脲的降血糖效果。结果:猴头菌丝多糖得率为7.14%,粗多糖再经Sevage法去除蛋白质,获得猴头菌丝精多糖(HMP),得率为10.92%;猴头多糖高、中、低三个剂量均能有效的对抗四氧嘧啶诱发的高血糖;其中,高剂量的降血糖作用与格列本脲相比,差异极显著。结论:猴头菌丝多糖对四氧嘧啶型高血糖模型小鼠有降血糖作用,作用效果优于格列本脲,对糖尿病小鼠的胰腺具有一定的保护作用。     

一种基于多特征的大肠杆菌启动子判别算法

主要对从一段DNA序列中提取出信息以判别其中是否含有启动子的问题进行了研究。首先从固定长度的序歹4中提取成分特征和结构特征,然后将这些特征输入到一个非线性分类器中进行判别。测试结果显示,在正集＆非编码区负集中,平均错误率降低为13．4％;在正集＆编码区负集中,平均错误率降低到17．0％。表明该方法是非常有效的。     

基于叶绿素荧光参数的小麦叶片叶绿素相对含量估算方法

叶绿素含量是植物学和农业相关研究领域常用的生理指标.叶绿素含量和叶片光合功能密切相关,但是现有的叶绿素含量的测定方法无法实现叶绿素含量和光合功能的同步测定和关联分析.为解决该问题,本研究通过测定35个小麦品种旗叶的SPAD值和叶绿素荧光诱导动力学曲线,分别使用不同时间的快速叶绿素荧光动力学曲线的荧光值,以及33个常用荧...     

额底纵裂入路手术对鞍上第三脑室底垂体瘤的疗效分析

目的：分析经额底纵裂入路治疗鞍上第三脑室底垂体瘤的疗效,探讨其临床适用性。方法：选择从2011年1月~2013年1月与我院行额底纵裂入路手术治疗的30例鞍上第三脑室底垂体瘤的患者,术中行单侧额或双侧额弧形切口,根据术中所见肿瘤位置,由终板、视神经一颈内动脉等存在的生理间隙处切除肿瘤,观察所有患者的手术疗效。结果：所有患者术中可见肿瘤位于鞍内鞍上,部分或全部突入第三脑室底,其中有6例患者伴有脑积水。术中肿瘤全切23例,次全切5例,大部切除2例,无手术死亡病例。术前25例患者视力减退,术后23例患者视力均获得不同程度改善,仅1例暂无明显变化。术后19例出现电解质紊乱,患者经治疗后均已纠正;12例出现不同程度的尿崩症,给予患者药物治疗后,病情得到缓解。术后随访6个月,23例肿瘤全切患者病灶无复发,另外4例次全切者病灶也无明显变化,仅1例次全切和2例大部切除患者于术后行伽马刀再次治疗。结论：经额底纵裂入路治疗鞍上第三脑室底垂体瘤可以达到视野清晰,直观下进行肿瘤切除,手术效果好,并发症较少,适合临床长期推广应用。     

Overexpression of Arabidopsis acyl‐CoA‐binding protein ACBP2 enhances drought tolerance

Arabidopsis thaliana acyl‐CoA‐binding protein 2 (ACBP2) is a stress‐responsive protein that is also important in embryogenesis. Here, we assign a role for ACBP2 in abscisic acid (ABA) signalling during seed germination, seedling development and the drought response. ACBP2 was induced by ABA and drought, and transgenic Arabidopsis overexpressing ACBP2 (ACBP2‐OXs) showed increased sensitivity to ABA treatment during germination and seedling development. ACBP2‐OXs also displayed improved drought tolerance and ABA‐mediated reactive oxygen species (ROS) production in guard cells, thereby promoting stomatal closure, reducing water loss and enhancing drought tolerance. In contrast, acbp2 mutant plants showed decreased sensitivity to ABA in root development and were more sensitive to drought stress. RNA analyses revealed that ACBP2 overexpression up‐regulated the expression of Respiratory Burst Oxidase Homolog D (AtrbohD) and AtrbohF, two NAD(P)H oxidases essential for ABA‐mediated ROS production, whereas the expression of Hypersensitive to ABA1 (HAB1), an important negative regulator in ABA signalling, was down‐regulated. In addition, transgenic plants expressing ACBP2pro:GUS showed beta‐glucuronidase (GUS) staining in guard cells, confirming a role for ACBP2 at the stomata. These observations support a positive role for ACBP2 in promoting ABA signalling in germination, seedling development and the drought response.     

紫外辐射诱导桃蚜DNA变异

利用微卫星标记技术分析了不同剂量紫外线诱导下桃蚜(Myzus persicae)的DNA变异与分子多态性.根据3种引物的扩增图谱测出反映遗传变异程度的参数——多态位点率和基因多样度,并进行了方差分析和聚类分析.结果表明,不同紫外线照射时间(2、4和6 h)和照射强度(15、30和45 W)处理后,F₁代桃蚜产生可遗传的变异致使F₂代的DNA发生变异,且变异大小是由辐射时间和强度共同决定的 .F₂代对照与2 、4 和6 h的处理平均多态位点率之间差异显著.对于平均基因多样性,除2 h处理外其余处理均与对照差异显著,且2 h 处理低于对照;根据遗传距离将桃蚜分为对照、2 h(15和30 W)和其余处理3大类群,此聚类分析与前述方差结果一致.     

猪α干扰素重组腺病毒的构建及其抗口蹄疫病毒活性研究

本研究利用RT-PCR方法扩增猪α干扰素成熟蛋白基因后构建了重组腺病毒质粒pAd-poIFN-a,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化后获得了重组腺病毒rAd-poIFN-α.该重组腺病毒于HEK-293A细胞连续传代至20代滴度稳定,为107 TCID50/mL.RT-PCR检测证明目的基因在mRNA水平上可有效表达;在PK-15细胞上可以检测到较强的抗猪口蹄疫病毒活性,从而为研究猪口蹄疫免疫防治新技术奠定了重要基础.     

羊FSHR基因5′端转录启动调控区的生物学特性

文章对小尾寒羊、滩羊和澳洲绵羊等繁殖性状不同的3种绵羊与排卵有关的FSHR基因5′端转录启动调控区进行了克隆和分析,通过对FSHR基因的15个转录调控元件序列进行比较,结果表明,羊不同品种FSHR基因的转录调控元件序列之间没有差异。这说明绵羊的品种与FSHR基因5′端转录启动调控区的相关性不强,排除了因转录调控元件突变而影响转录调节能力的可能性。