SD大鼠SDF-1α基因克隆与序列分析

目的克隆SD大鼠SDF-1α基因,并进行生物信息学分析。方法采用RT-PCR扩增SDF-1α基因,对扩增产物进行序列的测定,利用Internet和GenBank数据库对测序结果正确的SDF-1α基因进行生物信息学分析。结果克隆了SDF-1α基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,SDF-1α基因开放读码为270bp,编码89个氨基酸;同源性分析表明,与人、猫、狗的SDF-1α基因同源性最大。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其中脾脏、胰脏表达较高。结论成功克隆SDF-1α基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。     

耐力训练抑制急性低氧时骨骼肌线粒体生物能学变化:ROS和UCP3的作用(英文)

骨骼肌线粒体解耦联蛋白3（uncoupling protein3,UCP3）在低氧时的生理作用尚不清楚。本研究观察了大鼠在耐力训练前后,模拟急性高原低氧各时间点的骨骼肌线粒体UCP3 mRNA和蛋白表达、线粒体呼吸功能、活性氧（reactive oxygen species,ROS）产生速率以及锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,MnSOD）表达和活性的变化。急性低氧导致线粒体一系列生物能学功能障碍。未训练大鼠UCP3蛋白在4h时比静息时升高了60％,而MnSOD蛋白含量及活性在低氧暴露过程中无显著变化;UCP3蛋白上调通过降低电子传递链耦联程度抑制O2-产生,但同时降低了ATP合成效率。耐力训练显著抑制急性低氧诱导的骨骼肌UCP3蛋白上调（67％;S42％）。训练组大鼠的ROS产生速率在低氧2h、4h和6h时显著低于未训练组;MnSOD蛋白含量及活性分别较术训练组提高了50％和34％。训练组人鼠MnSOD上调可增加线粒体对ROS的耐受力,进而抑制UCP3蛋白表达,从而提高氧化磷酸化效率。急性低氧中,未训练组大鼠呼吸控制比（respiratory control ratio,RCR）和磷氧比（ADP to oxygen consumption ratio,P／O）显著降低,而训练组RCR和P／O保持相对稳定。以上结果提示：（1）模拟急性高原低氧可诱导UCP3 mRNA及蛋白表达升高,从而降低升高了的线粒体膜电位（△ψ）,使ROS的产生减少;（2）耐力训练可抑制低氧诱导的UCP3表达上调,提高ROS酶学清除能力,从而提高线粒体氧化磷酸化效率。     

花蝽科中国二新种及二新纪录种记述(半翅目,异翅亚目)

记述花蝽科Anthocoridae2新种:阿拉善肩花蝽Tetraphleps alashanensis sp.nov.,五斑肩花蝽Tetraphleps maculatus sp.nov.,小花蝽属Orius Wolff中国2新纪录种:细鞭小花蝽Orius laticollis laticollis(Reuter),西伯利亚小花蝽Oriussibiricus Wagner。模式标本保存于内蒙古师范大学昆虫研究所标本馆。     

siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响

研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-u6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-time PCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PDA).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD△的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase.3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨.     

AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响

探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5 mg/(kg·2d))和对照组(PBS 0.1 ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Western blot检测内皮祖细胞上CXCR4 mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达.     

大蒜秸秆水浸液的抑菌作用和抑茵成分初步分析

以不同浓度的大蒜秸秆水浸液对西瓜枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒疫霉病菌进行抑菌圈试验,并对3种不同的大蒜秸秆萃取液中的可挥发抑菌物质进行鉴定,以了解大蒜秸秆水浸液的抑菌作用。结果表明,大蒜秸秆水浸液对3种靶标菌均有抑菌活性,其最有效的抑菌浓度为100 g.L-1,对辣椒疫霉病菌的抑菌活性最强。大蒜秸秆水浸液的石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯3种有机溶剂萃取相对3种靶标菌均有抑菌活性,以乙酸乙酯相抑菌活性最强,在50 g.L-1浓度下对辣椒疫霉菌抑菌率达100%,在100 g.L-1浓度下对西瓜枯萎病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率也达100%;三氯甲烷相的抑菌活性稍高于石油醚相;抑菌活性基本随浓度增加而增大。经GC-MS分析,初步确定大蒜秸秆水浸液中的可挥发抑菌物质主要有2-甲氧基-1,6-己二酸甲酯、邻苯二甲酸二丁酯等有机酯类,3-甲氧基-4-羟基-苯甲酸、对羟基苯甲酸等有机酸,以及对甲氧基苯酚等酚类化合物。     

广东横石水河流域溪流大型底栖动物漂流的昼夜节律

比较了广东横石水河流域二条相邻的3级溪流大型底栖动物的漂流种类组成及昼夜节律,其中一条溪流受广东大宝山矿外排的酸性矿山废水严重污染,水体pH值仅为3.45且重金属严重超标,而另一条为相邻的清洁溪流.结果表明：清洁溪流中大型底栖动物的数量和种类远比受酸性矿山废水污染的溪流丰富.在清洁溪流中共采获漂流底栖动物6 871头,隶属10目52类群,其中水生昆虫的数量和种类占绝对优势 (99.5%).但总漂流密度占优势的类群（相对多度超过5%）不多,主要集中在以下几种水生昆虫：七鳃假二翅蜉 (28.5%)、宜兴似动蜉 (13.8%)、短脉纹石蛾(13.2%)、白背锯形蜉（7.5%)、摇蚊科(6.5%) 和肖扁泥甲(5.0%).蜉蝣目种类和数量最多,占全部漂流底栖动物总个体数的65%,其中又以四节蜉科居多,占蜉蝣目总个体数的63%.毛翅目昆虫的数量（18%）仅次于蜉蝣目.大型底栖动物的漂流表现出明显的昼夜节律,漂流主要在夜间进行,未发现有日漂者.漂流密度高峰出现在21:00和2:00,漂流密度分别为（70.3±10.8）和（289.0±124.6） 头·100 m^-3.大多数优势种类漂流高峰出现的时段略有不同,但有些优势种类（如摇蚊科和肖扁泥甲）并未表现出明显的漂流昼夜差异.在受酸性矿山废水污染的溪流中,漂流动物只有1种嗜酸性的多足摇蚊,其漂流活动也在夜间进行,并有3个明显的漂流高峰,分别出现在19:00、0:00和4:00,最高漂流密度仅为（6.7±5.2)头·100m^-3.说明酸性矿山废水不仅降低了溪流中漂流底栖动物的物种多样性和数量,也改变了其漂流模式.     

生物富硒对灵芝营养成分的影响

在人工栽培灵芝中,通过外施硒盐以生物转化法获得富硒灵芝,以不同含硒量的富硒灵芝子实体为试样,系统研究了灵芝生物富硒后对其主要营养成分多糖、蛋白质、氨基酸和矿物质等的影响。结果表明：硒可以明显提高灵芝中多糖、蛋白质以及氨基酸的含量,但并不改变灵芝蛋白质的分布和蛋白质中氨基酸的组成配比,而对矿质元素则有不同的影响,如富硒灵芝子实体中人体必需微量营养元素硒有极明显地增加,而铜和钼等人体必需微量元素的含量有一定量的增加,但铁、钙、锶等矿质元素的含量则有所下降。     

水稻品种中抗褐飞虱抗原次生物质的分析

借助高效液相色谱(HPLC)技术,研究了130份对褐飞虱生物型Ⅱ具有不同抗性水平的水稻样品(26个品种)中13个次生物质含量(峰面积)的差异;运用主成分分析和多元回归分析,建立了水稻品种抗性级别的预测模型:Y=3.4593-0.02491X₁+0.08475X₂-0.04227X₈+0.1174X₁₂.结果表明,水稻的抗性水平与峰面积值之间极显著相关(r²=0.84,P<0.01),峰1、峰2、峰8、峰12对应的次生化合物是影响水稻对褐飞虱生物型Ⅱ抗性水平的主要抗原次生化合物;水稻品种中起抗虫作用的抗原次生物质不止一种,而是几种的组合,而且它们对水稻抗虫性的贡献权重是不完全相同的.     

论浙西生态旅游线构建

通过对浙西地区旅游资源、地理位置与市场分析 ,提出构建浙西生态旅游线的必要性。在构建过程中 ,采用三大战略 :空间战略立足品牌景点 ,联络周边旅游线 ,发展资源丰富地段 ;形象战略利用品牌效应 ,宣传旅游形象 ,立足资源特色 ,提出恰当的旅游形象口号 ;产品战略以地方特色为前提 ,树立产品风格 ,开发各类旅游产品。