全文获取类型
收费全文 | 867篇 |
免费 | 103篇 |
国内免费 | 589篇 |
专业分类
1559篇 |
出版年
2024年 | 9篇 |
2023年 | 25篇 |
2022年 | 44篇 |
2021年 | 59篇 |
2020年 | 50篇 |
2019年 | 70篇 |
2018年 | 48篇 |
2017年 | 39篇 |
2016年 | 27篇 |
2015年 | 41篇 |
2014年 | 66篇 |
2013年 | 74篇 |
2012年 | 97篇 |
2011年 | 88篇 |
2010年 | 90篇 |
2009年 | 74篇 |
2008年 | 89篇 |
2007年 | 84篇 |
2006年 | 77篇 |
2005年 | 63篇 |
2004年 | 53篇 |
2003年 | 42篇 |
2002年 | 37篇 |
2001年 | 41篇 |
2000年 | 35篇 |
1999年 | 33篇 |
1998年 | 12篇 |
1997年 | 7篇 |
1996年 | 9篇 |
1995年 | 2篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 7篇 |
1992年 | 7篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 5篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 5篇 |
1985年 | 3篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 2篇 |
1971年 | 2篇 |
1957年 | 2篇 |
1954年 | 1篇 |
1952年 | 1篇 |
1951年 | 2篇 |
1950年 | 2篇 |
1949年 | 1篇 |
排序方式: 共有1559条查询结果,搜索用时 15 毫秒
61.
62.
63.
闽江口芦苇沼泽湿地土壤产甲烷菌群落结构的垂直分布 总被引:3,自引:0,他引:3
应用PCR-RFLP技术及测序分析对闽江口芦苇湿地土壤产甲烷菌群落结构的垂直分布特征进行了研究。在构建的6个克隆文库中,每个克隆文库随机挑选100个克隆进行菌落PCR验证,共得到591个阳性克隆。PCR产物经限制性内切酶MspⅠ进行RFLP分析后得到37个不同的分类操作单元(OTUs)。对37个克隆子进行了序列测定,与GenBank数据库中的序列进行比对,最近相似性在91%—99%之间。RFLP分析和系统发育分析表明,闽江口芦苇湿地土壤中产甲烷菌群落包括3大类群:甲烷杆菌目(Methanobacteriales)、甲烷微菌目(Methanomirobiales)和甲烷八叠球菌目(Methanosarcinales)。不同土壤深度中产甲烷菌群落的分布呈现出不同的特征。土壤表层(0—10 cm)优势产甲烷菌类群为Methanoregula,约占76%;10—20 cm土层主要的产甲烷菌类群为Methanolinea和Methanoregula,分别约占23%和29%;20—30cm土层优势的产甲烷菌类群为Methanolinea,约占66%。Shannon指数(H’)和Simpson多样性指教(D)表明,10—20cm土层产甲烷菌多样性高于土壤表层(0—10 cm)和20—30 cm土层。37个测序OTUs中有26个OTUs属于不可培养的产甲烷菌序列,表明闽江口芦苇湿地土壤中存在大量不可培养的产甲烷菌。 相似文献
64.
氮素限制在陆地生态系统中普遍存在,在干旱受损生态系统中表现得尤为明显.生物土壤结皮是干旱、半干旱区受损生态系统植被恢复过程中的重要组成部分和氮源贡献者.以黑岱沟露天煤矿植被恢复区广泛分布的两类典型生物土壤结皮(藻类结皮和藓类结皮)为研究对象,通过野外调查采集样品,在实验室条件下测定了两类结皮的固氮活性,分析了其固氮活性对水热因子的响应特征及其与草本、结皮盖度的关系.结果表明:不同演替阶段人工植被及相邻撂荒地和天然植被下生物土壤结皮的固氮活性在9~150 μmol C2H4·m-2·h-1,藻类结皮(平均为77 μmol C2H4·m-2·h-1)显著高于藓类结皮(17 μmol C2H4·m-2·h-1).人工植被区3种常见植被类型下藻类和藓类结皮固氮活性均表现为“灌-草型”显著高于“乔-灌型”和“乔-灌-草型”.藻类和藓类结皮的固氮活性与样品相对含水量(10%~100%)和培养温度(5~45 ℃)均呈显著的二次函数关系,其固氮活性随水分、温度升高均呈先上升后下降的趋势,分别在60%和80%相对含水量时达到最大固氮速率,其最适固氮温度均为25 ℃.藻类结皮固氮活性与草本盖度呈显著的二次函数关系,草本盖度超过20%时固氮活性开始降低,藓类结皮固氮活性与草本植物盖度呈显著负相关.两类结皮固氮活性与其盖度均呈显著的正相关关系,随结皮盖度增加其固氮活性显著升高.露天煤矿植被恢复区两类生物土壤结皮固氮活性差异主要由结皮组成生物体即隐花植物的差异所致,不同植被类型下的水热差异及不同植被演替阶段草本、结皮盖度的差异是影响生物土壤结皮氮固定的关键因子,生物土壤结皮在人工植被区的拓殖发育及其氮输入是系统健康发展的重要标志. 相似文献
65.
目的:优化SD大鼠胰岛细胞的分离、纯化和培养方法与条件,为研究miR-126在Ⅱ型糖尿病中的作用机制提供活性与功能良好的胰岛细胞及miR-126表达的检测方法。方法:水合氯醛腹腔注射麻醉SD大鼠,采用8 mL胶原酶Ⅴ(含DNaseⅠ100 U)逆行注射、原位消化后Hitopaque-1077梯度离心分离纯化SD大鼠胰岛细胞,从培养后的胰岛细胞中提取总RNA,分别用加尾法和茎环法进行miR-126的反转录,实时定量PCR(qPCR)检测miR-126的表达量。结果:用该方法可从每只SD大鼠中分离、纯化得到胰岛细胞372±45个,胰岛细胞纯度90%,胰岛细胞存活率95%;用加尾法和茎环法qPCR检测miR-126的Cp值分别为34.56±2.56和32.47±2.01。结论:胶原酶Ⅴ(含DNaseⅠ100 U)逆行注射、原位消化可有效避免因消化时胶状物质的产生而导致的胰岛细胞分离失败,Hitopque-1077梯度离心分离方法具有操作简单、便捷、成功率高等特点,可得到活性与功能较好的胰岛细胞;与加尾法相比,茎环法能够更灵敏地检测胰岛细胞miR-126的表达量。 相似文献
66.
Double-gating mechanism and diversity of an adenosine triphosphate (ATP)-sensitive K~ channel in neurons acutely dissociated from rat neocortex 总被引:2,自引:0,他引:2
Classically, ion channels are classified into 2 groups: chemical-sensitive (ligand-gated) and voltage-sensitive channels. Single ATP-sensitive K (K-ATP) channel currents were recorded in acutely dissociated rat neo-cortical neurons using patch clamp technique. A type of K-ATP channel has been found to be gated not only by intra-cellular ATP, but also by membrane potential ( Vm) , and proved to be a novel mechanism underlying the gating of ion channels, namely bi-gating mechanism. The results also show that the K-ATP channels possess heterogeneity and di-versity. These types of K-ATP channels have been identified in 40.12% of all patches, which are different in activa-tion-threshold and voltage-sensitivity. The present experiment studied the type-3 K-ATP channel with a unitary con-ductance of about 80 pS in detail ( n = 15). Taking account of all the available data, a variety of K-ATP channels are suggested to exist in body, and one type of them is bi-gated by both chemical substances and membrane poten 相似文献
67.
猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。 相似文献
68.
循环肿瘤细胞(CTCs)是导致肿瘤转移的主要原因,它在外周血中的含量与乳腺癌的转移、治疗和预后有密切的关系.本文对于CTCs的概念、检测方法、以及作为肿瘤转移预测指标的优势进行了综述.并对其在临床上的运用前景进行了展望. 相似文献
69.
70.
为寻找一种生产周期短、分离效果好、易操作的纯化黄酮的方法,本研究利用黄酮与金属能形成络合物的性质,从反应体系溶剂、金属盐、解络合剂的添加量优化了络合法纯化银杏黄酮的工艺。结果表明,pH值对络合反应的发生及最终产品的性质具有很重要的影响。金属络合纯化法的最佳工艺条件为:以100 mL甲醇为溶剂,黄酮浓度为2.4 mg/mL,0.20 g硫酸锌为络合剂,反应溶液pH值为9.50,0.2 g EDTA为解络合剂,可以使银杏提取物中黄酮含量由24%提高到55%,得率为58%。 相似文献