全文获取类型
收费全文 | 2408篇 |
免费 | 356篇 |
国内免费 | 1549篇 |
出版年
2024年 | 33篇 |
2023年 | 96篇 |
2022年 | 143篇 |
2021年 | 171篇 |
2020年 | 150篇 |
2019年 | 164篇 |
2018年 | 126篇 |
2017年 | 117篇 |
2016年 | 131篇 |
2015年 | 152篇 |
2014年 | 220篇 |
2013年 | 186篇 |
2012年 | 265篇 |
2011年 | 309篇 |
2010年 | 246篇 |
2009年 | 267篇 |
2008年 | 232篇 |
2007年 | 228篇 |
2006年 | 211篇 |
2005年 | 162篇 |
2004年 | 131篇 |
2003年 | 108篇 |
2002年 | 99篇 |
2001年 | 75篇 |
2000年 | 88篇 |
1999年 | 46篇 |
1998年 | 34篇 |
1997年 | 21篇 |
1996年 | 18篇 |
1995年 | 17篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 8篇 |
1992年 | 10篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 9篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 3篇 |
1986年 | 4篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 6篇 |
1981年 | 2篇 |
1980年 | 1篇 |
1979年 | 1篇 |
1950年 | 1篇 |
排序方式: 共有4313条查询结果,搜索用时 15 毫秒
971.
用噬菌体随机肽库筛选SARS冠状病毒S蛋白单克隆抗体2C5的模拟表位 总被引:1,自引:0,他引:1
SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克隆展示有共同的7肽序列TPEQQFT。展示有该序列的噬菌体克隆能竞争抑制SARS-CoVS蛋白抗原与单抗2C5的结合。结果表明TPEQQFT为单克隆抗体2C5的模拟表位。该结果可对进一步研究S蛋白结构与功能和设计SARS疫苗有一定的参考意义。 相似文献
972.
胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨血管发育早期血管平滑肌细胞(VSMCs)募集和增殖特点,构建了含有SM22α启动子序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码序列的质粒,建立了平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下稳定表达EGFP的胚胎干细胞株(ESCs),以研究VSMCs的发育特点.实验发现,起源于SM22α-EGFPESCs形成的胚胎小体(EBs)在第11天开启SM22α启动子并表达EGFP.此后EGFP阳性细胞持续增加,在第30天达到高峰.VSMCs多起源于EBs中细胞密集处,应用免疫荧光染色及RT-PCR观察到EGFP阳性细胞表达多种平滑肌特异性标志物.在贴壁培养的胚胎小体中VSMCs形态可分为纺锤形及上皮样的多角形,慢速视频显微摄像测得纺锤形细胞迁移速度较上皮形细胞快.以上结果表明,SM22α-EGFPESCs分化形成的EBs可以模拟体内早期胚胎血管形成过程,从形态学上获得VSMCs募集分化的证据. 相似文献
973.
为研究蒙椴(Tilia mongolica Maxim.)树皮的化学成分,通过溶剂萃取、硅胶柱色谱、重结晶分离纯化,从蒙椴树皮中分离得到7个化合物,根据其红外光谱、质谱和核磁共振谱数据鉴定为β-香树脂醇乙酸酯(1),计曼尼醇乙酸酯(2),羽扇豆醇(3),二十四碳酸(4),三棕榈酸甘油酯(5),β-谷甾醇(6),胡萝卜苷(7)。其中化合物1-5、7均为首次从椴树属植物中分离得到,化合物6为首次从该植物中分离得到。 相似文献
974.
本研究将已构建好的、包含口蹄疫病毒P1+2A基因的重组表达质粒pQE—Tri/PI+2A经质脂体2000转染哺乳动物细胞BHK-21,转染后一定时间进行检测。通过SDS—PAGE、Western—blotting、荧光抗体染色、ELISA等检测方法表明,FMDVPI+2A基因片段在BHK-21细胞中成功表达,表达的蛋白能被口蹄疫阳性血清所识别而且具有良好的生物学活性。这一结果的取得,为进一步研制新型口蹄疫基因工疫苗及其配套诊断试剂奠定了基础。 相似文献
975.
本研究将已构建好的、包含口蹄疫病毒P1 2A基因的重组表达质粒pQE-Tri/P1 2A经质脂体2000转染哺乳动物细胞BHK-21,转染后一定时间进行检测。通过SDS-PAGE、Western-blotting、荧光抗体染色、ELISA等检测方法表明,FMDVP1 2A基因片段在BHK-21细胞中成功表达,表达的蛋白能被口蹄疫阳性血清所识别而且具有良好的生物学活性。这一结果的取得,为进一步研制新型口蹄疫基因工疫苗及其配套诊断试剂奠定了基础。 相似文献
976.
977.
绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定 总被引:3,自引:1,他引:2
目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP—C1—hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP—C1—hri,用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测其表达。结果pEGFP—C1—hri中插入了hri序列,绿色荧光高效表达于B16细胞浆中。结论pEGFP—C1—hri表达载体已成功构建。 相似文献
978.
长白山针阔叶混交林带花粉通量及垂直散布年际对比 总被引:1,自引:0,他引:1
长白山针阔叶混交林一号样地2005和2006年气象塔不同高度捕捉器样品花粉分析对比表明:连续两年花粉组成都足以乔木花粉为主,但存在差异,06年乔木花粉百分比较高,灌木、草本较低,同时06年花粉通量也较高,可能与05年花期降水较多,温度较低,花粉产量低有关.连续两年花粉通量在垂直高度上具有较高的一致性,特别是主要乔木花粉类型(白蜡属、桦、栎、松属花粉).这一结果有助于更好理解表土花粉对植被的指示性,森林表土样品中的草本、低矮灌木花粉类型,应主要来自样品点附近的植物;样品中的乔木、较高灌丛花粉类型,可能来自样品点附近或更大范围植物;区域性植物对花粉组合也有一定影响. 相似文献
979.
GSTs在植物非生物逆境胁迫中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
植物在生长过程中会面临各种各样的胁迫,为了自我保护,植物进化出了多种抵御胁迫的策略。植物谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferases,GSTs,EC2.5.1.18)可以催化亲核性的谷胱甘肽(glutathione,GSH)与各种亲电子外源化学物的结合反应,降低细胞体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,从而减轻非生物胁迫对植物的损伤。本文主要概述了GSTs在植物抗非生物胁迫的作用。 相似文献
980.
巴戟天花药发育过程中多糖和脂滴分布特征 总被引:1,自引:0,他引:1
巴戟天花药发育中多糖和脂滴类物质的分布呈现一定的规律:减数分裂之前,花药壁的绒毡层细胞中有少量脂滴,其他细胞中脂滴和淀粉粒都很少。四分体时期,四分体小孢子中开始出现脂滴,绒毡层细胞中的脂滴较以前增加,其他细胞中的脂滴和淀粉粒仍然很少。小孢子早期,游离小孢子在其表面形成了花粉外壁,靠外壁下方有一层周缘分布的多糖物质。绒毡层细胞中的脂滴明显减少。发育晚期的小孢子中形成一个大液泡,细胞质中出现淀粉粒;同时在药壁和药隔组织中也出现了淀粉粒。此时绒毡层退化。在二胞花粉早期,花粉中积累了大量淀粉粒和一些脂滴。但在成熟的花粉中(二胞花粉晚期),淀粉粒消失,只有一定数量的脂滴保留。巴戟天成熟花粉中积累的营养物质主要为脂滴。 相似文献