北京油鸡ADSL基因的克隆、表达及其结构与功能分析

采用RT-PCR与RACE方法扩增出北京油鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)基因全长cDNA序列,亚克隆和序列分析结果表明:该基因开放阅读框长为1455个碱基,编码485个氨基酸;5'端非转录调控区具有典型管家基因的特征,在临近起始密码子27号碱基发生C→T突变,该突变使得本来小是核呼吸因子2(NRF-2)结合位点的CTCC突变为NRF-2结合位点CTTC.将ADSL基因完整斤放阅读框重组至融合表达载体pGEX-4T-l中,构建成北京油鸡ADSL基因融合表达载体pOEX-ADSL,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达.经SDS-PAGE电泳显示重组融合蛋白在约80.5kD处有特异蛋白条带出现,与预期分子量大小一致,等电点为6.79.该蛋白的表达最随诱导时间的延长而增加,5h达最高值,达到细胞总蛋白的26.9%,且主要以不可溶的包涵体形式存在,经优化表达条件,成功地获得了可溶性的融合蛋白,经Glutathione Sepharase 4B凝胶纯化后Western blotting检测表明其为北京油鸡ADSL蛋白,为其进一步的生物学功能及其应用研究鉴定基础.     

MNP—SH复合物一步法快速分离和纯化mRNA的新方法

本文建立了一种快速分离和纯化mRNA的新方法。为避免RT—PCR实验中mRNA降解问题,我们使用磁性纳米粒子,快速有效的从培齐的细胞、组织以及脐带血中分离出带有ploy（A）＋结尾的mRNA用于实验。研究结果表明,磁性纳米粒子经过修饰连接Oligo（dT）16可直接分离mRNA,其方法操作简单,快捷、省时,可有效地用于基因表达的研究。     

55例早期食管癌浸润深度的临床病理因素分析

目的:探讨早期食管癌的浸润深度的临床病理因素。方法:对术前胃镜发现、术后病理证实的55例早期食管癌进行统计,分析早期食管癌内镜下表现、肿瘤分化程度、淋巴转移与浸润深度之间的关系。结果:表面扩散生长型、腔内生长型高度<5mm、双向生长型高度<2mm及壁内生长型深度<0.5mm提示黏膜内癌。腔内生长型高度≥5mm、壁内生长型高度≥0.5mm、双向生长型高度≥2mm及混合生长型提示黏膜下癌。肿瘤分化程度与浸润深度呈负相关。4例淋巴结转移及2例淋巴管癌栓,其中1例为黏膜癌。5例为黏膜下层癌,原位癌均未发生转移。结论:内镜下表现与浸润深度有密切关系,肿瘤恶性程度越高则越易向深层浸润,浸润越深淋巴结转移率越高。     

肿瘤局部切除加125Ⅰ残瘤间植入治疗肝门部胆管癌

目的:探讨晚期肝门部胆管癌的治疗方法.方法:肝门部胆管癌9例,肿瘤局部切除,胆肠吻合,吻合口后壁采用血管吻合线无创吻合,残余肿瘤125I组织间植入持续、精确、适形的放射治疗.结果:所有患者术后恢复良好,黄痘于1-2月后基本消退,未出现胆漏及胆管炎等并发症,随访2-18月,全部存活.结论:肝门部胆管癌肿瘤局部切除,胆肠吻合时后壁采用血管吻合线吻合,可以简化手术;125I组织间植入治疗残余肿瘤安全,有效,操作简单,对于胆管癌行肿瘤姑息性切除者,可降低术后复发,提高生存率.     

肺部感染对支气管封堵治疗影响的实验研究

目的:探讨肺部感染对支气管封堵治疗影响的动物实验性研究。方法:取健康杂种犬18条,分为3组(A、B、C组)(n=6),经支气管镜每只犬置入致密螺栓状支气管封堵器2枚,其中A、B组为肺部感染组,C组仅为单纯封堵(A、C组封堵后使用抗生素,而B组封堵后未使用抗生素)。观察实验动物的耐受性,定期复查血象、支气管镜、胸部CT扫描,8周后观察封堵器附近支气管组织及远端肺组织变化。结果:观察期内,除1例因给药管不慎封堵入靶支气管内而死亡外,其余犬耐受性良好;截至封堵第8周,36只封堵器中,脱落共有0只(0/36)。胸部CT扫描和组织病理学检查证实,部分封堵的肺叶有萎陷,封堵部位远端肺泡腔缩小,5例封堵部位及其周围有轻度阻塞性炎症改变,未出现肺脓肿及坏死。肺部感染因素对犬的恢复有延迟;而感染组术后肌注抗生素与否,并未能缩短实验动物的不适反应过程,亦未能预防或减少阻塞性炎症的发生。结论:试制的支气管封堵器置入方便,组织相容性好;无论单纯封堵还是肺部感染组的封堵,各组实验动物均有较好的耐受性,但是肺部感染因素对犬的恢复有延迟;肺部感染组术后肌注抗生素与否,对提高动物的耐受程度无明显作用。     

高频电磁辐射对生殖系统损伤的研究

本文对关于微波和移动电话辐射等高频电磁辐射对生殖系统的损伤的研究加以总结,系统研究高频辐射对生殖的影响.     

植物环蛋白的结构

简要介绍了植物环蛋白的定义、结构特点、研究历史、分布、提取分离方法、化学合成与生物合成、生物活性与生物功能。并主要以从紫花蔓地丁( Viola labridorica) 中分离得到的六个环蛋白之一, cycloviolacin O2 为例介绍通过还原酶解- 质谱与二维核磁共振谱结合鉴定环蛋白结构的研究方法。     

丘陵区生态农业旅游的垂直景观生态研究

针对城郊丘陵区的地貌特征,生态农业旅游景观应按坡度和等高线布置,形成山顶水保林带、坡上桃树带、坡中枇杷带、坡下特种瓜果带、山底特色水域带的垂直生态景观模式。这种模式不仅具有良好的景观效果,也产生了很好的生态效益。试验区植被覆盖率显著提高,物种多样性得到了恢复,景观林带内的气温和土温降低、温度日变幅减少、空气相对湿度增加,这种效果由弱至强依次表现为农作地、水保林、经果林。果园自然生草、种植牧草后有利于降低土壤和空气温度、减少温度日变幅、增加空气相对湿度和防治水土流失的效果。     

丹参注射液对链霉素耳中毒豚鼠耳蜗iNOS表达的影响

目的: 探讨链霉素(SM)耳中毒过程中豚鼠耳蜗iNOS表达,以及丹参注射液(DS)的拮抗作用.方法: 应用光镜、电镜、免疫组化及图像分析技术,结合听性脑干反应(ABR)测试.结果: 用药10d后,SM组ABR阈值明显升高,DS SM组ABR阈值明显低于SM组,差异显著(P<0.01).光镜及电镜下可见SM组柯蒂氏器、内外毛细胞、螺旋神经节细胞、血管纹损伤严重,DS SM组损伤较轻.SM组iNOS在柯蒂氏器、内外毛细胞、螺旋神经节、血管纹的表达明显高于DS SM组.结论: SM耳中毒时ABR阈值升高,iNOS表达增强.DS能有效的降低SM所致的ABR阈值升高,并抑制iNOS的过量表达,从而减轻SM的耳毒性损伤,提示DS对SM耳毒性损伤有保护作用.