中国疣粒野生稻的分布、濒危现状和保护前景

继1978-1982年全国野生稻普查后,又一次对中国疣粒野生稻（Oryza granulata (Nees et Arn.Ex Watt.））主要分布点的居群特征、濒危现状和破坏情况进行了野外生态学研究。由于行政区划的改变,目前疣粒野生稻在中国分布的市（县）达30个。它在群落盖度为90%-210%下生长良好,具有抗旱和适应中度干扰的能力。聚集参数分析表明在群落中居群以集群分布为主。该物种主要通过重力和动物传播种子,居群间的基因流有限,形成了典型的集合种群（metapoulation）结构。生境丧失对疣粒野生稻的生长造成非常严重的后果,巳有12.9%的疣粒野生稻居群灭绝,83.9%的居群处于中度和重度的干扰之下。由于各地区的破坏程度不平衡,目前疣粒野生稻的分布被压缩到海南省的西南部山区和云南省和澜沧江中下游、南汀河流域,面临热区开发的巨大威胁。研究中建立了中国疣粒野生稻的总DNA库,作为易位保护的手段之一和开展保护遗传学研究的基础;并讨论了居群遗传结构与居群分布格局之间的相互关系和保护中需注意的问题。     

中国家驴的非洲起源研究

对我国13个家驴品种367条序列(其中引用文献资料241条)的mtDNA D-loop 区399 bp进行分析, 共检测到96种单倍型57个多态位点, 其单倍型多样度为0.767~0.967, 核苷酸多样度为0.014~0.032, 表明我国家驴的遗传多态性丰富。与3个努比亚野驴、3个索马里野驴和6个亚洲野驴的序列构建 NJ系统发育树, 证明我国家驴的母系起源为非洲野驴中的索马里驴和努比亚驴, 亚洲野驴不是中国家驴的母系祖先。     

高效构建卵清白蛋白scFv噬菌体文库及其筛选

目的:建立一种高效噬菌体文库构建方法,获得抗鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)的单链抗体(scFv)噬菌体展示文库,筛选鉴定获得OVA单链抗体。方法:用OVA蛋白免疫Balb/C小鼠,选取血清抗体效价高的小鼠提取脾脏RNA,利用RT-PCR方法扩增获得小鼠重链和小鼠轻链基因。通过无缝连接酶一步将小鼠重链基因、轻链基因和linker DNA连接起来,插入噬菌体表达载体中,构建OVA scFv噬菌体展示文库。测定文库容量,对文库进行富集筛选,ELISA鉴定阳性克隆,测序后构建真核表达载体,转入Expi-CHO悬浮细胞进行真核表达,利用Western blot进行鉴定。结果:成功获得库容量为1. 2×10~7cfu的OVA scFv噬菌体展示文库,并从中筛选出8个阳性克隆,选取效价最高的2号克隆,在Expi-CHO悬浮细胞中表达获得可溶性抗体。结论:建立了一种高效构建scFv噬菌体文库的方法,筛选获得高结合活性的OVA单链抗体,并成功进行了真核表达,为OVA ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础。     

二十二碳六烯酸对心房颤动大鼠心房肌生理改变及双孔钾通道TASK-1蛋白表达的影响

目的：探讨二十二碳六烯酸（DHA）对大鼠心房颤动（AF）模型心房肌生理特性的影响及相关机制研究。方法：80只乙酰胆碱-氯化钙混合液敏感的SD大鼠分为对照组（CTL组）、DHA处理组（DHA组）、房颤组（AF组）和房颤+DHA处理组（DHA+AF组）,观察房颤持续时间;采用全细胞膜片钳技术记录大鼠心房肌细胞动作电位时程（APD）和双孔钾通道TASK-1电流,Western blot测定大鼠心房组织TASK-1蛋白表达。结果：大鼠尾静脉注射乙酰胆碱-氯化钙混合液后,房颤持续时间随实验天数增加而逐渐延长,DHA干预缩短房颤持续时间。与CTL组相比,AF组大鼠心房肌细胞复极50%时的动作电位时程（APD₅₀）和复极90%时的动作电位时程（APD₉₀）明显缩短,心房肌细胞TASK-1电流密度升高,蛋白表达升高（P<0.05）。与AF组相比,DHA+AF组大鼠心房肌细胞APD₅₀和APD₉₀明显延长,TASK-1电流密度和蛋白表达降低（P<0.05）。结论：DHA具有延长房颤大鼠心房肌细胞APD的作用,可能与其下调心房肌TASK-1蛋白的表达从而降低心房肌细胞TASK-1电流密度有关。     

Thymic transplantation across an MHC class I barrier in swine.

Thymic tissue transplantation has been performed previously in adult mice to induce donor-specific tolerance across allogeneic and xenogeneic barriers. We have now attempted to extend this technique to a large animal preclinical model and describe here our initial studies of allogeneic thymic transplantation in miniature swine. Two miniature swine were thymectomized before thymic tissue transplantation, and two remained euthymic. Donor thymic tissue was harvested from SLA class I-mismatched juvenile pigs and placed into recipient sternocephalicus muscle, kidney capsule, and omentum. A 12-day course of cyclosporin A was started on the day of transplantation. Allogeneic thymic engraftment could only be achieved in euthymic and not in thymectomized miniature swine using this treatment regimen. Both nonthymectomized animals showed good graft development, with evidence of thymopoiesis, as indicated by positive CD1 and host-type SLA class I immunoperoxidase staining of immature graft-infiltrating cells. Both animals also demonstrated donor-specific T cell hyporesponsiveness, as measured by MLR and cell-mediated lympholysis. The thymic grafts continued to develop despite the appearance of high levels of anti-donor specific cytotoxic IgG Abs. Thus, thymic tissue transplanted across an SLA class I barrier can engraft and support host thymopoiesis in euthymic miniature swine. The presence of the host thymus was required for engraftment. These data support the potential of thymic transplantation as part of a regimen to induce donor-specific tolerance to xenogeneic organ grafts.     

北京的脊虎天牛属分类研究(鞘翅目:天牛科)

对分布于北京的10种脊虎天牛属甲虫开展了分类研究,恢复了北京脊虎天牛Xylotrechus pekingensis Pic,1939的地位,不再是宽带脊虎天牛Xylotrechus yanoi Gressitt,1934的异名,报道了本种在河北和陕西的新分布记录.提出双带脊虎天牛Xylotrechus bifenestratus Pic,1916是四带脊虎天牛Xylotrechus polyzonus (Fairmaire,1888)的新异名,两者的模式标本均产自北京.本文还报道了3种北京新记录种:显纹脊虎天牛X.ibex (Gebler,1825)、葡脊虎天牛X.pyrrhoderus Bates,1873和黑胸脊虎天牛X.robusticollis (Pic,1936).通过检视标本,很多新的分布信息被加入到相关的种类.最后本文提供了分布于北京的10种脊虎天牛属甲虫的分种检索表.     

猪急性心肌梗死模型发生心室颤动的相关因素分析

目的探讨猪冠状动脉前降支(LAD)结扎后发生室颤的特点及其相关因素,以期提高猪急性心肌梗死模型的成活率。方法57只小型猪开胸结扎心脏LAD不同位点,对室颤和体重、性别、术前心率、术前左室射血分数(LVEF)、开胸径路(旁正中/肋间)、手术时间、结扎百分位点、术后心率、术后发生室早或短阵室速等因素进行单因素相关分析和Logistic回归分析,进而对室颤的发生时间、室颤前心电图特点等进行评价。结果57例动物手术过程发生室颤18例,死亡11例。室颤均发生在结扎冠脉后35 min内,高峰时间为结扎冠脉后5 min和20 min;心率快于160 bpm或慢于60 bpm时容易诱发室颤。与非室颤组动物比较,室颤组动物的结扎位点高,术后最快心率>60 bpm的动物较多,短阵室速发生率高(P<0.01)。Logistic回归分析显示结扎位点过高是急性心肌梗死后发生室颤唯一的独立危险因素。结论结扎位点过高是猪急性心肌梗死后发生室颤的最重要危险因素;冠脉结扎后30 min内应该严密心电监护,特别注意结扎冠脉后5 min和20 min二个时间点、>160 bpm或<60 bpm二种心率、以及短阵室速等先兆事件。     

涠洲岛2种造礁珊瑚共附生可培养潜在耐热细菌多样性

【背景】珊瑚适应环境的能力与机体内共附生细菌有关,然而,这些细菌在珊瑚宿主适应环境变化过程中所起的作用尚不清楚。对珊瑚共附生细菌进行纯培养,探究其生物功能和生态作用,是解析珊瑚宿主环境适应机理的重要途径。【目的】研究热耐受性不同的2种造礁珊瑚共附生可培养潜在耐热细菌多样性和功能,为理解珊瑚适应环境的能力提供新的认识。【方法】从涠洲岛选取2种热耐受性差异显著的霜鹿角珊瑚(Acropora pruinosa)和丛生盔形珊瑚(Galaxea fascicularis)为研究对象,采用2216E、海水R₂A和海水GYP这3种琼脂培养基,于32℃(珊瑚热耐受阈值)培养条件下对珊瑚共附生潜在耐热细菌进行分离培养,对分离菌株进行16S rRNA基因测序和序列相似性分析。选取代表菌株进行热耐受性检验,并利用平板对峙法进行抗菌活性检测。【结果】2种造礁珊瑚共附生可培养潜在耐热细菌的多样性存在显著差异。从热敏型的霜鹿角珊瑚中获得44株细菌,隶属于4个门22个属,其中弧菌属(Vibrio)、假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)和Tenacibaculum为优势属;从热耐...     

冠状动脉结扎致心肌纤维化大鼠模型的建立

目的建立大鼠心肌纤维化（myocardial fibrosis,MF）模型,探讨其病变规律,为临床防治MF研究提供实验动物模型。方法 100只雄性Wistar大鼠随机分为模型组（92只）和伪手术组（8只）,模型组进行心脏冠状动脉结扎（coronary artery ligation,CAL）,手术后第7、14、21、28、35、42、49、56天分别处死;留取心脏标本,HE染色和Masson染色观察心肌组织基本结构,定量测定心脏组织羟脯氨酸含量、心肌胶原和转化生长因子β1（transfor-ming growth factor,TGF-β1）的表达。另设立伪手术组作为对照。结果与伪手术组组相比,模型组大鼠手术7 d后心肌组织炎性反应即已严重,心肌细胞断裂,心肌胶原含量显著升高（P〈0.01）,羟脯氨酸含量升高（P〈0.05）,TGF-β1表达显著增高并持续保持在较高水平（P〈0.01）,纤维化反应在第42天达到高峰,其后有好转趋势。结论 CAL法能成功建立可靠的心肌纤维化动物模型,其机制可能与上调TGF-β1表达有关。     

体外刺激人外周血多形核白细胞诱发化学发光研究

分别测量酵母多糖、伴刀豆球蛋白及佛波醇酯刺激人外周血多形核白细胞诱发的化学发光,结果表明：只有ＰＭＡ刺激的效果最好,即能产生持续稳定高水平的ＣＬ;进一步探索ＰＭＡ刺激ＰＭＮ产生ＣＬ的规律发出：不仅ＰＭＡ的浓度对ＰＭＮ不生ＣＬ的时相、释放速度及效率有影响,测量体系中血含量也影响其ＰＭＮ受激诱发产生的ＣＬ（最适的血浓度在１０％左右）;此外,文中还对保存不同时间的血受ＰＭＡ刺激产生ＣＬ的情况进行了观察。