The growth rate variability ofChlorella vulgaris beijer. Clones grown after mutagen treatment under autotrophic or heterotrophic conditions on the surface of a solid medium

Populations of theChloretta vulgaris Beijeb. strain ?esnokov “V” clones (progenies of single cells) grown up from cells treated by chemical mutagens were cultivated on the surface of solid media. The differentiation of growth types according to their growth rates in the populations originating from the same sample of cells but growing under different conditions was compared. The strain studied exhibited much greater growth rate variability on the complete medium than on the minimal one. Short time changes of light regime during the cultivation for the purpose of inducing reparation processes in the mutagen damaged cells did not manifest themselves significantly in the composition of resulting clonal populations. The possibility of selection of growth types under conditions studied was considered.     

Thermal melting and circular dichroism of DNA complexes with (Lys-Ala-Ala)10 and (Lys-Ala-Ala)n: effect of polypeptide chain length

DNA complexes with polypeptides (Lys-Ala-Ala)₁)] and (Lys-Ala-Ala)₃₄ have been studied using the methods of thermal melting and circular dichroism. Derivative melting curves of (Lys-Ala-Ala)₁₀ DNA differed substantially from those of (Lys-Ala-Ala)₃₄ prepared either by salt gradient dialysis or by direct mixing. Melting curves of the former complex were unimodal or bimodal with T_m increasing continuously withn input lysin-to-DNA phosphate ratio (r); those of the latter complex consisted of three separate transitions with T_m values almost independent of r. Complete reversibility of binding in the (Lys-Ala-Ala)₁₀-DNA system but a slow redistribution of (Lys-Ala-Ala)₃₄ on DNA at low temperature were found in the redistribution experiments Much faster redistribution from denatured to native DNA occurs at the temperature of melting, contributing to the unusual trimodal melting pattern. Circular dichroism curves are very similar for both complexes and indicate little change of DNA conformation upon polypeptide binding.     

Urine selenium level in healthy adult population

The level of urine selenium in healthy adult population, 230 persons, was examined. Persons were selected regarding sex, ages, and smoking habits. No differences versus these observations have been found. For a total, group values are 16.96 Se nmol/creatinine mmol, SD=5.44. It is possible from a single-void specimen to express daily excretion of selenium.     

In vitro reactivation of sarin-inhibited brain acetylcholinesterase from different species by various oximes

In vitro as well as in vivo evaluation of the reactivating efficacy of various oximes against nerve agent-inhibited acetylcholinesterase has been usually done with the help of animal experiments. Nevertheless, previously published data indicate that the reactivation potency of oximes may be different in human and animal species, which may hamper the extrapolation of animal data to human data. Therefore, to better evaluate the efficacy of various oximes (pralidoxime, obidoxime, HI-6, K033) to reactivate brain acetylcholinesterase inhibited by sarin by in vitro methods, human, rat and pig brain acetylcholinesterase were used to calculate kinetic parameters for the reactivation. Our results show differences among the species, depending on the type of oxime, and indicate that data from animal experiments needs to be carefully evaluated before extrapolation to humans.     

Über die Beziehungen zwischen Muskelfasern und Bindegewebsfibrillen

Zusammenfassung Es handelt sich um die Frage, wie sich die Muskelfasern mit Bindegewebe — einerseits mit dem interstitiellen Bindegewebe (Endomysium) des Muskels, andererseits mit jenem, an welches sich der Muskel befestigt — verbinden. Unter anderem um die Frage, ob sich die Kraft der sich kontrahierenden Muskelfasern an das Bindegewebe der zweiten Art direkt oder durch Vermittlung des Interstitiums überträgt.Das einfachste Objekt, an dem man diese Frage zu lösen versuchen kann, stellen die lateralen Rumpfmuskeln von Branchiostoma, von Cyklostomen und von Ichthyopsiden. Beim Lösen der Frage berührt man das wichtige Thema vom Ursprung des Bindegewebes — seiner Desmofibrillen — überhaupt.Bei Branchiostoma fehlt in den Myomeren der lateralen Rumpfmuskeln das Bindegewebe, und die einheitlichen, d. i. syncytial gebauten Myomeren sind hier als Ganzes von Sarkolemm begrenzt; ihre kontraktile Substanz hat in den Desmofibrillen der Myosepten Fortsetzung (Studnika, 1920).Bei Petromyzon bestehen die Rumpfmuskeln aus großen, ziegelförmigen Muskelkästchen, die zuerst durch einheitliche (innere) Sarkolemme, nach ihrer Spaltung durch ein spärliches interstitielles Bindegewebe voneinander getrennt sind. Später zerfallen die Muskelkästchen in breite Zonen und dann in Muskelfasern verschiedener Dicke; zuletzt dringt zwischen die oberflächlichsten davon, die parietalen Muskelfasern, das Bindegewebe in dünnen Schichten hinein (Maurer 1891). Das ist jetzt das Endomysium des Muskels, während dasjenige Bindegewebe, welches die Muskelkästchen bisher voneinander trennte, zum Perimysium internum wird. Die zentralen Muskelfasern der Kästchen sind von Bindegewebe nicht umgeben; sie verbinden sich bloß an ihren Enden (wo sie miteinander verschmelzen) mit den Myosepten. Da im Inneren der Kästchen das Bindegewebe überhaupt fehlt und da das innere Perimysium aus reichlich gewundenen, zum großen Teil quer zu der Richtung der Muskelkästchen verlaufenden Fasergebilden besteht, ist es klar, daß es nicht die in den bekannten Theorien der Muskelkraftübertragung (vgl. S. 36, 37) ihnen zugeschriebene Rolle übernehmen kann.Bei Myxine und bei allen Gnathostomen bestehen die Rumpfmuskeln aus typischen, drehrunden Muskelfasern. Einzelne davon sind voneinander durch ein bindegewebiges Endomysium, ihre Gruppen durch ein Perimysium internum getrennt. Das Endomysium besteht einerseits aus festen exoplasmatischen fibrillenführenden, im fertigen Zustande de norma mit sehr spärlichen Zellen besetzten Lamellen, andererseits aus einem ebenfalls Desmofibrillen und sehr spärliche Zellkerne bzw. Zellen führenden interstitiellen Gerüst. Wieder überzeugt man sich davon, daß die stark, stellenweise sogar wie mäanderförmig gewundenen und dazu größtenteils quer zu der Richtung der Muskelfasern angeordneten Desmofibrillen der Lamellen und des Gerüstes, die von einigen ihnen zugeschriebene Aufgabe nicht besorgen können. — Dieses Verhalten fand ich bei allen von mir untersuchten Ichthyopsiden (in einzelnen Fällen, so z. B. bei Esox, waren die interstitiellen Lamellen einfach). Die an ihnen sich befindenden Geflechte waren irgendwo (Esox) sehr dicht und wohl auch fest, anderswo (so bei den Amphibienlarven) äußerst locker gebaut und weich. Bei Selachierembryonen (Torpedo, Spinax) konnte ich mich davon überzeugen, daß alle diese interstitiellen Strukturen auf der Grundlage des Mesostroma-Mesenchyms, also eines Zellbrückennetzes, entstehen. An der Bildung des Mesostromas beteiligen sich offenbar auch die jungen Muskelfasern, doch am fertigen Gewebe läßt sich ein Zusammenhang des Gerüstes mit dem Sarkolemm nicht nachweisen.Sowohl die Muskelfasern (an ihren Enden) wie auch die interstitiellen Lamellen sind mit den Myosepten fest verbunden; die Lamellen bilden zusammen mit ihnen ein interstitielles Muskelgerüst, in dessen Lücken die Muskelfasern sonst ziemlich frei liegen. Man sieht dieses Gerüst in jenen Fällen sehr deutlich, in denen sich die Muskelfasern bei der Fixierung der Objekte stark kontrahierten und sich von dem Myoseptum abgerissen haben, so daß das Muskelgerüst stellenweise leer geworden ist. Das quergestreifte Muskelgewebe ist auf diese Weise ein Beispiel eines nicht aus Zellen gebauten Gewebes mit (im fertigen Zustande) relativ sehr spärlichen Zellen.Die Muskelfasern verbinden sich mit den Myosepten auf verschiedene Weise. In den jungen Entwicklungsstadien der Kranioten gibt es in der Gegend, wo sich später die Myosepten befinden, zuerst bloß Lücken, die von Cytodesmen, von Mesostroma und zuletzt von bindegewebigen Längsfasern überbrückt werden. Die Längsfasern sind Desmofibrillenbündel, welche sich von den Enden der Muskelfasern der einen zu denen der folgenden Myomere ziehen und beide fest miteinander verbinden. In älteren Entwicklungsstadien gibt es in den Lücken auch Bindegewebsfasern, die in anderer Richtung verlaufen, und zuletzt überwiegen hier die Querfasern; solche Bindegewebsfasern nämlich, welche in der Richtung der Lücke verlaufen. Auf diese Weise entsteht an der Stelle der intermyomeralen Lücke im fertigen Körper schließlich ein festes bindegewebiges Myoseptum. Es gibt Myosepten mit verschiedener Anordnung der Desmofibrillen und ihrer Bündel.Da man sich auf das interstitielle Bindegewebe nicht berufen kann, ist es klar, daß sich die Zugwirkung der sich kontrahierenden Muskelfasern durch ihre Enden, welche sich an die Myosepten festsetzen, an diese letzteren überträgt.Wo es in den intermyomeralen Lücken, dann in den Myosepten, die obenerwähnten Längsfasern gibt — und solche fand ich anfangs bei allen von mir untersuchten Formen — stellen diese Fasern gewissermaßen die Fortsetzung der Myofibrillen vor. Entweder sind die Enden der Muskelfasern nackt, und die Myofibrillen gehen unmittelbar in die Desmofibrillen und ihre Bündel über, oder sind die Enden der Muskelfasern durch das Sarkolemm begrenzt, und die Fasergebilde treten dann durch das Sarkolemm hindurch; in noch anderen Fällen muß man annehmen, daß sich auf die eine Seite des Sarkolemms die Myo-, auf die andere (äußere) Seite die Desmofibrillen festsetzen. Das exoplasmatische Sarkolemm stellt dabei keine tote Scheidewand zwischen den beiden Arten der Fibrillen vor. Die Desmofibrillen sind oft zu Bündeln verbunden, und ihre Anzahl ist dann geringer als jene der Myofibrillen.Bei Amphibienlarven entfernen sich gegen das Ende der Schwanzflosse zu die Myomeren voneinander, und aus jenem Materiale, welches in den vorderen Teilen des Körpers die Myosepten baut, entstehen da förmliche Sehnen; in Anbetracht des Umstandes, daß es sich (beim Ende der Flosse) um Fibrillenbündel handelt, welche die einzelnen Muskelfasern miteinander verbinden, sind es eigentlich Mikrosehnen. In diesen Fällen sieht man den Übergang der Desmofibrillen in Myofibrillen besonders deutlich, und man kann ihn — bei Pelobates-Larven — sogar auch an im frischen Zustande untersuchten (zerdrückten) Objekten untersuchen.Dort, wo man den direkten Zusammenhang der Fasergebilde nicht beobachten kann, sieht man an der Stelle des Septums, wo die sich kontrahierenden Muskelfasern von ihm weggerissen haben, manchmal Reste der zerrissenen Desmofibrillen, zum Zeichen, daß hier die Myofibrillen wirklich mit den Desmofibrillen im Zusammenhange standen. In sehr zahlreichen Fällen beobachtet man bei älteren Tieren jedenfalls auch dies nicht; man bekommt dann den Eindruck, als ob die Enden der Muskelfasern mit dem Myoseptum bloß verklebt wären. Es gelang bisher nicht, die zwischen den anders verlaufenden Fibrillen sich befindenden und zur Befestigung der Muskelfasern dienenden Desmofibrillen in allen Fällen zu finden.     

Multimeric bivalent immunogens from recombinant tetanus toxin H<Subscript>C</Subscript> fragment,synthetic hexasaccharides,and a glycopeptide adjuvant

Using recombinant tetanus toxin H_C fragment (rTT-H_C) as carrier, we prepared multimeric bivalent immunogens featuring the synthetic hexasaccharide fragment of O-PS of Vibrio cholerae O:1, serotype Ogawa, in combination with either the synthetic hexasaccharide fragment of O-PS of Vibrio cholerae O:1, serotype Inaba, or a synthetic disaccharide tetrapeptide peptidoglycan fragment as adjuvant. The conjugation reaction was effected by squaric acid chemistry and monitored in virtually real time by SELDI-TOF MS. In this way, we could prepare well-defined immunogens with predictable carbohydrate–carrier ratio, whose molecular mass and the amount of each saccharide attached could be independently determined. The ability to prepare such neoglycoconjugates opens unprecedented possibilities for preparation of conjugate vaccines for bacterial diseases from synthetic carbohydrates.     

External factors involved in the regulation of an extracellular proteinase synthesis in Bacillus megaterium

Summary A mathematical model was formulated to describe the kinetics and stoichiometry of growth and proteinase production in Bacillus megaterium. Synthesis of the extracellular proteinase in a batch culture is repressed by amino acids. The specific rate of formation of the enzyme (r _E) can be described by the formula {ie373-1}, where k ₂ and k ₃ stand for the non-repressible and repressible part of enzyme synthesis respectively, k _{S 2} is a repression coefficient and S ₂ indicates the concentration of amono acids; the values of k ₂ and k _{S 2} depend on the composition of the mixture of amino acids. Even in a high concentration, a single amino acid is less effective than a mixture of amino acids. The dependence of the proteinase repression on the concentration of an external amino acid (leucine) follows the same course as its rate of incorporation into proteins, approaching saturation at concentrations higher than 50 M (half saturation approximately 10 M). However, the total uptake of leucine did not exhibit any saturation even at 500 M external concentration.Symbols X biomass concentration, g/l - E proteinase concentration, unit/l - t time, h - S ₁ concentration of glucose, g/l - S ₂ concentration of amino acids, g/l - specific growth rate, l/h - rE specific rate of enzyme production, unit/g/h - k ₁ growth kinetic constant, l/h - k ₂ product formation kinetic constant (for non-repressible part of enzyme synthesis), unit/g - k ₃ product formation kinetic constant (for repressible portion of enzyme synthesis), unit/g - k _{S 1} saturation constant, g/l - k _{S 2} repression coefficient for a certain amino acid or amino acids mixture, g/l     

Physiological activity of immobilized cells of Claviceps fusiformis during long-term semicontinuous cultivation

Summary The 550-day semicontinuous cultivation of Claviceps fusiformis immobilized in calcium alginate is documented. The vegetative mycelium from seed or from early-production submerged culture is the best choice for immobilization. No extracellular glucans are produced by immobilized cells. Immobilized spores give low yields of clavine alkaloids. Alginate concentrations in a range of 2%–4% do not influence yield and spectrum of alkaloids. The cytoplasm of the immobilized cells becomes condensed (after 3 days), polysaccharides disappear, and centres of lipid synthesis are formed in the cytoplasm. After 60 days the cells harbour a great number of lipid particles, mitochondria are diminishing and their cristae partly disappear, indicating a decreased respiration capacity. After 350–500 days the volume of most cells is increased many times and the cells are filled with large oval bodies of electrondense material. Chloramphenicol protects immobilized cultures against bacterial contamination.     

Progress since the first international symposium: ‘Genetic aspects of plant mineral nutrition’, Beograd, 1982, and perspectives of future research

Summary The paper discusses the problems of genetic aspects of plant mineral nutrition in the light of the results presented at the First and Second Symposia on ‘Genetic Aspects of Plant Mineral Nutrition’ organized in Beograd in 1982 and Madison in 1985, respectively. On the basis of the results, future directions of research are discussed. The papers deal with the concentration and content of mineral nutrients in different genotypes, physiological and biochemical aspects of the genetic specificity of plant mineral nutrition, relations between plant genotypes and nitrogen fixing micro-organism strains, as well as with some related problems which have been investigated to a lesser extent. Particular attention is paid to papers and problems referring to genetic and breeding research work linked with genetic aspects of plant mineral nutrition as well as the possibilities of developing new cultivars requiring certain soil and mineral nutrition conditions for their cultivation.