流式细胞术研究细胞凋亡的方法与技术

细胞发生凋亡时,会伴随着一系列形态学、生物化学及分子生物学性质的变化,包括细胞皱缩,核染色质凝聚,细胞膜通透性改变,Caspases激活,线粒体跨膜电位降低,膜磷酯酰丝氨酸外化,胞质Ca2+浓度升高,DNA片段化及含量变化等特点.应用流式细胞术进行细胞凋亡的研究,对于探讨胚胎发育、衰老以及研究肿瘤的发生、发展和转化等病理生理过程和病毒感染及免疫等具有十分重要的意义.本文就细胞凋亡的特征、基于细胞膜功能的流式细胞术检测方法和基于细胞器功能的流式细胞术检测方法等关键性问题进行了阐述.     

4种桦树幼苗耐盐性分析与评价

耐盐植物引种和培育是开发利用盐碱地的主要方式,具有重要的研究价值。本试验以哈萨克斯坦引进的吉尔吉斯白桦（Betula kirghisorum）、欧洲白桦（B.pendula）、毛枝桦（B.pubescens）和本地的白桦（B.platyphylla Suk.）1年生幼苗为试验材料,于2014年7月在东北林业大学进行中性盐（NaCl）和碱性盐（NaHCO₃）的胁迫试验,测定生长量、光合参数和叶绿素含量,并通过因子分析法,对比评价4种桦树幼苗的耐盐碱能力,筛选出综合性状优良的桦树树种,为耐盐植物引种和培育提供有价值的数据。结果表明：随着盐浓度的升高,桦树幼苗的高生长和光合效率受到显著抑制,而当浓度≥0.5%时,大部分幼苗枯死。株高增长量、基径增长量、净光合速率（P_n）、光能利用效率（SUE）、羧化效率（CUE）、表观量子效率（AQY）及叶绿素含量之间的相关性多数达到了显著水平;最后利用因子分析法分别构建了0.1% NaCl、0.3% NaCl、0.1% NaHCO3和0.3% NaHCO₃胁迫处理的综合评价公式,并分别筛选出了综合性状相对优良的单株,其中NaCl胁迫下较优单株为32、33、34、35;NaHCO₃胁迫下较优单株为262、263、264、35。综合比较认为,吉尔吉斯白桦对低中浓度的中性盐的抗性最强,本地对照白桦对低中浓度碱性盐的抗性最强,而吉尔吉斯白桦和毛枝桦对高浓度碱性盐抗性较强。     

白音华矿区土壤重金属含量的空间异质性

为探讨开矿对白音华矿区土壤重金属空间分布的影响,本研究以内蒙古西乌珠穆沁旗白音华煤矿区周边土壤为对象,分析了距离矿区8 km内的重金属Cu、Cr、Pb和Mn含量的空间异质性.结果表明:土壤重金属Cu、Cr、Pb和Mn的平均含量分别为12.7、32.6、29.9和201.3 mg ? kg-1,其变异系数分别为26.8％...     

锦鸡儿植物对盐碱地土壤理化性质和细菌群落的影响

锦鸡儿属的多种植物在干旱/半干旱区域水土保持等方面具有显著的作用效果,该研究以柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿为材料,选择宁夏银北西大滩核心试验站的盐渍化荒地为研究对象,分析了3种锦鸡儿建植1年对盐碱地土壤理化性质及土壤细菌群落的影响,以了解该类植物在盐碱地改良中的作用及生态效应。结果显示:(1)种植锦鸡儿1年能够显著降低盐碱地土壤全盐含量和pH,提高土壤全氮和全磷含量。(2)种植锦鸡儿不影响其非根际土壤细菌群落的α多样性,但小叶锦鸡儿非根际土壤细菌群落的香浓指数最低。(3)不同种锦鸡儿对盐碱地细菌群落结构的影响有所不同,小叶锦鸡儿根际/非根际细菌群落的结构分别与对照土壤以及柠条、中间锦鸡儿根际土壤存在明显差异;在属水平,包括假黄色单胞菌属、新鞘氨醇菌属及根瘤菌属在内的12个优势细菌属的相对丰度在小叶锦鸡儿非根际土壤中显著增加。(4)db-RDA分析表明,盐碱地土壤全盐、全氮及全磷含量分别解释了锦鸡儿非根际细菌群落结构变异信息的23.5%、25.4%和22.2%,3种因子累计共解释48.5%的细菌群落变异(P0.05),但这些因子对锦鸡儿根际细菌群落的变化无显著影响。研究表明,短期种植锦鸡儿属植物对盐碱地土壤理化性质具有一定改良效果,且不影响非根际土壤细菌群落的α多样性,但不同种锦鸡儿对土壤细菌群落结构的影响存在差异。     

Increment of hFIX expression with endogenous intron 1 in Vitro

This paper probes into the feasibility of increasing expression level of hFIX gene with endogenous intron 1 sequence.hFIX minigene was obtained with middle sequence truncated intron 1 inserted into the relative site of hFIX cDNA,and plasmid vector pKG5i‘IX,retroviral vector G1NaCi‘IX were constructed.These vectors were transduced into target cells of PA317,C2C12,primary rabbit skin fibroblasts (RSF) and primary human skin fibroblasts (HSF).The expression level of mixed colonies are PA317/pKG5i‘IX,151 ng/10^6 cells/24h;PA317/G1NaCi‘IX,308 ng/10^6 cells/24 h;C2C12/G1NaCi‘IX,186 ng/10^6 cells/24 h;RSF/G1NaCi‘IX,1929 ng/10^6 cells/24 h;HSF/G1NaCi‘IX,1646 ng/10^6 cells/24 h.These results indicated that hFIX minigene with intron l is able to increase the expression level to about 3 times of that of hFIX cDNA.Meanwhile,in order to study the application of hFIX minigene in the retroviral-mediated gene transfer system and refrain from intron splicing during viral production,a retroviral vector G1NaCi‘IXR with reversely inserted hFIX minigene expression cassette was constructed.The expression level of reverse constructor in PA317 cells was 390 ng/10^6 cells/24 h with 79% of bioactivity.PCR detection of HT/G1NaCi‘IXR cells infected with PA317/G1NaCi‘IXR supernatant confirmed the existence of intron 1 sequence.These results suggested that expression vector with forward-inserted intronl-carrying hFIX expression cassette can be used in directed gene transfer,but when using the retroviral-mediated gene transfer system,reversely-inserted intronl-carrying hFIX expression cassette should be considered.     

双斑蟋若虫后足的再生观察

研究蟋蟀若虫是否具有再生的能力,在实验室内对直翅目蟋蟀科的双斑蟋Gryllus bimaculata de Geer若虫后足的再生情况进行初步观察。结果表明:双斑蟋若虫的后足确实具有再生的能力,且再生足的伸长生长与正常足一样,均出现于虫体蜕皮时。再生的过程主要分为3个阶段:突起期、“肢芽”期、短小足期。实验结果还表明:再生能力与断肢发生的时间及断肢部位有关;断肢部位离肢体越远,再生能力越强;断肢发生的时间越早,再生能力越强。     

Evaluation of the prevalence and economic burden of adverse drug reactions presenting to the medical emergency department of a tertiary referral centre: a prospective study

Background  

Adverse drug reactions (ADRs) are now recognized as an important cause of hospital admissions, with a proportion ranging from 0.9–7.9%. They also constitute a significant economic burden. We thus aimed at determining the prevalence and the economic burden of ADRs presenting to Medical Emergency Department (ED) of a tertiary referral center in India     

大鼠脑缺血再灌注后血清中血管内皮生长因子与神经元凋亡的研究

目的:通过检测SD大鼠脑缺血再灌注模型血清中血管内皮生长因子(VEGF)与神经元凋亡动态表达变化的关系,以探讨两者之间的相关性。方法:将40只大鼠随机分为8组:对照组、假手术组和脑缺血30min再灌注12h组、1d组、3d组、5d组、7d组、及14d组,每组5只。采用ELISA双抗夹心法检测大鼠血清中血管内皮生长因子、原位细胞凋亡TUNEL法检测脑组织中的凋亡神经细胞数。结果:再灌注12h、1d、3d、5d、7d及14d大鼠血清VEGF表达和凋亡神经元百分比的变化均为负相关性(均为P<0.05)。结论:在脑缺血再灌注大鼠模型中,缺血诱导使VEGF的表达发生变化,VEGF通过直接或间接的途径抑制神经元凋亡。     

白簕叶挥发油的化学成分

用GCMS联用技术首次研究了云南西双版纳白簕叶挥发油的化学成分,并应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对含量。一共分离出108个峰,确认了其中的81种成分,所鉴定的组分占挥发油总量的96.50%,主要是萜烯类及其含氧衍生物等。