全文获取类型
收费全文 | 10841篇 |
免费 | 779篇 |
国内免费 | 764篇 |
专业分类
12384篇 |
出版年
2024年 | 22篇 |
2023年 | 147篇 |
2022年 | 379篇 |
2021年 | 660篇 |
2020年 | 381篇 |
2019年 | 472篇 |
2018年 | 417篇 |
2017年 | 310篇 |
2016年 | 457篇 |
2015年 | 718篇 |
2014年 | 823篇 |
2013年 | 809篇 |
2012年 | 1028篇 |
2011年 | 821篇 |
2010年 | 495篇 |
2009年 | 474篇 |
2008年 | 511篇 |
2007年 | 480篇 |
2006年 | 398篇 |
2005年 | 368篇 |
2004年 | 286篇 |
2003年 | 258篇 |
2002年 | 194篇 |
2001年 | 207篇 |
2000年 | 150篇 |
1999年 | 163篇 |
1998年 | 98篇 |
1997年 | 109篇 |
1996年 | 111篇 |
1995年 | 101篇 |
1994年 | 110篇 |
1993年 | 66篇 |
1992年 | 65篇 |
1991年 | 84篇 |
1990年 | 54篇 |
1989年 | 43篇 |
1988年 | 25篇 |
1987年 | 16篇 |
1986年 | 14篇 |
1985年 | 23篇 |
1984年 | 14篇 |
1983年 | 17篇 |
1982年 | 3篇 |
1981年 | 2篇 |
1980年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
131.
132.
ROC曲线分析在评价入侵物种分布模型中的应用 总被引:67,自引:0,他引:67
生态位模型(ecological niche models,ENMs)已广泛应用于物种潜在分布区预测,ENMs的应用也为外来入侵物种的风险分析提供了重要的定量化分析工具,但如何评价不同模型之间的预测效果成了当今研究的热点问题。本文介绍了受试者工作特征(ROC)曲线分析在评价不同生态位模型预测效果中的应用原理和分析方法,并以一种植物病原线虫-相似穿孔线虫(Radopholus similis)为例,应用ROC曲线分析法对其5种模型(BIOCLIM,CLIMEX,DOMAIN,GARP,MAXENT)的预测结果进行了比较分析。5种模型的ROC曲线下面积AUC(Area Under Curve)值分别为0.810,0.758,0.921,0.903和0.950,以MAXENT模型的AUC值最大,表明其预测效果最好;方差分析结果表明,除GARP与DOMAIN模型之间AUC值差异不显著外,其余各模型之间差异显著。 相似文献
133.
134.
Bing Xu Shaolin Wang Yan Jiang Linlin Yang Ping Li Caixia Xie 《Animal biotechnology》2013,24(4):217-225
Grass carp, Ctenopharyngodon idellus (Valenciennes, 1844), is an economically important species widely cultured in the world, but its genome research resources are largely lacking. The objectives of this study were to construct normalized cDNA libraries for efficient EST analysis, to generate ESTs from these libraries, and to identify EST-related molecular markers such as microsatellites and single nucleotide polymorphisms (SNPs) for genetic analysis of this species. A total of 6,269 ESTs were generated representing 4,815 unique sequences, from which 105 putative microsatellites and 5,228 SNPs were identified. These genome resources provide the material basis for future genetic and functional analyses in this species. 相似文献
135.
构建可表达增强型绿色荧光蛋白 (Enhanced green fluorescent protein,EGFP) 的辅助病毒依赖型腺病毒载体 (Helper-dependent adenoviral vector,HDAd),并完成大量制备、纯化和体外表达鉴定。荧光显微镜证实HDAd/EGFP可表达,电镜下观察到经CsCl纯化后的腺病毒的典型形态。分光光度计法测定病毒的浓度为4.0×1012 颗粒数 (Virus particle,vp) /mL。与可表达EGFP的第一代腺病毒载体 (First generation adenoviral vector,FGAd) FGAd/EGFP进行了体外感染和转基因表达效率的比较研究,分别用约2 000 vp/细胞的HDAd/EGFP和FGAd/EGFP感染A549细胞,流式细胞仪检测EGFP的表达情况。通过相同时间点流式细胞仪分析EGFP的表达情况,可见HDAd/EGFP感染早期的A549细胞较FGAd/EGFP有更高的荧光表达率及更高的表达强度,显示HDAd载体具有转基因瞬时高表达的特性,是一种更有价值的疫苗载体。 相似文献
136.
Hai-Nan Su Bin-Bin Xie Xiu-Lan Chen Jin-Xia Wang Xi-Ying Zhang Bai-Cheng Zhou Yu-Zhong Zhang 《Journal of applied phycology》2010,22(1):65-70
Allophycocyanin (APC) is a minor component of phycobiliproteins in cyanobacteria and red algae. This paper describes a simple
and inexpensive extracting method for isolating APC from Spirulina (Arthrospira) platensis with high efficiency. The crude phycobiliprotein extract was pretreated by ammonium sulfate fractionation. Then, by adding
hydroxylapatite into crude phycobiliprotein extract dissolved in 20 mM phosphate buffer (pH 7.0), APC was selectively adsorbed
by hydroxylapatite but C-phycocyanin (C-PC) was not. The hydroxylapatite was collected and APC was extracted from the crude
phycobiliprotein extract. Then, the enriched APC was washed off from the hydroxylapatite using 100 mM phosphate buffer (pH 7.0).
In this simple extracting method it was easy to remove C-PC and isolate APC in large amounts. The absorbance ratio A
650/A
280 of extracted APC reached 2.0. The recovery yield was 70%, representing 4.61 mg · g−1 wet weight. The extracted APC could be further purified by a simple anion-exchange chromatography with a pH gradient from
5.6 to 4.0. The absorbance ratio A
650/A
280 of the purified APC reached 5.0, and the overall recovery yield was 43%, representing 2.83 mg · g−1 wet weight. Its purity was confirmed by native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and sodium dodecyl sulfate-PAGE. 相似文献
137.
138.
目的构建并鉴定带GFAP启动子的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体,观察其表达。方法利用IRES和GFAP启动子,通过质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术,经多步亚克隆后完成能同时表达p27和EGFP基因的星形胶质细胞特异性真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27。转染体外培养的星形胶质细胞,观察EGFP的表达,并通过免疫荧光细胞化学技术观察p27的表达。结果经酶切鉴定和测序鉴定,成功构建真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27。转染星形胶质细胞后可见EGFP的表达,并且在EGFP阳性的细胞中P27表达水平明显增高。结论GFAP启动子能启动目的基因p27和EGFP在星形胶质细胞的表达,连于Flag-p27的下游EGFP可作为报告基因,指示p27的表达情况。带启动子GFAP的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体的构建为进一步研究星形胶质细胞增生与神经系统疾病的关系,并为寻找神经系统疾病的有效基因治疗途径奠定基础。 相似文献
139.
口蹄疫病毒3A基因在大肠杆菌中的高效表达 总被引:5,自引:0,他引:5
将口蹄疫病毒(Foot\|and\|Mouth Disease Virus,FMDV)的3A基因克隆到线形化的原核表达载体pProEX\|HTb中,转化大肠杆菌BL21和DH5α,经氨苄抗性筛选得到阳性克隆,IPTG诱导表达。SDSPAGE和West bolt结果证实大肠杆菌菌体不可溶性蛋白中富含3A蛋白,说明3A蛋白在表达产物中以包涵体的形式存在,所表达的蛋白含量占菌体蛋白的29.2%。 相似文献
140.
社鼠(Niviventer confucianus)属于啮齿目(Rodentia)、鼠科(Muridae)、白腹鼠属(Niviventer),关于该物种的分子系统学研究极少。为获取社鼠线粒体基因组全序列,提取其基因组总DNA,参照近缘物种线粒体基因组全序列设计34对特异性引物,利用PCR扩增全部片段后进行测序,之后对其基因组组成及结构特点进行了初步分析。结果表明,社鼠线粒体基因组全序列长16 281 bp(GenBank收录号:KJ152220),包含22个tRNA基因、13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因和1个非编码控制区;基因组核苷酸组成为34.0%A、28.6%T、24.9%C、12.5%G。将所得序列与社鼠近缘物种(川西白腹鼠、小家鼠、褐家鼠)的线粒体全基因组进行比较,结果显示,四个物种的线粒体基因组虽然在基因组大小、部分tRNA二级结构、部分蛋白质编码基因的起始或终止密码子及控制区长度和碱基组成上有差异,但基因组结构和序列特征方面都具有较高的相似性。四个物种线粒体全基因组间的遗传距离显示,社鼠与川西白腹鼠距离最近,而与小家鼠距离最远。该研究为利用线粒体全基因组信息进行啮齿类分子系统学研究提供了有价值的资料。 相似文献