一株链霉菌菌株NCPC-1020中棘白霉素B脱酰基酶基因的克隆与功能分析

【目的】从一株土壤放线菌来源的野生型链霉菌菌株NCPC-1020中克隆一个具有棘白霉素B脱酰基酶活性的新基因。【方法】采用Degenerate和TAIL PCR两种方法,从链霉菌菌株NCPC-1020基因组中快速克隆获得了该基因序列,然后将基因在变铅青链霉菌TK24中进行异源表达,并进行全细胞催化底物脱酰基反应,采用LC-MS检测反应产物。【结果】LC-MS检测证实,棘白霉素B结构中脂肪链被酶促水解,从而证实该基因具有脱酰基酶活性。【结论】采用Degenerate以及TAIL PCR的方法能够快速获得未知功能的新基因。此基因的克隆,奠定了进行半合成棘白霉素类药物的研发基础。     

Effects of intracellular Ca2+ and proteolytic digestion of the membrane skeleton on the mechanical properties of the red blood cell membrane

Intracellular Ca2+ at concentrations ranging from 0 to 10 mumol/l increases the shear modulus of surface elasticity (mu) and the surface viscosity (eta) of human red blood cells by 20% and 70%, respectively. K+ selective channels in the red cell membrane become activated by Ca2+. The activation still occurs to the same extent when the membrane skeleton is degraded by incorporation of trypsin into resealed red cell ghosts, suggesting that the channel activation is not controlled by the proteins of the membrane skeleton and is independent of mu and eta. Incorporation of trypsin at concentrations ranging from 0 to 100 ng/ml into red cell ghosts leads to a graded digestion of spectrin, a cleavage of the band 3 protein and a release of the binding proteins ankyrin and band 4.1. These alterations are accompanied by an increase of the lateral mobility of the band 3 protein which, at 40 ng/ml trypsin, reaches a plateau value where the rate of lateral diffusion is enhanced by about two orders of magnitude above the rate measured in controls without trypsin. Proteolytic digestion by 10-20 ng/ml trypsin leads to a degradation of more than 40% of the spectrin and increases the rate of lateral diffusion to about 20-70% of the value observed at the plateau. Nevertheless, mu and eta remain virtually unaltered. However, the stability of the membrane is decreased to the point where a slight mechanical extension, or the shear produced by centrifugation results in disintegration and vesiculation, precluding measurements of eta and mu in ghosts treated with higher concentrations of trypsin. These findings indicate that alterations of the structural integrity of the membrane skeleton exert drastically different effects on mu and eta on the one hand and on the stability of the membrane on the other.     

海南岛东寨港国家级自然保护区鸟类组成和区系的研究

报道了东寨港红树林自然保护区鸟类资源的调查,记录了该保护区鸟类１１８种,隶属１３目３５科,其中有５９种属冬候鸟,５７种属留鸟和２种属夏候鸟。根据中国动物地理区,东寨港保护区有６０种鸟类属古北界物种、４３种是东洋界物种和１５种是广布种。还分析了该保护区鸟类组成区系和鸟类生态群的特征。     

基于可变模糊识别模型的海水环境质量评价

海水环境质量评价可以视为是一个具有确定性的评价指标和评价标准与具有不确定性的评价因子及其含量变化相结合的分析过程,各评价指标含量具有中介过渡性,构建了基于可变模糊集合理论的海水环境质量评价方法(简称“VFEM”),并以莱州湾海水水质为研究对象,应用提出的可变模糊评价模型对该区域海水水质状况进行评价,实例应用表明,该模型通过可变模型参数变化(a,p),以线性模型与非线性模型相结合,将最后稳定结果作为海洋水质环境的最后评价结果,从而确定水质评价等级,评价结果更为可信,同时该模型通过级别特征值精确区分各水质采样点的水质优劣,对各水质采样点的水质级别有更准确的定位,为海水环境质量综合评价提供了一种合理而适用的方法.     

夹竹桃灭钉螺效果初报

1　引　　言在防治血吸虫病的过程中 ,人们一直致力于消灭其唯一中间宿主钉螺 .近年来长江中下游生态环境破坏严重 ,一些地方有螺面积扩大 ,疫情回升 .常用化学药物灭螺法虽有较明显的灭螺效果 ,但也造成了严重的环境污染 .90年代以来生物灭螺开始成为比较活跃的研究领域 ,在筛选灭螺植物 ,提取植物灭螺活性成分和利用植物他感作用灭螺等方面已取得了许多成绩[1～ 4 ,7,8] .目前 ,植物灭螺难以推广的主要问题在于利用新鲜植物材料灭螺常需要较高的浓度 ,而原料来源往往有限 ;提取植物灭螺活性成分制作灭螺剂的成本较高 ,难以广泛应用 .因此 …     

新生儿医院内肠道感染的相关因素分析及微生态制剂的预防作用

目的探讨引起新生儿医院内肠道感染的相关因素及应用微生态制剂（培菲康）预防新生儿医院内肠道感染的有效性。方法2004年10月至2005年10月住院治疗的新生儿826例,以住院期间发生医院内肠道感染的患儿设为观察组,同期住院未发生医院内肠道感染的患儿设为对照组。对两组患儿的临床特征,微生态制剂的应用情况与医院内肠道感染的发病率等,进行病例对照研究和非条件Logistic回归模型多因素分析。结果410例住院新生儿使用培菲康预防治疗,住院期间医院内肠道感染的发病率为7．56％（31／410）;416例未使用培菲康治疗,住院期间医院内肠道感染的发病率为17．31％（72／416例）。单因素卡方分析提示：住院病程、病情的严重程度、年龄、入院的侵入性操作、糖皮质激素的应用、微生态制剂的应用、置暖箱与否、抗生素更换与否、分娩地点与医院内肠道感染的发生相关联。非条件Logistic多因素回归分析筛选出4个危险因素,即住院天数（χ^2=9,418,P=0．001）、侵入性操作（χ^2=9．807。P=0．000）、糖皮质激素的应用（χ^2=27．96,P=0．000）、抗生素的更换与否（χ^2=95．121,P=0．000）;1个保护因素：即微生态制剂的应用（χ^2=17．972,P=0．000）。结论住院新生儿医院内肠道感染的发生与住院病程的长短、住院期间的侵人性操作、糖皮质激素的应用及抗生素的广泛应用密切相关。预防性应用微生态制剂为保护因素。提示：尽可能缩短病程。严格掌握抗生素及激素的适应证。避免滥用抗生素及激素,减少侵入性操作并预防性的应用微生态制剂（培菲康）可以降低医院内肠道感染的发病率。     

Peptostreptococcus infective endocarditis and bacteremia. Analysis of cases at a tertiary medical center and review of the literature

Peptostreptococcus infective endocarditis is rare but associated with high morbidity. We report two cases and evaluate all positive blood cultures for Peptostreptococcus at our institution, followed by a review of the literature. This organism causes a subacute presentation and cardiac valve pathology is a risk factor. Penicillin remains the treatment of choice.     

Cell-free synthesis of angler fish preproinsulin: Complete amino acid sequence of the signal peptide

Messenger ribonucleic acid isolated from angler fish ($\text{Lophius}\text{americanus}$) islets of Langerhans was translated in the wheat germ cell-free protein synthesizing system containing different combinations of radioactive amino acids. Preproinsulin (～ 11,000 daltons) was identified amongst the translation products, by sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis, and subjected to microsequencing techniques. The fish preproinsulin was found to possess an NH₂-terminal signal peptide of 24 amino acids, with regions of homology to human, rat and chicken preproinsulin signal sequences.     

试管藕诱导技术研究

莲藕 ( Nelumbo nucifera Gaertn.)在我国有着悠久的栽培历史 ,分布极为广泛 ,是一种重要的水生蔬菜和水生观赏植物 ,但其繁殖系数较低 ( 1∶ 1 0 ) ,远途运输费用高。为此 ,我们已进行了快繁技术研究 [1 ] ,但试管苗的成活率较低 ,因此我们开展了试管藕的诱导工作。试管藕作为一种休眠和繁殖器官 ,利于成活 ,便于运输。此外 ,还可以进行离体保存及其他的生理、生化方面的研究工作 ,为这些研究提供一个可操作的简单系统。1 　材料与方法1 .1 　材料取国家种质水生蔬菜资源圃试验田的鄂莲一号和鄂莲四号的茎尖。1 .2 　方法将取回的鄂莲一号…     

宏基因组学在发现新基因方面的应用

现代分子微生物生态学研究表明,自然环境中约99%的微生物不能用传统的分离培养方法获得其纯培养,使得环境微生物中的多样性基因资源难以得到充分的开发和应用.宏基因组学是近年来发展起来的,通过直接提取特定环境中全部微生物的总基因组DNA并克隆到合适的可培养微生物宿主中,来筛选目的基因的方法.它已在微生物新功能基因筛选、活性物质开发和微生物多样性研究等方面取得了显著成果.该文旨在介绍宏基因组学在新功能基因发现方面的应用概况并结合我们的研究情况,对这一崭新领域中的最近研究进展进行简要综述.