仿生聚己内酯支架用于乳房组织工程的可行性研究

目的探讨聚己内酯（PCL）乳房形态支架用于组织工程乳房的构建的可能性。 方法通过熔融沉积3D打印制备形态仿生的PCL支架,测量其机械性能,并使用新西兰大白兔动物模型,皮下植入该PCL支架12周和18周后,利用核磁共振成像（MRI）观察支架内部新生组织分布情况,在组织学（HE、Masson及EVG染色）上评估支架内部的脂肪、纤维及血管的分布情况,并进一步使用qRT-PCR检测了12周时PCL支架内部组织的成脂相关基因（PPAR-γ、C/EBP-β、AP-2）、炎症相关基因TNF-α及巨噬细胞标记物F4-80的表达情况,同时使用凝胶渗透色谱法分析了PCL植入体内后平均分子量的变化。2组间均数比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,配对设计的均数比较采用配对t检验。 结果制备的PCL支架孔隙率为（85.30±1.12）%,压缩模量为（8.18±1.39）MPa,植入新西兰大白兔动物模型皮下12周后,MRI影像学显示脂肪组织已由支架周围向内部侵入,HE、Masson及EVG染色同样在该支架边缘观察到部分新生脂肪组织及血管,而支架内部则以疏松排列的纤维组织为主;与原生脂肪比较,12周PCL支架内组织的基因表达分析成脂相关基因C/EBPβ表达水平（2.32±0.28比1.00±0.02）升高,而巨噬细胞标记物F4/80表达（0.80±0.12比1.00±0.03）降低（P均< 0.01）;18周后,HE染色证实支架内部已充满脂肪组织。基因表达证实,与原生脂肪比较,支架内部组织C/EBP-β （3.30±0.63比1.00±0.02）,PPAR-γ （1.81±0.71比0.99±0.02）及AP-2表达水平（1.38±0.16比1.01±0.01）升高（P均< 0.01）;而TNF-α（0.50±0.15比1.00±0.01）及F4/80表达水平（0.52±0.09比1.00±0.03）均降低（P均< 0.001）。而植入体内PCL支架的分子量（M_n）在18周内变化不大[（65.04±2.24）kDa比（64.20±4.09） kDa]。 结论PCL支架具有较好的生物相容性,可用于组织工程乳房的构建,该新西兰大白兔动物模型的建立有利于乳房组织工程的进一步临床转化。     

人组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1在Pichia pastoris酵母中重组表达研究

 为研究组织型基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMPs)的分子作用机制 ,探讨了在 Pichia pastoris酵母中高效表达分泌型人组织型基质金属蛋白酶抑制剂 - 1 (TIMP- 1 )的技术路线 ,并对产物性质进行初步研究 .通过 PCR从含有 TIMP- 1基因的 p BS质粒获得了该基因的全长序列 ,构建了 p PIC9/T1表达载体 ,电击法转化酵母 ,通过表型筛选和 PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入 Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS- PAGE表明表达量高达 40 mg/L培养上清 .用免疫印迹法确定了产物的正确性 ;同时 ,反向明胶酶谱法证明了重组蛋白具有抑制基质金属蛋白酶的活性 .     

秦岭太白红杉群落特征及其物种多样性的研究

选择太白红杉群落分布集中的太白山、长安光头山、玉皇山和冰晶顶等4个地段,设计18个样地,用样方法进行调查,共作样方280个。分析了太白红杉群落的种类组成、区系特点、群落外貌、垂直结构和水平结构等群落学特征,并对该群落的环境概况进行分析,计划了不同地段上群落的频、盖度指标和不同层次上的Shannon-Wiener指数,Simpson指数、Pielou指数和种间相遇指数。结果表是,太白红杉主要分布于秦岭海拔2800－3500m的高海拔山地,群落组成种类约85种,北温带分布属占优势,地面芽植物种类多,数量大,是该群落的优质层片。乔木层为太白红杉单优组成,平均高度约8．6m,多样性指数0．207－0．420,灌木层H值为1．779－2．363,草本层H值最高,为2．122－3．025。本研究为太白红杉可持续利用和保护提供了有益的参考。     

酶催化技术开发及应用的研究进展

在有机合成中,酶作为一种有效的生物催化剂被广泛应用,但因为种种困难的存在,致使其在工业生产中应用还不十分广泛。目前为了解决酶应用技术中所存在的问题,各相关方面的研究十分活跃。本文简单地介绍和分析了有关研究的最新进展。     

新疆干旱区植物藜的种子异型性及其萌发机理

新疆干旱区分布的植物藜(Chenopodium album)的种子有黑色和褐色两种类型。对藜的异型性种子从形态结构、不同环境因素及激素或化学物质对萌发的影响以及同工酶谱等方面进行了研究,并对其萌发及适应异质环境的机理进行了讨论。结果表明:(1)藜的异型性种子在形态结构、萌发休眠特性等方面都存在明显差异:黑色种子种皮厚且硬,休眠,萌发慢,萌发率低;褐色种子种皮薄而软,不休眠,萌发快且萌发率高;(2)黑色种子的休眠可通过切除胚根外缘种皮得以完全解除;(3)赤霉素、乙烯利对黑色种子的萌发无明显促进作用;KNO3可较显著促进黑色种子的萌发;协同使用乙烯利和KNO3时,可显著提高黑种子萌发率,完全打破休眠;(4)黑色种子和褐色种子的酯酶、过氧化物酶及过氧化氢酶同工酶谱带存在差异;(5)黑色种子的萌发需要光照,而褐色种子则对光不敏感;低温贮藏对二者的萌发均无显著影响,尽管黑色种子的萌发率有波动。研究结果初步显示黑色种子的休眠是内源(胚)和外源(种皮)因素共同所致。藜的种子异型性及其萌发机理的形成是其对新疆干旱区异质化环境的高度适应。     

肿瘤MUC1/Y的克隆及其胞外段在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化和鉴定

为获得MUC1 Y全长cDNA及其胞外段蛋白 ,以用于进一步的生物学功能及肿瘤生物学治疗的研究 .利用RT PCR从HeLa细胞中扩增MUC1 Y全长cDNA ;PCR扩增其胞外段 ,克隆到原核表达载体pGEX 2T ,转化DH5a菌 ,诱导表达 ;亲和层析纯化 ;凝血酶酶切、GST活性及N端蛋白测序鉴定 ;免疫家兔制备多克隆抗体 .所得MUC1 YcDNA的开放读框为 759bp ,登录于GenBank(AF12 552 5) .其信号肽编码序列缺失 9bp ,第 3 3 1位发生G A转换 ,造成缬氨酸突变为蛋氨酸 .表达获得约 4 0kD融合蛋白GST Yex ,占菌体总蛋白 2 5%～ 3 0 % ,其中 70 %～ 80 %为可溶性 ,经亲和层析一步纯化 ,纯度 >90 % ,GST比活性为 0 2 1U μg .凝血酶酶切后的N端蛋白序列测定表明与已知序列完全一致 ,抗血清ELISA效价为 1∶2 50 0 0 0 .结果表明 ,克隆到发生碱基缺失和突变的MUC1 Y全长cDNA ,获得MUC1 Y胞外段蛋白及其多抗 ,可进一步用于相关研究 .     

珊瑚Acropora pulchra (brook)的化学成分研究

首次对来自中国北海涠洲岛的珊瑚Acropora pulchra(brook)的化学成分进行研究,从乙醇浸提液的乙酸乙酯部分分离鉴定出7个化合物,并确立结构为十五酸十七酯(I)、正十六碳醇(Ⅱ)、鲨肝醇(Ⅲ)、1-正十六酸甘油酯(Ⅳ)、N—l—羟基甲基-2-羟基-(E,E)-3,7-十七碳二烯基十六酸酰胺(V)、胸腺嘧啶(Ⅵ)、尿嘧啶(Ⅶ)。     

河流搬运花粉的初步研究

为进一步认识华北平原不同沉积相的孢粉组合特征和冲积物孢粉的沉积机制,作者对华北平原两条较大的河流——黄河、滦河的表层水样进行了孢粉分析１　材料和方法１．１　取样工具为容积１０００ｍＬ的塑料桶。将河流表层水灌入桶内,加盖封好带回实验室。将水样倒入２０００ｍＬ烧杯内,滴入现代石松孢子１３０００粒,以进行孢粉浓度计算［１］,同时加入少许冰醋酸,加速沉淀。将沉淀物置于离心杯中,用２．１和１．９的重液进行浮选,最后制成活动片在显微镜下进行鉴定、统计。１．２　冲积物的采集用一个圆筒形的铲,拴上绳子抛入河底,…     

绞股蓝总皂甙含量与其营养器官和生长期相关性的研究

应用组织化学和植物化学方法,研究绞股蓝总皂甙含量与其营养器官和生长期的相关性。结果表明,不同营养器官中绞股蓝总皂甙含量叶最高,茎次之,根茎和根最低。绞股蓝地上部分总皂甙含量从营养生长→开花→结果不同生长期呈现由低→高→低的变化趋势,其中7、8、9月的开花期绞股蓝总皂甙含量达到顶峰,为药材最佳采收时间。研究还得出,绞股蓝叶的形态结构特征与其总皂甙含量相关,可作为选育绞股蓝优良品种的指标。     

秦岭植物园野生常绿阔叶木本植物

研究了秦岭植物园的野生常绿阔叶木本植物,报道了该区域有野生常绿阔叶木本植物10科11属14种,其中有1科,2属,3种为秦岭北坡新记录。