全文获取类型
收费全文 | 133篇 |
免费 | 8篇 |
国内免费 | 9篇 |
出版年
2023年 | 2篇 |
2021年 | 1篇 |
2020年 | 1篇 |
2015年 | 3篇 |
2014年 | 5篇 |
2013年 | 11篇 |
2012年 | 3篇 |
2011年 | 19篇 |
2010年 | 7篇 |
2009年 | 4篇 |
2008年 | 6篇 |
2007年 | 8篇 |
2006年 | 5篇 |
2005年 | 5篇 |
2004年 | 6篇 |
2003年 | 2篇 |
2002年 | 1篇 |
2001年 | 3篇 |
2000年 | 1篇 |
1999年 | 1篇 |
1998年 | 2篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 1篇 |
1995年 | 2篇 |
1994年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
1991年 | 5篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 3篇 |
1988年 | 3篇 |
1987年 | 2篇 |
1985年 | 3篇 |
1984年 | 2篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 3篇 |
1980年 | 3篇 |
1979年 | 2篇 |
1978年 | 1篇 |
1977年 | 3篇 |
1976年 | 2篇 |
1971年 | 1篇 |
1970年 | 3篇 |
1965年 | 1篇 |
1964年 | 1篇 |
1962年 | 1篇 |
1957年 | 3篇 |
1955年 | 1篇 |
1953年 | 1篇 |
排序方式: 共有150条查询结果,搜索用时 15 毫秒
41.
42.
Jean-Philippe Demers Nikolaos G. Sgourakis Rashmi Gupta Antoine Loquet Karin Giller Dietmar Riedel Britta Laube Michael Kolbe David Baker Stefan Becker Adam Lange 《PLoS pathogens》2013,9(3)
The Type Three Secretion System (T3SS), or injectisome, is a macromolecular infection machinery present in many pathogenic Gram-negative bacteria. It consists of a basal body, anchored in both bacterial membranes, and a hollow needle through which effector proteins are delivered into the target host cell. Two different architectures of the T3SS needle have been previously proposed. First, an atomic model of the Salmonella typhimurium needle was generated from solid-state NMR data. The needle subunit protein, PrgI, comprises a rigid-extended N-terminal segment and a helix-loop-helix motif with the N-terminus located on the outside face of the needle. Second, a model of the Shigella flexneri needle was generated from a high-resolution 7.7-Å cryo-electron microscopy density map. The subunit protein, MxiH, contains an N-terminal α-helix, a loop, another α-helix, a 14-residue-long β-hairpin (Q51–Q64) and a C-terminal α-helix, with the N-terminus facing inward to the lumen of the needle. In the current study, we carried out solid-state NMR measurements of wild-type Shigella flexneri needles polymerized in vitro and identified the following secondary structure elements for MxiH: a rigid-extended N-terminal segment (S2-T11), an α-helix (L12-A38), a loop (E39-P44) and a C-terminal α-helix (Q45-R83). Using immunogold labeling in vitro and in vivo on functional needles, we located the N-terminus of MxiH subunits on the exterior of the assembly, consistent with evolutionary sequence conservation patterns and mutagenesis data. We generated a homology model of Shigella flexneri needles compatible with both experimental data: the MxiH solid-state NMR chemical shifts and the state-of-the-art cryoEM density map. These results corroborate the solid-state NMR structure previously solved for Salmonella typhimurium PrgI needles and establish that Shigella flexneri and Salmonella typhimurium subunit proteins adopt a conserved structure and orientation in their assembled state. Our study reveals a common structural architecture of T3SS needles, essential to understand T3SS-mediated infection and develop treatments. 相似文献
43.
目的:探索硫氧还蛋白(Trx)抗体柱对Trx融合蛋白纯化的可行性。方法与结果:对含有Trx基因的质粒表达载体pTrxFus进行改造,在Trx读框之后加入6×His序列,并在大肠杆菌中表达C端带有6×His标签的Trx,经Ni2+柱亲和纯化后制备多克隆抗体;把经蛋白A纯化后的抗体偶联在溴化氰活化的琼脂糖凝胶上,制成Trx抗体柱;用此抗体柱纯化与Trx融合表达的豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI),SDS-PAGE结果显示获得了纯度较高的Trx-CpTI。结论:用Trx抗体制成的免疫亲和层析柱可以有效纯化Trx融合蛋白。 相似文献
44.
目的:探讨患者创伤后发生急性肾损伤的患者发病率、临床特点以及发病危险因素,以便有效预防和及早治疗。方法:回顾性分析我院重症监护室2004年1月至2010年12月收治的创伤患者相关临床资料,分析创伤后急性肾损伤的发病率以及发病危险因素。结果:共有106例患者纳入我们的研究,其中47例患者创伤后并发急性肾损伤。在发生急性肾损伤患者中,平均年龄为31±19岁,84.6%为男性;其中25例为脓毒血症引起,18例是因为低血压导致急性肾功能损伤。所有患者中,24例患者出现了少尿的症状,19例患者进行了透析治疗。腹部外伤[(OR)=3.66,P=0.027]和应用呋塞米[(OR=4.10,P=0.026)]是发生急性肾损伤的危险因素。结论:急性肾损伤时创伤后的严重并发症之一,死亡率高。只有找到创伤后发生急性肾损伤的危险因素,才能有效预防和及早治疗。 相似文献
45.
目的:探讨夏枯草对人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度夏枯草在不同作用时间内对在体外培养SW579细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:夏枯草可在G0/G1期阻滞人甲状腺癌细胞系SW579的增殖,使S期细胞比率降低;在一定范围内,夏枯草的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论:夏枯草能抑制人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。 相似文献
46.
开花植物具有多样性的生殖系统,其中单性花的形成是促进异交、避免自交衰退、保持遗传多样性的重要途径。单性花物种分布于被子植物不同进化分支上的事实表明,物种的雌雄异花性可能是通过不同的机制进化形成的。本文从花发育、性染色体、植物激素和环境因素四个方面,阐述了被子植物性别分化调控机制的研究进展。 相似文献
47.
48.
APP N端片段的神经营养作用 总被引:6,自引:0,他引:6
APP是β-淀粉样肽的前体蛋白,由695-770个氨基酸经,春N端水解产物可分沁至细胞外环境。AP具有促进神经细胞生长作用,其中319-335肽段即APP17肽能提高动物的学习记忆能力。其他APP片段是否具有神经营养功能未见报道。本研究通过观察APP N端片段对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响以及对实验性糖尿病动物行为的影响,希望APP促进神经细胞生长的其他肽段。用化学合肥APP N端多肽片段,以SY5Y细胞MTT代谢率、细胞计数、LDH漏出率和实验性糖尿病小鼠水迷宫试验结果为观察指标。结果APP64肽、29肽、11肽均有促进SY5Y细胞生长的作用,APP11肽可提高糖尿病动物水迷宫测试成绩,说明可溶性APP的N端可能具有神经营养作用,我们认为保持此作用的最短片段为APP11肽,此肽段的发现为进一步研究APP的构效关系奠定了基础。 相似文献
49.
50.
目的:尝试应用RNA干扰(RNAi)沉默猪源PK-15细胞中的猪内源性反转录病毒(PERV),并通过反转录酶活性及pol基因相对荧光定量PCR检测沉默效果。方法:依据GenBank公布的PERV pol基因序列,采用Invitro-gen公司的BLOCK-iT RNAi Designer软件设计Stealth小干扰RNA(siRNA)序列;将合成的siRNA转染PK-15细胞,72 h后检测细胞上清PERV反转录酶活性及细胞内pol基因拷贝数并评价沉默效果。结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272~3296 bp的序列能有效沉默PERV。结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV沉默,为进一步研究天然抗病毒分子与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源异种移植研究中去除PERV提供了一种可供尝试的方法。 相似文献