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41.
Localization of yeast RNA polymerase I core subunits by immunoelectron microscopy. 总被引:1,自引:1,他引:0 下载免费PDF全文
C Klinger J Huet D Song G Petersen M Riva E K Bautz A Sentenac P Oudet P Schultz 《The EMBO journal》1996,15(17):4643-4653
Immunoelectron microscopy was used to determine the spatial organization of the yeast RNA polymerase I core subunits on a three-dimensional model of the enzyme. Images of antibody-labeled enzymes were compared with the native enzyme to determine the localization of the antibody binding site on the surface of the model. Monoclonal antibodies were used as probes to identify the two largest subunits homologous to the bacterial beta and beta' subunits. The epitopes for the two monoclonal antibodies were mapped using subunit-specific phage display libraries, thus allowing a direct correlation of the structural data with functional information on conserved sequence elements. An epitope close to conserved region C of the beta-like subunit is located at the base of the finger-like domain, whereas a sequence between conserved regions C and D of the beta'-like subunit is located in the apical region of the enzyme. Polyclonal antibodies outlined the alpha-like subunit AC40 and subunit AC19 which were found co-localized also in the apical region of the enzyme. The spatial location of the subunits is correlated with their biological activity and the inhibitory effect of the antibodies. 相似文献
42.
部分酶解酵母高效电击转化研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以酵母质粒YCp50为外源DNA,电击转化部分酶解酵母宿主菌AB1380,转化效率稳定在10~6转化子/μg质粒DNA左右,比不酶解酵母或酵母原生质球作受体的电击转化效率高一个数量级以上,也比PEG介导的酵母原生质球转化高3~5倍,而且适合于大片段DNA如水稻YAC分子的转化。达最佳转化时的有关技术参数为:新接菌种通气培养至细胞密度1×10~8~1.5×10~8个/ml;转化时细胞密度控制在1×10~9~1.5×10~9个/ml;每毫升酶解缓冲液加15u溶菌酶(lyticase),30℃下处理酵母5min进行部分酶解;电击时,电场设置在6.25kV/cm、电容25μF,电击后直接铺板。 相似文献
43.
Pei-Wen Chiang SuQing Wang Paul Smithivas Woo-Joo Song Saravanan Ramamoorthy Joseph Hillman Sheryl Puett Margaret L. Van Keuren Eric Crombez Arun Kumar Thomas W. Glover Diane E. Miller Chun-Hui Tsai C.Clare Blackburn Xiao-Ning Chen Zhiguang Sun Jan-Fang Cheng Julie R. Korenberg David M. Kurnit 《Genomics》1996,34(3):328
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45.
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47.
以淀粉珠为载体的亲和层析法分离纯化高温α淀粉酶张学忠,宋伦,王群,吴晓霞,唐锌进(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023;南京师范大学生物系,南京210024)金凤燮等人从酒曲中筛选出高产热稳定α淀粉酶的菌株,命名为Bacillussp-JF... 相似文献
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49.
50.
双价外壳蛋白基因植物表达载体的构建及马铃薯转基因植株的鉴定 总被引:10,自引:0,他引:10
在克隆了马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y 病毒(PVY)和马铃薯卷叶病毒(PLRV)的外壳蛋白基因的基础上,构建同时包含PVX和PVY 与PVY 和PLRV 两个外壳蛋白基因植物表达框架的表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草(Nicotianatabacum )和生产上常用的几个马铃薯(Solanum tuberosum )优良品种:“Favorita”、“虎头”、“克4”。经PCR检测证明外源基因已整合到植物的染色体上,得到批量转基因植株。在转PVX+PVY 外壳蛋白基因的烟草上接种PVX (5 μg/m L)、PVY(20 μg/m L)病毒,得到有一定抗性的植株 相似文献