全文获取类型
收费全文 | 4367篇 |
免费 | 653篇 |
国内免费 | 2398篇 |
出版年
2024年 | 52篇 |
2023年 | 149篇 |
2022年 | 240篇 |
2021年 | 323篇 |
2020年 | 284篇 |
2019年 | 291篇 |
2018年 | 219篇 |
2017年 | 196篇 |
2016年 | 190篇 |
2015年 | 290篇 |
2014年 | 410篇 |
2013年 | 363篇 |
2012年 | 480篇 |
2011年 | 485篇 |
2010年 | 376篇 |
2009年 | 367篇 |
2008年 | 403篇 |
2007年 | 385篇 |
2006年 | 323篇 |
2005年 | 305篇 |
2004年 | 231篇 |
2003年 | 196篇 |
2002年 | 169篇 |
2001年 | 162篇 |
2000年 | 131篇 |
1999年 | 116篇 |
1998年 | 55篇 |
1997年 | 33篇 |
1996年 | 24篇 |
1995年 | 23篇 |
1994年 | 17篇 |
1993年 | 14篇 |
1992年 | 20篇 |
1991年 | 14篇 |
1990年 | 10篇 |
1989年 | 15篇 |
1988年 | 8篇 |
1987年 | 4篇 |
1986年 | 11篇 |
1985年 | 9篇 |
1984年 | 4篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 6篇 |
1981年 | 5篇 |
1980年 | 1篇 |
1965年 | 1篇 |
1955年 | 1篇 |
1950年 | 4篇 |
排序方式: 共有7418条查询结果,搜索用时 500 毫秒
271.
探索恒河猴皮肤干细胞的体外培养及纯化条件,为进一步的研究奠定基础. 通过组织块培养法和消化培养法 在体外培养恒河猴表皮细胞,然后用Ⅳ型胶原吸附法吸附20 min,获得快吸附细胞. 对快吸附细胞进行克隆培养,并进行免疫细胞化学双标染色、RT PCR鉴定 β1 整合素和角蛋白15的表达,用流式细胞仪鉴定纯化前后的细胞中 β1 整合素和角蛋白15的阳性细胞比例,并通过透射电镜观察细胞的超微结构. 组织块培养法和消化培养法均可获得表皮细胞,Ⅳ型胶原纯化后的细胞胞体较小,饱满,核/浆比例大,细胞镶嵌状排列. 细胞克隆分析显示,细胞全克隆生长率高. 细胞免疫荧光显示,分选后的细胞显示 β1 整合素和角蛋白15阳性. RT PCR检查呈现 β1 整合素和角蛋白15的特异性片段. 流式细胞仪检查显示,纯化前的细胞中角蛋白15阳性细胞占总细胞中的比例为8%, β1 整合素阳性细胞的比例为10.7%;纯化后,角蛋白15阳性细胞的比例为89.4%, β1 整合素阳性细胞的比例为88.5%. 通过组织块培养法和消化培养法均可培养获得活性良好的表皮细胞,Ⅳ型胶原吸附法是一种简便、有效的皮肤干细胞分离方法,可以为进一步的眼表上皮替代重建眼表提供足量的高纯度的干细胞建立可靠的物质基础. 相似文献
272.
昆虫抗菌肽研究和应用现状 总被引:3,自引:0,他引:3
昆虫在受到刺激或感染之后,在其血淋巴中会产生一种抗菌类物质,称抗菌肽。抗菌肽具有分子小、稳定性好、广谱抗菌、无毒副作用等特点,在农业、医药、食品等领域有广泛的应用前景。简要综述了昆虫抗菌肽的基础研究和应用现状。 相似文献
273.
NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′ RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不同的转录变异体.然后,通过PCR定向克隆和酶切亚克隆策略,构建了覆盖NFBD1基因5′侧翼区起始密码子ATG上游5 kb区域的一系列NFBD1启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,NFBD1启动子区域定位于主要转录起始位点区域附近1.5 kb的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,NFBD1启动子缺乏TATA盒,但含有典型的CCAAT盒和GC盒以及其它潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和NF-Y等转录因子可能参与NFBD1的转录调控 相似文献
274.
275.
276.
277.
278.
Lolium temulentum L. (Darnel ryegrass) has been proposed to be used as a model species for functional genomics studies in forage and turf grasses,
because it is a self-fertile, diploid species with a short life cycle and is closely related to other grasses. Embryogenic
calluses were induced from mature embryos of a double haploid line developed through anther culture. The calluses were broken
up into small pieces and used for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. A. tumefaciens strain EHA105 harboring pCAMBIA1301 and pCAMBIA1305.2 vectors were used to infect embryogenic callus pieces. Hygromycin was
used as a selection agent in stable transformation experiments. Hygromycin resistant calluses were obtained after 4–6 weeks
of selection and transgenic plants were produced in 10–13 weeks after Agrobacterium-mediated transformation. Fertile plants were readily obtained after transferring the transgenics to the greenhouse. Transgenic
nature of the regenerated plants was demonstrated by Polymerase chain reaction (PCR), Southern hybridization analysis, and
GUS staining. Progeny analysis showed Mendelian inheritance of the transgenes. The transformation system provides a valuable
tool for functionality tests of candidate genes in forage and turf grasses. 相似文献
279.
280.
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) LM1212菌株与典型的Bt菌株表型不同,可分化形成芽胞、形成细胞和晶体产生细胞。在LM1212菌株中,转录因子CpcR不仅参与了细胞分化过程,而且能够激活晶体蛋白基因cry35-like的启动子(P35)。【目的】筛选cpcR同源基因,验证其生物学功能。【方法】本研究克隆了2个cpcR同源基因,来源于蜡样芽胞杆菌的cpcR-c1和来源于东洋芽胞杆菌的cpcR-t,将cpcR及其同源基因分别构建在pHT304-P35-gfp、pHT304-P35-lacZ报告载体上,获得的重组质粒转入无cpcR基因且无晶体蛋白基因的Bt HD73–菌株中。利用激光共聚焦显微镜观察重组菌HD–(cpcR-c1-P35-gfp)和HD–(cpcR-t-P35-gfp)的细胞表型并进行芽胞计数实验。测定HD–(cpcR-c1-P35<... 相似文献