草菇低温胁迫初期应答关键通路的探究

本研究利用表达谱芯片技术解析了低温胁迫初期（0-120min）不同低温处理时间草菇转录组水平的变化。芯片结果分析发现在低温诱导过程中,低温处理20min内变化基因的功能为单加氧酶、氧化还原酶和细胞内的氧化还原。低温处理40min时表达差异基因具有结合RNA的功能。80min的时间段内,基因的功能比较集中于核酸物质和能量的代谢。CYP450的代谢途径在20-40min、60-80min和100-120min低温处理的菌丝体中均有显著性变化,表明这一通路在草菇低温处理过程中表现活跃。基因表达趋势分析发现34个表达差异基因富集到显著表达趋势模型,基因共表达网络分析发现VVO_04066位于网络的核心地位,推测VVO_04066通过提高磷酸肌醇特异性磷脂酶C（PI-PLC）的胞内水平,促进糖蛋白和几丁质的合成,从而完成草菇细胞的低温胁迫应答。     

不同时间采集的小牛血清对CHO-C28细胞培养及表达的影响

通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。     

博尔纳病病毒对BALB/c小鼠感染性检测

目的分析博尔纳病病毒（Borna disease virus,BDV）H1766株对BALB/c小鼠的感染性。方法选择病毒滴度为2.0×107FFU/ml的BDV病毒液分别对新生和成年BALB/c小鼠进行脑内接种,并用相同病毒液对原代培养的新生BALB/c小鼠脑细胞进行接种。经过一定时间的病毒作用后分别提取总RNA,采用巢式RT-PCR方法检测BDV-p40基因,并通过免疫组化方法检测脑内接种脑组织中BDV-P40蛋白。结果脑内接种病毒的小鼠脑组织中可以检测到BDV-p40基因和BDV-P40蛋白,培养的小鼠脑细胞中可以检测到BDV-p40基因。结论BDVH1766株可以感染新生和成年的BALB/c小鼠。     

不结球白菜离体培养与植株再生体系研究

以4个不结球白菜品种为试材,对外植体、苗龄、激素的组配、培养基中琼脂和AgNO3浓度等再生因素进行了筛选优化,并探讨了抗坏血酸(AsA)对不结球白菜不定芽分化的影响。结果显示:以4~7d苗龄的带柄子叶为外植体诱导不定芽效果较好;MN培养基中4mg/L6-BA与0.5mg/LNAA的搭配有利于不定芽形成;琼脂的浓度变化对不定芽分化影响较大,以9g/L琼脂为宜;培养基中添加5~7.5mg/L的AgNO3、0.1~0.5mmol/L的AsA可显著提高不定芽的发生频率和质量。通过不定芽继代培养、生根培养和驯化移栽建立了能够获得较高再生频率的不结球白菜离体再生体系。     

椎体成形术的生物力学研究现状和进展

椎体成形术是通过向椎体病损部位注入骨粘合剂,达到缓减疼痛、增强椎体稳定性的目的。由于椎体成形术的治疗原理、远期疗效、并发症均与其生物力学密切相关,其生物力学引起广泛的关注。本文通过椎体强化的生物力学研究方法及椎体强化后的生物力学特性,总结影响椎体强化效果的因素及影响程度,并对椎体强化生物力学研究中存在的问题及研究前景进行展望。     

利用球孢链霉菌发酵液消化双歧杆菌细胞壁提取质粒的研究

目的寻找一种经济适用的提取双歧杆菌质粒的方法。方法利用球孢链霉菌发酵产生的变溶菌素来消化双歧杆菌细胞壁,提取质粒,并与商业化溶菌酶法比较。结果球孢链霉菌发酵液与溶菌酶均成功提取到质粒。结论利用球孢链霉菌发酵液提取质粒经济简便。     

东海哈氏仿对虾的数量分布和生长特性研究

根据1986－1990年和1997－2001年对东海26°00′－ 33°00′N,127°00′E以西海域拖虾调查资料,共测定哈氏仿对虾样品9468尾,对哈氏仿对虾的数量分布和生长特性进行研究。结果表明,东海哈氏仿对虾的平均渔获率为458.7/g•h,其中31°00′－ 33°00′N海域最高,达到990.9/g•h,高峰期出现在秋季。主要分布在20－60m水深海域,适温范围10－24℃,适盐范围30－34,为广温广盐性虾类。周年雌虾明显多于雄虾,雌雄性比为1：0.62。雌虾个体也大于雄虾,雌虾周年平均体长和平均体重分别为71.6mm,5.0g;雄虾为57.9mm,2.3g,最大值出现在5－7月,最小值出现在9－10月。繁殖期5－9月,繁殖盛期6－7月。周年出现两次快速生长期,第一次在10-12月,其相对增长率雌虾为9.3%－17.5%,雄虾为7.9%－13.9%,第二次在翌年4－7月,雌、雄虾的相对增长率分别为4.3%－13.8%和6.2%。为合理利用该资源,宜在捕捞群体平均体长、平均体重最小值出现阶段进行保护,以提高其经济效益和生态效益。     

药物诱导的玉米根尖凋亡细胞表面电特性研究(英文)

细胞凋亡过程中细胞表面膜的电位很可能会发生改变。本文首次报导：应用细胞电泳技术（ｃｅｌｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）对细胞毒素类药物放线菌酮（ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ）、放线菌素 Ｄ（ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ Ｄ）和秋水仙碱（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ）等诱导的植物凋亡细胞与正常细胞之间电泳迁移率（ＥＰＭ）的差异进行了比较,对引起的膜电位变化进行了定量分析。实验以玉米根尖分生组织为材料,制备原生质体,经过适当剂量的药物处理（Ｆｉｇ．１－Ｂ）,在尽量减少细胞膜被破坏的情况下（Ｆｉｇ．２）,观察到：三种细胞毒素类药物的作用有所不同,被诱导的植物凋亡细胞的膜表面Ｚｅｔａ电位绝对值比正常细胞的高（Ｆｉｇ．１－Ａ）。本研究提示细胞电泳可对凋亡细胞表面膜电位的变化进行定量分析,为细胞凋亡的检测在方法上提供了新思路。     

褪黑素调节烟草丁香假单胞菌抗性的功能研究

为分析褪黑素(N-乙酰-5-甲氧基色胺)在植物先天免疫中的功能及调控机理,研究以病原菌丁香假单胞杆菌(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,Pst DC3000)—烟草互作系统为模型,检测了病原菌侵染对烟草褪黑素相关基因表达的影响,并探讨了褪黑素对植物叶片病原菌生长以及气孔开度和活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量的影响以及调控机理。结果表明:(1)Pst DC3000处理提高了烟草褪黑素合成(NtSNAT1)和受体(NtPMTR1)基因表达,且外源褪黑素处理降低了叶片中的病原菌含量。(2)与野生型植物相比,过表达大豆GmSNAT1基因显著提高了转基因烟草中内源褪黑素含量和NtPMTR1的表达,且转基因烟草叶片中的Pst DC3000菌落数显著下降。(3)外源褪黑素和细菌鞭毛蛋白多肽flg22处理诱导了野生型和转基因烟草保卫细胞中ROS产生和气孔关闭,且转基因植物对褪黑素和flg22诱导的气孔关闭和ROS产生比野生型烟草更加敏感。综上所述,研究表明褪黑素可能通过受体NtPMTR1介导的信号途径促进保卫细胞ROS产生,诱导气孔关闭,从而降低病原菌Pst DC3000的入侵。     

Notch inhibition promotes fetal liver stem/progenitor cells differentiation into hepatocytes via the inhibition of HNF-1β

In a previous study, the Notch pathway inhibited with N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester (also called DAPT) was shown to promote the differentiation of fetal liver stem/progenitor cells (FLSPCs) into hepatocytes and to impair cholangiocyte differentiation. The precise mechanism for this, however, was not elucidated. Two mechanisms are possible: Notch inhibition might directly up-regulate hepatocyte differentiation via HGF (hepatocyte growth factor) and HNF (hepatocyte nuclear factor)-4α or might impair cholangiocyte differentiation thereby indirectly rendering hepatocyte differentiation as the dominant state. In this study, HGF and HNF expression was detected after the Notch pathway was inhibited. Although our initial investigation indicated that the inhibition of Notch induced hepatocyte differentiation with an efficiency similar to the induction via HGF, the results of this study demonstrate that Notch inhibition does not induce significant up-regulation of HGF or HNF-4α in FLSPCs. This suggests that Notch inhibition induces hepatocyte differentiation without the influence of HGF or HNF-4α. Moreover, significant down-regulation of HNF-1β was observed, presumably dependent on an impairment of cholangiocyte differentiation. To confirm this presumption, HNF-1β was blocked in FLSPCs and was followed by hepatocyte differentiation. The expression of markers of mature cholangiocyte was impaired and hepatocyte markers were elevated significantly. The data thus demonstrate that the inhibition of cholangiocyte differentiation spontaneously induces hepatocyte differentiation and further suggest that hepatocyte differentiation from FLSPCs occurs at the expense of the impairment of cholangiocyte differentiation, probably being enhanced partially via HNF-1β down-regulation or Notch inhibition.