我国不同产地红车轴草异黄酮含量的测定

本文通过HPLC法首次对产于我国11省的红车轴草中7种主要异黄酮单体含量进行了测定,结果表明,7种异黄酮总量变化范围为0.105%~1.725%。7种异黄酮单体含量随产地变化较显著,德鸢尾素、红车轴草素、毛蕊异黄酮、芒柄花素、大豆黄素、染料木素和鸡豆黄素A的含量变化范围分别为:0~0.189%、0~0.066%、0.020%~0.076%、0.004%~0.948%、0~0.089%、0.020%~0.073%和0~0.424%。     

小黄蝠精子储存的组织学研究

小黄蝠是分布在我国南方典型的翼手类.为探讨小黄蝠是否具有精子储存的现象,利用组织学切片技术,研究不同月份小黄蝠性腺的发育情况,采用放射免疫测定方法测定了不同月份的小黄蝠血清性类固醇激素含量(雌二醇E2和睾酮T)的变化.结果显示:雄性小黄蝠5月份的附睾有部分的管腔呈中空状态,部份还有精子残留;7月附睾管腔细小、中空、尚未...     

A binding free energy hot spot in the ankyrin repeat protein GABPbeta mediated protein-protein interaction

The frequently observed ankyrin repeat motif represents a structural scaffold evolved for mediating protein-protein interactions. As such, these repeats modulate a diverse range of cellular functions. We thermodynamically characterized the heterodimeric GA-binding protein (GABP) alphabeta complex and focused specifically on the interaction mediated by the ankyrin repeat domain of the GABPbeta. Our isothermal titration calorimetric analysis of the interaction between the GABP subunits determined an association constant (K(A)) of 6.0 x 10(8) M(-1) and that the association is favorably driven by a significant change in enthalpy (DeltaH) and a minor change in entropy (-TDeltaS). A total of 16 GABPbeta interface residues were chosen for alanine scanning mutagenesis. The calorimetrically measured differences in the free energy of binding were compared to computationally calculated values resulting in a correlation coefficient r = 0.71. We identified three spatially contiguous hydrophobic and aromatic residues that form a binding free energy hot spot (DeltaDeltaG > 2.0 kcal/mol). One residue provides structural support to the hot spot residues. Three non-hot spot residues are intermediate contributors (DeltaDeltaG approximately 1.0 kcal/mol) and create a canopy-like structure over the hot spot residues to possibly occlude solvent and orientate the subunits. The remaining interface residues are located peripherally and have weak contributions. Finally, our mutational analysis revealed a significant entropy-enthalpy compensation for this interaction.     

大肠埃希菌耐药与抗菌药物使用量的相关性研究

目的探讨大肠埃希菌的耐药率与多种抗菌药物使用量之间的相关关系。方法计算主要抗菌药物每百床日的用药频度（DDDs）,以及温州医学院附属第一医院院内感染大肠埃希菌的耐药率,并采用多元线性回归的方法进行分析。结果大肠埃希菌对头孢他啶的耐药率与头孢哌酮和头孢克罗的用量呈负相关,与头孢他啶的用量呈正相关;对庆大霉素的耐药率与头孢他啶、哌拉西林的用量里负相关;对亚胺培南的耐药率与哌拉西林用量呈正相关,与季度呈负相关;对复方新诺明的耐药率与阿米卡星用量呈正相关;对呋喃妥因的耐药率与头孢他啶、去甲万古霉素用量呈负相关。结论在大肠埃希菌耐药水平和抗菌药物使用量之间存在相关关系。     

黑曲霉中内切菊粉酶基因及其全合成基因在解脂耶氏酵母中表达的比较

利用酵母密码子偏爱性将黑曲霉(Aspergillus niger)中的内切菊粉酶(Endoinu linase)基因通过基因全合成的方式合成为酵母密码子偏爱性的内切菊粉酶基因。然后将原始和全合成的内切菊粉酶基因克隆到解脂耶氏酵母表达载体PINA1296上,得重组解脂耶氏酵母表达载体pHBM2020、pHBM2021,将两种质粒分别转化解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)CLIB725,筛选得到重组解脂耶氏酵母CLIB725(pHBM2020)、CLIB725(pHBM2021),将两种重组酵母摇瓶培养,经SDS-PAGE、测酶活检测表明两种基因在解脂耶氏酵母中都有表达,全合成菊粉酶比原始菊粉酶酶活要高。     

温度与pH值对长江水系产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药基因转移影响分析

研究温度和pH值对长江水系中产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBL)大肠埃希菌(Escherichia coli)耐药基因转移影响规律,为今后介水疾病的预防与控制提供理论依据。采用滤膜法分离、梅里埃微生物分析系统鉴定菌株;将由长江水系分离出的产ESBL大肠埃希菌与大肠埃希菌NK5449进行接合,观察不同温度和pH值条件下接合频率变化情况;用纸片扩散法测定耐药谱;用PCR方法分析产ESBL供体菌与转移接合子β-内酰胺酶编码基因(bla),并对供、受体菌及转移接合子进行随机扩增多态性分析,判别转移接合子与供、受体菌的同源性。温度和pH值对产ESBL大肠埃希菌耐药基因水平转移影响明显,发生接合最适宜的pH值为7.1。温度对接合频率的影响具有双重性,相同条件下,某些大肠埃希菌接合频率随环境温度的降低率急剧下降,但某些大肠埃希菌的接合频率随环境温度下降有所上升。温度和pH值对产ESBL大肠埃希菌接合频率有重要影响。     

ΦC31位点特异性整合酶DNA结合功能域的鉴定

DNA结合功能域的确定是阐明位点特异性重组酶整合机制的关键,而对酶DNA结合功能域进行突变研究是提高酶整合效率和整合特异性的重要方法.为了鉴定ΦC31位点特异性整合酶的DNA结合功能域,依据对ΦC31整合酶序列的生物信息学分析结果,利用PCR和克隆技术在pET22b原核表达载体上构建ΦC31整合酶重组截短突变体表达质粒,将获得的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株扩大培养并用IPTG诱导融合蛋白的表达,经镍柱纯化获得了纯度达90%以上的重组蛋白,分子量也与预期大小一致,Western印迹确定了重组蛋白的特异性.凝胶迁移滞后实验显示野生型以及截短突变体蛋白ΦC311-528、ΦC311-472、ΦC311-413能与细菌附着位点DNAattB和噬菌体附着位点DNAattP结合的条带,而截短突变体ΦC311-353、ΦC311-279、ΦC311-120观察不到相应的结合条带.6个截短突变体质粒在体内重组活性蓝白斑实验中均表现为蓝斑,显示出皆丧失体内重组活性.研究证实,ΦC31整合酶半胱氨酸富集域(第353～413位氨基酸)具有DNA结合的功能,而C末端缬氨酸富集区(第528～613位氨基酸)也与其重组活性相关.这为进一步了解ΦC31整合酶的结构与功能,最终引导其结构进化,提高其特异性和整合效率奠定了基础.     

金针虫调查方法及评价

金针虫是一类重要的地下害虫,其种群数量调查是植物保护工作中的难点之一。文章概述金针虫种群数量调查的3种主要方法:土方抽样、诱饵诱捕及成虫性信息素诱捕。就其调查原理、特点及研究现状进行了介绍,并对各方法的不足及应用前景做了简要分析。     

昆明地区15种常见木本植物活枝的燃烧性

为分析比较不同植物活枝的燃烧性,在森林防火戒严期内,对昆明地区15种常见木本植物中小径级的活枝进行了热辐射引燃试验,对小径级的活枝进行了氧指数试验。在测定样品直径、含水率、引燃时间、有焰燃烧时间、试验过程中烟气温度和质量损失变化过程等基础上,提出并计算了表征活枝燃烧性能的综合燃烧特性参数S,根据该参数对15种植物中小径级活枝的燃烧性能进行了排序。结果表明,15种植物小径级的活枝均具有较强的阻燃性,燃烧性能顺序为:云南松<野八角<华山松<滇青冈<地盘松<云南樟<厚皮香<大白花杜鹃<炮状花杜鹃<云南含笑<小白花杜鹃<南烛<光叶石栎<元江栲<云南野山茶。根据氧指数及试验现象将15种植物的小径级活枝分为3类,其中难燃类4种(大白花杜鹃、野八角、厚皮香、南烛)、可燃类7种(云南含笑、云南松、地盘松、华山松、滇青冈、云南樟、云南野山茶)、较易燃类4种(小白花杜鹃、炮状花杜鹃、光叶石栎、元江栲)。分析了造成2种试验结果差异的主要原因。     

气候变化影响下大兴安岭地区21世纪森林火险等级变化预测

基于HadCM3模式输出的A2a和B2a情景下气候基准时段(1961-1990年)与未来不同时段(2010-2039年,2040-2069年,2070-2099年)的气候情景数据,结合Delta、WGEN降尺度方法和加拿大火险天气指标系统,划分了黑龙江大兴安岭地区森林火险等级,预估了研究区2010-2099年森林火险等级相对于基准年的变化,分析了森林火险等级长期预测的不确定性.结果表明:气候变化影响下,研究区21世纪平均极高、很高、中等火险的年均日数呈上升趋势,高、低火险的年均日数呈降低趋势.与基准年相比,A2a和B2a情景下研究区2040-2069年极高和很高火险的年均日数分别增加了43和36 d,2070-2099年分别增加了62和61 d.