7号淀粉酶链霉菌M1033菌株木糖异构酶晶体结构研究

7号淀粉酶链霉菌M1033菌株木糖异构酶(SDXyI).19nm分辨率晶体结构已经解出.晶体空间群为I222,晶胞参数为a=9.884nm,b=9.393nm,c=8.798nm.参考锈赤链霉菌木糖异构酶(SRXyI)的晶体结构模型,通过分析晶体密堆积关系和晶体学R因子搜索,获得了SDXyI晶体结构的初始模型.采用PROLSQ软件包使用0.60～0.19nm分辨率衍射数据对模型进行了修正.最终模型的晶体学R因子为0.177,键长键角均方根偏差分别为0.0019nm和2.1°.与SRXyI相比较,SDXyI整体构象未发生明显变化,活性中心构象有显著差异.     

抗菌肽B基因导入水稻及转基因植株的鉴定

构建了一个适合在水稻中表达的含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水和植株.Basta抗性鉴定,抗菌肽B基因PCR扩增分析,点渍印迹和Southern印迹分析结果表明,选择标记基因(bar)和抗菌肽B基因都已整合入转化水稻基因组中,Northern印迹分析证实了抗菌肽B基因在RNA水平上的表达.转基因水稻植株增强了对水稻白叶枯病和细条病的抗性.     

肿瘤抗原致敏的GM-CSF基因转染巨噬细胞对实验性肺转移肿瘤的治疗作用

研究将对巨噬细胞双重功能均具有激活作用的细胞因子GM-CSF的基因转染小鼠腹腔巨噬细胞,再经肿瘤抗原致敏后通过静脉注射用于实验性CT26结肠癌肺转移小鼠的治疗.结果表明,腺病毒介导的GM-CSF基因转染小鼠腹腔巨噬细胞在转染后4h即可分泌较高水平的GM-CSF.转染后10d仍可有效表达;转染后16h左右小鼠腹腔巨噬细胞MHCⅡ类分子的表达明显增强,其抗原提呈能力也达最高水平;对肿瘤细胞的杀伤活性显著增高;荷瘤3d的实验性CT26结肠癌肺转移小鼠经肿瘤抗原致敏的GM-CSF基因转染巨噬细胞治疗后第16天肺部转移结节数明显减少;经治疗小鼠脾细胞经诱导的CTL杀伤活性也明显升高.以上结果提示,GM-CSF基因转染及表达能有效增强小鼠腹腔巨噬细胞的抗原提呈能力及效应功能;经肿瘤抗原刺激后其对转移性肿瘤也有明显的治疗作用.     

神经生长因子介导的促神经生长化合物筛选系统的建立

为了合理评价化合物的促神经再生活性.用溴化四唑蓝(MTT)、分化计数、图象处理等方法，借助FK506、GPI1046阳性化合物，建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统.结果表明，无论在细胞存活实验还是在分化实验中，FK506、GPI1046都可以明显增强神经生长因子(NGF)的效应，即有促神经再生的作用.也就是说，这一系统将有助于从组合化学方法合成的化合物文库中，筛选出具有促神经再生活性的化合物.     

四川宜宾地区中华按蚊类型的初步研究

中华按蚊类型的问题,过去已有学者作过研究,早在1935年姚、吴二氏曾指出南京的中华按蚊有宽底和窄底两种类型存在(Yao等,1935)。Reid氏在1953年报告马来亚的中华按蚊类型已有7种(Reid,1953)。1958年冯兰洲等报告了杭州中华按蚊有“大型”与“小型”两种类型。继后有张本华、刘维德等和浙江卫生实验院都对这一问题有研究报告     

新版Tilia软件:中文指南和使用技巧*

Tilia软件一直是微体古生物学特别是孢粉学科使用最为普遍的一款专业计算机程序。该软件主要将样品数据经统计计算分析,将每个样品化石科属类型含量以图谱的形式依据地层深度或时间顺序排列显示,使化石数据转换为地层图式。基于各科属特别是优势或建群类型含量上下层位变化特点和规律,划分生物组合带,以图的形式直观解读生物群落的地史演替和环境变化等科学问题。由于此软件一直在英文语境下运行,功能多样,操作较为复杂,往往令国内初学者难以入手和深入。本文将以新版Tilia 2.0.45软件为对象,基于先期积累的使用经验,结合我国学者的思维方式,通过简单的孢粉数据实例,图解步骤和过程,力求通俗易懂。为此,推出"基础版"和"高阶版"两种使用说明以满足不同层次的人员需求,前者针对初学者旨在短时间内快速入门掌握孢粉百分比图谱制作的基本技巧,后者面向有一定操作经验学者力求在浓度图谱、通量图谱及"深度-年代"模型和Neotoma全球生态数据库等方面拓展提高。     

模糊聚类分析在中国伞形科当归亚族分类中的应用

针对伞形科前胡族当归亚族上属间界线划分的分歧,采用模糊聚类分析方法,在形态方面以属为分类单位,定量阐明了属间亲缘关系。化学方面,以裂解－气相色谱信息为分类依据肉获得的２７个种的数据揭示了当归亚族中属间的分类关系,结果表明,当归属和在中国分布的山芹属与广义当归属类群相近,并显示了东北长鞘当归和骨缘当归是一个较特殊的类群。     

Biological Characterization of Heat-stable Antifreeze Proteins from Leaves of Ammopiptanthus mongolicus

Antifreeze protein(afp) was purified from the heat stable proteins in the leaves of Ammopiptanthus mongolicus (Maxim.) Cheng f. by two-dimensional electrophoresis-electrophoretic elution. Its molecular weight and pi are about 40 kD and 9.0 respectively, and its thermal hysteresis activity (THA) is 0.9 ℃ at 20 g/L. afp is different from other antifreeze proteins. The N-terminal 20 amino acids of afp is SDDLSFTFNKFVPCQTDILF. alp is abundant in leaves and may play an important role in the antifreeze process in A. mongolicus during the period of ovenwintering.     

A novel recombinant adeno-associated virus vector packaging system with HSV-1 amplicon providing helper functions

A novel packaging system for producing recombinant adeno-associated virus (rAAV) vector was described. Instead of the conventional method for rAAV production by two-plasmid co-transfection followed by superinfection with adenovirus 5, an HSV-1 amplicon system expressing AAV-2 rep and cap genes from their native promoters was used to provide complete helper functions for rAAV replicating and packaging. This HSV-1 ampticon stock consisted of two kinds of infectious HSV-1 virions, a replicating-defective HSV-1 amplicon pseudovirus harboring multi-copies of AAV-2 rep and cap gene and a temperature-sensitive HSV-1 mutant strain ts-KOS. High-titer rAAV was generated with this new packaging system. This packaging system gives a simple and scaleable process for rAAV production.     

籼稻和粳稻中蜡质基因座位上微卫星标记的多态性及其与直链淀粉含量的关系

稻米直链淀粉是在由蜡质基因Wx编码的颗粒结合淀粉合成酶（GBSS）的催化下合成的。最近,在Wx基因的区段内发现了一段多态性微卫星序列（CT）n。对74个非糯籼稻和粳稻材料的（CT）n多态性进行了分析,并探讨了其与直链淀粉含量之间的关系。在74个品种（系）中共发现7种（CT）n片段（Wx等位基因）,即（CT）8,（CF）10,（CT）11,（CT）16,（CT）17,（CT）18,（Ch）19。在籼粳亚种间,不同（CT）n的分布存在差异较大：在籼稻中,以（CT）11和（CT）18为主,占92．6％,另有（CT）10和（CT）8各2份,（CT）17型1份;在粳稻中,以（CT）16、（CT）17为主,共占20份材料中的90．0％。在上述74个品种（系）中,以（CT）n表示的Wx基因型对稻米直链淀粉含量的决定系数R2达0．912,也即Wx基因型差异可解释这些材料直链淀粉含量变异的91．2％。还发现6份籼稻材料Wx座位上为杂合的（CT）18／（CT）11,其中2份为推广早籼优质品种浙9248和舟优903,并对其在遗传和育种研究中的意义作了探讨。